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相似文献
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1.
目的:建立一种快速检测牛肉中有机磷农药残留的方法.方法:从新鲜小麦粉、黄豆粉和玉米粉中分离植物酯酶,真空冷冻浓缩,羧甲基纤维素层析,真空冷冻干燥提取植物酯酶,并通过试验测得其酶促反应最适温度36.8℃,最适pH 7.7,酶促反应时间3 min,敌敌畏对其抑制时间8 min,显色剂2,6-二氯靛酚的最大吸收波长606 nm.结论:在相同条件下,提纯后的植物酯酶检测模拟有机磷农药残留阳性牛肉样品抑制率为99.5%,市售丁酰胆碱酯酶测得的抑制率为99.8%%,两者检测结果高度一致.  相似文献   

2.
有机磷生物传感器的研制   总被引:1,自引:0,他引:1  
有机磷生物传感器对于环境分析十分必要.利用乙酰胆碱酯酶与有机磷农药之间的特殊的亲和力,以乙酰胆碱酯酶为固定相,采用石英晶体用来做载体的材料,研制有机磷传感器.初步得到酶固定的最佳pH值及其浓度环境为pH=7,乙酰胆碱酯酶浓度为C=0.0133mol.l-1.并对敌百虫溶液进行测定,证明了pH值和浓度条件的合理性.  相似文献   

3.
薄层层析—酶抑制法检测有机磷和氨基甲酸类杀虫药剂   总被引:14,自引:0,他引:14  
提出了用薄层-抑制乙酰胆碱酯酶法,检查蔬菜,水果,粮食中农药残留的方法,此法对乙酰胆碱酯酶的抑制是特异的,它适用于在不具备精密仪器设备的小型实验站内检测农药残留量,对大多数有机磷和氨基甲酸酯类农药来说,其检测限在0.5-1.0μg/mL范围。它为在现场测定农药残留提供一种廉价和快速的方法。  相似文献   

4.
探讨利用大腹园蛛酯酶检测蔬菜中有机磷农药残留的技术和方法.结果表明:大腹园蛛腹部的酯酶活性显著高于头胸部,在37℃和缓冲液pH为7.0时,酯酶活性最高.有机磷农药乐果浓度的对数值与酶抑制率存在较好的直线关系,通过检测蔬菜洗脱液对蜘蛛酯酶抑制率的方法可以用来检测蔬菜中的有机磷农药残留.采用该方法检测时,乐果的检出限为0.509 4 mg/L.受检3种蔬菜的有机磷农药残留量均低于规定的标准.  相似文献   

5.
测定自行制备的乙酰胆碱酯酶(AChE)酶液和壳聚糖-AChE酶膜的酶学性质,并以壳聚糖-AChE酶膜分别检测乐果、甲胺磷、敌百虫、敌敌畏、甲基对硫磷5种有机磷农药,探讨采取酶膜进行快速检测有机磷农药残留的可行性.结果显示:壳聚糖-AChE酶膜的KappM为2.8×10-4mol/L,最适pH值为8.0,在pH值为8.0~8.5时活力稳定;最适反应温度为45℃左右,在15~60℃时较为稳定;半衰期达12d,固定化酶膜的实际应用性能较游离酶有较大改善.壳聚糖-AChE酶膜对不同类型的有机磷农药的敏感性差异很大,对甲基对硫磷最为敏感,其pI50为5.57,对其它4种农药pI50为4.0左右;以酶活力抑制率16%为农药检出标准,甲基对硫磷的检出限为0.4mmg/L,其他4种检出限为3~22mg/L,只有甲基对硫磷达到检测要求.  相似文献   

6.
利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(PAGE),研究了试虫中毒后不同阶段体内酯酶同工酶的变化情况。两种杀虫剂对粘虫体内酯酶同工酶影响的研究表明,中毒试虫体内酯酶同工酶不同程度地被抑制,个别酶带消失,也有新带的出现,在抑制酯酶的程度上,有机磷类高于氨基甲酸酯类。认为试虫中毒后不同时期体内酯酶同工酶的变化并无一定规律可循。  相似文献   

7.
模拟了胃(肠)液中pH值、蛋白酶、进食量和微量金属离子等对阿魏酸酯酶(FAE)酶活稳定性的影响.结果表明:模拟胃液环境对阿魏酸酯酶酶活影响显著,模拟肠液环境对阿魏酸酯酶稳定性影响较小;蛋白酶酶活的增加不利于阿魏酸酯酶稳定性,但影响不显著;混合金属离子对阿魏酸酯酶稳定性影响不显著;进食量增加可以保护阿魏酸酯酶通过胃液环境,进入小肠发挥作用.在模拟胃液中,阿魏酸酯酶的酶活迅速降低,1h时,酶活为25%左右,调整为小肠环境时,对阿魏酸酯酶有瞬时激活作用;5h时,酶活为30%左右;胃肠道pH值是影响阿魏酸酯酶酶活的主要因素,胃蛋白酶、肠道中的金属离子对阿魏酸酯酶酶活影响较小,进食量对肠道中阿魏酸酯酶有保护作用,模拟肠液对经过模拟胃液处理的阿魏酸酯酶有瞬时激活作用.  相似文献   

8.
为了快速测定蔬菜中残留的农药,以西红柿为材料,采用淀粉酶抑制法定量检测对硫磷,探讨了最佳测定条件和各种干扰因素的影响。结果表明,显色物质的最大吸收峰为590nm,最佳反应温度为37℃,最佳反应时间6min,最佳pH值6.8。该方法回收率达到80%以上,精确度达到0.01mg/L。  相似文献   

9.
应用植物水解酶抑制技术快速检测水样中有机磷及氨基甲酸酯类农药 ,对反应的温度、pH和时间进行优化 .常用的几种有机磷及氨基甲酸酯类农药的测定限在 0 .0 0 15~ 0 .33mg·L-1范围内 .应用本方法对被农药污染的某河段进行了监测  相似文献   

10.
离子交换法固定化鸡肝酶及其低温保存的实验研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用离子交换法,以大孔径弱酸性阳离子交换树脂 D113为固定化载体,对可被农药抑制的鸡肝酶进行固定化.通过实验得到了最佳固定条件:离子浓度在0.25~0.375 mol/L 之间,固定时间为75 min,酶液活力为(6±2)U/mL.制备的固定化酶可在用于农药残留快速检测的酶传感器中作为生物识别元件使用.同时,初步研究了液体酶和固定化酶的保存,对固定化酶的制备和使用有参考价值.  相似文献   

11.
从RalstoniaeutrophaCH34基因文库中筛选出编码酯酶EstA的基因 ,将其克隆于大肠杆菌可以得到稳定表达 ,表达产物具有较高的酯酶活性。对重组酯酶的各种酶学性质进行的研究表明 ,酯酶EstA的最适反应 pH为 7.0 ,其最适反应温度为 5 0~ 80℃ ,该酶对酸碱环境适应性较强。在 pH4~ 10 .5范围内保持稳定 ,而在 0~ 6 0℃范围内保温 2h ,该酶仍能保持 80 %以上的活力。  相似文献   

12.
目的:从土壤中筛选产a-淀粉酶活力较强的菌株并对其酶学性质进行初步研究。方法:结合选择性分离培养,碘液检测法,酶活力测定和形态学检测等方法从土壤中分离出产酶活力较强的菌株,并对其所产仅一淀粉酶的最适反应温度和pH值进行研究。结果:共分离到4株能产a-淀粉酶的菌株,其中菌株4产酶活力最高。该菌株所产仅一淀粉酶最适反应温度为50~60℃,最适pH值为6.2。结论:分离到1株产a-淀粉酶酶活力较强的芽孢杆菌,所产仪一淀粉酶属于中温淀粉酶,最适pH值为6.2。  相似文献   

13.
 采用CMC平板筛选和刚果红染色等方法,从湖南科技大学校园腐烂木芙蓉根部土壤中分离1株产纤维素酶菌株CXB001,经生理生化测试、16S rDNA分子进化树分析,鉴定菌株为Bacillus velezensis。对该菌株的生物特性研究表明,其最适生长温度为37 ℃,在10~50 ℃,pH 5.0 ~11.0中能生长,在pH 6.0~9.0,34~40 ℃,1.5% ~3.5% NaCl 的培养条件下,最适产酶。CXB001所产纤维素酶最适反应温度为50 ℃,最适反应pH为5.0;在20 ℃、pH 5.0~ 7.0具有较好的稳定性。Co 2+对纤维素酶具有激活作用,Mg2+,Fe2+对纤维素酶具有抑制作用。  相似文献   

14.
Amylase is one of the important industrial enzymes.In this study,we obtained the crude amylase from Serinicoccus profundi sp.nov.strain MCCC 1A05965T.The optimal temperature for the amylase was 40℃.The optimal pH of the enzyme was around 8.0.The characterizations of the crude enzyme were unstable of heat and pH.Mn2+ increases about 35% of original activity.Mg2+,Ca2+ and some surfactants slightly inhibit the activity of enzyme.  相似文献   

15.
菠萝蛋白酶的基本性质研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
本文介绍了菠萝蛋白酶的紫外吸收光谱、分子量、米氏常数 K_■、激活剂等抟影响,以及最适的 pH 和温度、热失活情况等基本性质.实验表明菠萝蛋白酶为非金属酶;发现不同来源的菠萝蛋白酶的最适 pH 为中性,都具有一定的耐热性.  相似文献   

16.
壳聚糖固定化云芝漆酶的制备及特性   总被引:14,自引:0,他引:14  
以壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂制备固定化漆酶,测定了不同戊二醛浓度、交联时间、给酶量以及固定化时间对固定化漆酶活性的影响.结果表明,固定化反应的最佳条件为戊二醛浓度5%,交联时间8 h,给酶量20 mg/g载体,固定化时间6 h,在此条件下制备的固定化漆酶酶活性保持率为52.2%.此固定化漆酶具有最大活性时的溶液pH值在4.5,相比于自由漆酶的最佳pH值5.0,其向酸性偏移;与自由漆酶相比,固定化酶有很好的稳定性和可重复使用性.  相似文献   

17.
对蜡状芽孢杆菌Bc-05菌株的发酵上清液经硫酸铵分级沉淀、DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换层析所获得的纤溶酶进行性质研究.结果表明:经纤维蛋白平板法检测该酶有直接水解纤维蛋白和激活纤溶酶原的双重作用,最适作用温度37℃,最适pH=8.0,在pH=8.0条件下25℃和37℃放置24 h酶活力仍保持77.52%和78.96%,该酶体外对兔血凝块有明显的溶解作用;Ca2+,Mn2+离子对该酶具有激活作用,而Cu2+,Fe3+完全抑制其纤溶活性,PMSF,EDTA和DTT对该酶有抑制作用,说明活性中心含有二硫键、金属离子和丝氨酸;测其N端10个氨基酸序列为NH2-Val-Thr-Pro-Thr-Asn-Ala-Val-Asn-Thr-Gly,与其他生物来源的纤溶酶相比较没有同源性.  相似文献   

18.
对肉色曲霉产碱性脂肪酶的发酵条件进行优化,摇瓶实验表明,该菌株最适产酶培养基组成为(%):黄豆饼粉2,NH4NO3 0.5,玉米粉1,糊精1,柠檬酸钠0.1,K2HPO4 0.5,FeSO4 0.006,大豆油0.6,吐温-800.5mL,pH 9.0.最适产酶温度为28℃,产酶高峰出现在96小时,最佳装液量为35mL,碱性脂肪酶菌株的酶活可达9.3U/mL.脂肪酶的最适作用pH为9.0,最适作用温度为30℃.  相似文献   

19.
从赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)匀浆液中提取出粗酶液,利用DNS法分析粗酶液中内切型纤维素酶(也称Cx酶)的活力.用刚果红染色法确定了赤子爱胜蚓含有3种内切型纤维素酶,将其分别称作Cx酶Ⅰ、Cx酶Ⅱ和Cx酶Ⅲ.经DEAE-Cellulose-52离子交换层析分离内切型纤维素酶,得到0.15~0.20 mo...  相似文献   

20.
以卵清蛋白为载体的固定化木瓜蛋白酶的制备及其性质   总被引:8,自引:2,他引:6  
以变性的卵清蛋白为载体, 用戊二醛为交联剂固定木瓜蛋白酶. 通过正交实验考察了固定化pH值、 交联剂戊二醛浓度、 交联时间和酶用量对固定化木瓜蛋白酶活力的影响,确定了最适固定化条件: 5%戊二醛, pH 6.0, 交联时间20 h, 每克载体含酶量12 mg. 对比研究了游离木瓜蛋白酶和固定化木瓜蛋白酶的性质, 所得到的固定化木瓜蛋白酶最适温度90 ℃, 最适pH 9.0, 米氏常数53.6 mg/mL, 其热稳定性及耐热性均较游离酶显著提高.  相似文献   

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