He-Ne激光复合诱变选育柠檬酸高产菌

柠檬酸产生菌黑曲霉经多次物理、化学诱变处理后会对其产生一定的抗性,在菌种改良过程中不易得到优良高产菌株。为此,以黑曲霉(Aspergillus niger)28#为出发菌株,采用金属盐类化合物—LiCl处理黑曲霉的孢子,然后用He-Ne激光辐照对柠檬酸发酵菌黑曲霉进行复合诱变。结果表明,各实验组发生了明显的不同变化,说明该方法能诱发黑曲霉细胞的遗传变异,适合于菌种的改良选育。研究采用玉米粉为原料,摇瓶发酵时间72h,发酵温度35±1℃,通过溴甲酚绿指示性平板辅助筛选和摇瓶发酵,筛选出了3株柠檬酸发酵高产突变菌株,柠檬酸产酸率提高了19.29%,转化率从87.07%提高到103.86%,其中菌株L42遗传相对稳定,可作为进一步诱变筛选的出发菌株。     

恒温发酵与变温发酵柠檬酸过程及其比较

以纤维素水解液为原料，利用黑曲霉发酵柠檬酸。研究了恒温发酵和变温发酵过程，并对二者发酵柠檬酸的产量进行了比较。结果表明：恒温发酵在8h～104h为主要产酸期，在l0h时，产酸量最大；变温发酵可刺激菌体生长，产酸量随时间的增加而增加，与恒温发酵相比，变温发酵初期的产酸量较高，之后，产酸量降低。但变温发酵最终菌体的量要高于恒温发酵。     

玉米秸秆水解液的黑曲霉发酵生产高浓度柠檬酸

柠檬酸是在饮料、制药、化妆品等领域有广泛应用的重要有机酸。利用玉米秸秆等木质纤维素原料生产柠檬酸可以显著降低其生产成本。目前,木质纤维素柠檬酸发酵的技术指标偏低,不具备工业应用价值。本文以黑曲霉Aspergillus niger SIIM M288为发酵菌株,以干法稀酸预处理和生物脱毒后获得的玉米秸秆酶水解液为原料,在优化条件下柠檬酸发酵质量浓度达到97.45g/L,相对于葡萄糖的得率达到了87.27%,是迄今为止所有报道的最高指标,已经接近以淀粉为原料的柠檬酸发酵指标。这一结果为以木质纤维素为原料生产柠檬酸的技术产业化提供了重要的依据。     

重组Pichia酵母(Muts)发酵过渡阶段关键酶活分析

重组Pichia酵母表达系统的发酵存在从利用甘油为碳源生长到利用甲醇为碳源表达外源蛋白的发酵表达过渡阶段。Pichia酵母过渡阶段碳源代谢途径关键酶酶活分析表明：甲醇诱导3h AOX2酶活为0，4h时突然增加到0．05U，继续诱导，酶活缓慢增加；在过渡阶段甲醛脱氢酶和6-P-葡萄糖脱氢酶分别增加了6．1倍、2．5倍，而丙酮酸脱氢酶和异柠檬酸脱氢酶分别下降为原酶活的29．4％及16．4％，表明甲醇诱导后甲醇完全氧化代谢途径得到强化，而糖酵解途径和三羧酸循环途径代谢作用减弱。     

柠檬酸高产黑曲霉菌株选育与发酵新底物研究

本研究利用Aspergillus niger AS3.3928作为对照菌株以废弃苹果榨汁为底物,设计了四因素四水平的正交实验。在pH6,温度31℃,甲醇含量2%,发酵时间4d的最适条件下,黑曲霉的发酵最好。将土壤中分离培养获得的20株黑曲霉,选出菌株透明圈相对较大的A1、A2、A5、A11这4株。在最适条件下,根据4株菌发酵废弃苹果榨汁生产柠檬酸的情况来进行复筛,得到菌株A2;进而对A2进行鉴定,初步确定所得菌株为黑曲霉。在最适条件下,A2发酵废弃苹果榨汁其柠檬酸的产量为1.539 mg/mL,经对A2进行T21紫外诱变,筛选得到A2-1。结果表明A2-1菌株柠檬酸产量比其父本增加了36.6%,比对照菌株AS3.3928增加了38.53%。     

2-脱氧葡萄糖抗性黑曲霉高产柠檬酸突变株的选育

以黑曲霉 W3为出发菌株 ,通过 60 Co-γ射线诱变 ,在以甘油为碳源的基本培养基上 ,选育出2 -脱氧葡萄糖 (2 - DG)抗性突变株。以玉米粉为原料的柠檬酸发酵的结果表明 ,产酸高于出发菌株(8.4 8g/ 10 0 m L )的突变株约占 13.5% ,其中突变株 KI- 5产酸比 W3菌株提高 18%。     

柠檬酸发酵工艺的探讨

本文用正交设计试验方法探讨柠檬酸连续浅盘发酵的条件.试验菌种是黑曲霉变异株.主要原料为甘蔗废糖蜜.对于柠檬酸的浓度和生产能力而言,其最优方案为:连续流加时间168h,添加液流速25ml/h;添加液糖度22BX;添加液中甲醇含量3g/100ml.其中,甲醇是影响最显著的因素.连续浅盘培养比静态浅盘培养,其柠檬酸生产能力提高一倍.连续流出的醪液再循环是可行的.     

植酸酶工程菌产酶条件优化研究

为研究影响植酸酶酵母工程菌的产酶因素，利用摇瓶发酵对毕赤酵母工程菌产植酸酶的最佳甲醇诱导量、诱导时间等因素进行实验分析。结果显示，残留甘油、甲醇浓度、诱导培养时间对植酸酶生产具有重要影响，其中甘油残留会使植酸酶分泌时间延迟，1.5% 甲醇具有最佳诱导效果，在第2天酶活可以达到约1 100 U/mL，低浓度甲醇诱导产酶缓慢积累，而高浓度甲醇对菌体产生毒害。该研究为进一步优化植酸酶工程菌高密度发酵工艺奠定了基础。     

以木薯为原料直接发酵柠檬酸工艺研究及工业化放大

以黑曲霉T-0218为发酵菌种,进行了以木薯为原料生产柠檬酸的发酵条件研究及工业化放大试验.确定了最佳的发酵工艺:发酵培养基中碳源质量浓度≤200g/L,接种菌丝球数量≥10000mL-1,种龄16-24h.在最佳的发酵工艺条件下,放大试验取得了满意的结果,其生产指标:产酸141 g/L,周期60.3 h,转化率100.4%,发酵指数2.34g·(L-1·h-1).     

UV和NTG复合诱变柠檬酸生产菌种黑曲霉

为了提高柠檬酸的生产水平,利用紫外线(UV)和亚硝基胍(NTG)对柠檬酸生产菌种黑曲霉进行了复合诱变,通过溴甲酚绿选择性平板初筛和摇瓶复筛,获得了一株遗传性能稳定的高产菌株UN-08,产酸率为15.80%.与出发菌株相比,产酸增幅达到26.40%,糖酸转化率为98.75%,发酵指数为1.32 kg/(m3·h).此外,通过对高产菌株UN-08的发酵条件进行研究,确定了此菌株生产接种的适宜孢子数量为106～108个/mL,发酵温度应控制在34～36℃内,溶氧应采用分段控制,前期(0～40 h)应控制在0.12 m3/(m3.min)左右、后期(40～96 h)应控制在0.15 m3/(m3·min)左右.     

等离子诱变选育柠檬酸高产菌

黑曲霉TN09是1株柠檬酸生产菌株.为了进一步提高柠檬酸的生产水平,利用等离子对柠檬酸生产菌黑曲霉TN09进行了诱变.诱变后的孢子悬液涂布玉米液化液平板,35,℃培养至72,h测量透明圈直径,以酸解透明圈直径大于2.2,cm、菌落直径大于0.5,cm、其比值大于4.8的菌落作为初筛柠檬酸菌株,然后进行摇瓶复筛获得了1株遗传性能稳定的高产菌,与出发菌株(产酸12.46,g/dL)相比产酸增幅达到8.67%.     

从发酵液中吸附提取柠檬酸的研究

本文选用吸附容量大的884(?)树脂,考察柠檬酸与草酸在该树脂上的竞争吸附。用微分床测定草酸存在下柠檬酸吸附和解吸过程的总传质系数。用显式差分法解以总传质系数表征的动力学过程数学模型。结果表明:草酸有较大的竞争吸附性,且因草酸存在,柠檬酸吸附过程的总传质系数比纯柠檬酸溶液的为小,解吸过程的总传质系数则比纯柠檬酸溶液的大。过程数学模型理论透过曲线与柠檬酸纯溶液,柠檬酸与草酸混合液及发酵液的实验值吻合良好。     

有机氮源对柠檬酸发酵的影响

对柠檬酸发酵使用的薯干原料中的总氮、可溶性氮及非蛋白氮的含量进行了测定 ,并通过发酵实验考察了培养液中含氮量与柠檬酸产量的关系。在薯干培养液中添加某些氨基酸或玉米蛋白的酶解液进行发酵实验 ,结果证明 ,添加适量的有机氮源对柠檬酸产量有促进作用 ,特别是对质量低劣的薯干原料促进效果更加明显 ,柠檬酸产量可比对照提高27 %     

柠檬酸发酵条件的研究

控制好柠檬酸生产过程中的发酵条件,是实现优质高产的关键所在。本文研究了工厂生产中如何控制pH值,通风及温度等条件,以提高转化率增加柠檬酸产量。     

正十六烷柠檬酸的发酵动力学与传氧正十六烷柠檬酸的发酵动力学与传氧(英文)

利用筛选所得解脂复膜孢子酵母（Ｓａｃｈａｒｏｍｙｃｏｐｓｉｓｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）１４６０菌,在反应器中对正十六烷发酵生产柠檬酸进行了动力学研究。在Ｋｏｎｏ和Ｍｏｒｅｓｉ提出的动力学模型的基础上,结合本实验发酵过程的特点,得出本实验条件下柠檬酸发酵过程的细胞生长及产酸动力学模型,并通过经验回归与表观气速（ＷＳ）关联,确定了模型参数。模型计算值与实测值吻合良好。     

柠檬酸发酵液的活性炭吸附处理法

提出了用活性炭吸附处理柠檬酸发酵液的工艺条件及流程。探讨了湿度、通量、停留时间、再生碱液浓度等对吸附、脱附操作的影响。解决了萃取法制柠檬酸操作时的界面污物现象，为充实该法制柠檬酸提供了依据。     

从柠檬酸发酵液中提取柠檬酸的清洁生产新技术——ILCS色谱法在有机酸分离提取过程中的应用

从柠檬酸发酵液中提取柠檬酸的提取工艺直接影响到产品的产量与质量。本文简单叙述了一种新的柠檬酸分离方法,与现行方法比较,它具有回收率高、环境污染少、经济效益显著等特点。这项新技术将成为从发酵液中分离提取柠檬酸的清洁生产工艺。     

柠檬酸环境友好钝化液配方研究

针对传统的不锈钢钝化液使用浓硝酸、浓硫酸、铬酸等强氧化剂存在较高的安全隐患,操作条件苛刻的问题,采用挂片在滚筒中旋转浸泡的方式进行钝化,研究不锈钢柠檬酸双氧水钝化工艺,探讨最佳工艺条件,并利用塔菲尔曲线测得其自腐蚀电流密度以表征其耐腐蚀性能.研究表明:钝化效果的影响因素显著性顺序为柠檬酸质量分数>双氧水质量分数>钝化温度>钝化时间;柠檬酸环境友好钝化液的最佳配方为:柠檬酸质量分数10%,双氧水质量分数15%,稳定剂F质量分数15%,缓蚀剂E质量分数1%,温度40,℃,钝化时间60,min.柠檬酸双氧水钝化后测得不锈钢自腐蚀电流密度为5.210×10-6,μA/cm2,小于传统钝化后测得的不锈钢自腐蚀电流密度(6.098×10-6,μA/cm2).新型的柠檬酸配方钝化效果比传统配方的钝化效果好,对环境的污染负荷小,为化工集装罐实际钝化应用提供了基础数据.