饲用复合酶制剂的发酵及应用

以粮食加工副产物为原料，经多菌种混合固态发酵后制备了高酶活的饲用复合酶制剂。培养基配比为麦麸豆粕米糠＝ ２７１。３０ ℃培养４６ ｈ 后， 每克干物质中含有糖化酶２ ０５０ Ｕ， 纤维素酶３ ７６０ Ｕ，蛋白酶７ ３４０ Ｕ，果胶酶３３１ Ｕ。     

里氏木霉制备木聚糖酶的产酶历程

以玉米芯木聚糖为原料,里氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｓｅｉ）ＲｕｔＣ３０为菌种,采用改进的Ｍａｎｄｅｌｓ配方制备木聚糖酶,产酶历程与制备纤维素酶时有较大差异。具体表现在产酶周期短,ｐＨ值基本无下降的趋势,酶液中可溶性蛋白质浓度较低。底物浓度为７ｇ／Ｌ时,木聚糖酶活力达１２５６ＩＵ／ｍＬ,比活力、酶得率及酶产率分别为８１９０ＩＵ／ｍｇ蛋白质、１７９４３ＩＵ／ｇ木聚糖和４１８６．７ＩＵ／Ｌ·ｄ。产酶最终ｐＨ应控制在６～７较为适宜,酶活力最高。ｐＨ超过７．０,酶可能失活。酶解结果表明,木聚糖酶对木聚糖干粉具有很高的降解效率,当每克底物的酶用量为０．１克木聚糖干粉产的酶液量时,酶解得率一般可达９０％左右。     

补料分批发酵提高耐高温α-淀粉酶发酵活力的研究

对耐高温α-淀粉酶分批发酵与补料分批发酵工艺进行了研究,结果表明,在35t发酵罐生产条件下,初糖淀粉质量浓度为200g/L,当发酵液中还原糖DE值降至25mg/mL以下时,开始3～5L/min流速流加复合营养盐培养基,使发酵液中DE值维持在20～25mg/mL水平,控制总糖质量浓度为245g/L,在最佳补料分批发酵工艺条件下,放罐酶活力为15600U/mL,较分批发酵的9649U/mL提高61.7%,同时每标吨酶耗淀粉量可降低20%.     

淀粉微球亲和吸附纯化淀粉酶的研究

淀粉微球一次吸附纯化α－淀粉酶，酶比活提高２．３倍，每克干粉酶活力提高１６．５倍，蛋白质最大吸附量高达１２５ｍｇ／ｍＬ床体积。ｐＨ６．０硫酸铵浓度为２０％时，淀粉微球对酶的吸附能力量最强。     

α-淀粉酶和糖化酶的表达及酿酒酵母工程菌的构建

将切除了５′端非编码区５０碱基对片段的黑曲霉糖化酶ＧＡＩｃＤＮＡ与大麦α淀粉酶基因重组进大肠杆菌酵母穿梭载体,构建重组表达质粒ｐＭＡＧ１１,转化酿酒酵母ＧＲＦ１８,获得含α淀粉酶和糖化酶双基因的酵母工程菌ＧＲＦ１８（ｐＭＡＧ１１）．在酵母ＰＧＫ基因启动子和终止信号的调控下,α淀粉酶和糖化酶基因获得高效表达,９９％的表达产物分泌至胞外．在含ｗ＝１５％的可溶性淀粉的ＹＰＳ培养基中培养４４ｈ,淀粉水解率达到９９％,并能发酵产生酒精     

精米厂节碎米发酵性饮料的研究

讨论了以节米碎米为主要原料，生产含汽发酵性饮料的工充程和工艺参数。结果表明：将节米适度粉碎，有利于糖化发酵的进行，采用以α－淀粉酶液化（温度９０℃，时间３０ｍｉｎ，用量１５ｕ／ｇ淀粉），酿酒酵母（０．０１％）与酒曲（０．３％）混合发酵，以及发酵液混充ＣＯ２等工艺，研制出的发酵性饮料口感好，风格突出。     

用聚乙二醇/磷酸盐双水相体系从枯草杆菌发酵液中提取α-淀粉酶

本文介绍了用聚乙二醇／磷酸盐双水相体系从发酵液中提取α－淀粉酶的过程。详细研究了聚乙二醇（ＰＥＧ）的平均分子量、ＰＥＧ的浓度、成相的盐的浓度、ＮａＣｌ浓度对α－淀粉酶和总蛋白的分配系数以及上相对下相的相体积比的影响，并得到最佳的分离条件。实验表明用 １８％（Ｗ／Ｗ）ＰＥＧ １５００和 １０％（Ｗ／Ｗ）磷酸钾盐（ｐＨ＝６．５）和 ０．０５ｍｏｌ／ｌ　ＮａＣｌ组成的双水相体系， α－淀粉酶的提取率可达 ９４．３％。     

复合纤维素酶在酒精生产中的应用研究

在酒精生产中使用复合纤维素酶,将原料中的纤维素、半纤维素等降解为可发酵性糖,从而提高酒精产率,增加经济效益.复合纤维素酶包括纤维素酶、β-淀粉酶、磷酸糊精酶等多种酶系,使用量1‰.以瓜干粉为原料,采用5批试验进行小试;以玉米为原料,采用糖化罐加入法和发酵罐加入法进行中试,同时做空白对照试验,结果取16个罐平均值.结果表明:复合纤维素酶可提高出酒率1%左右,降低粮耗3%,缩短发酵时间10 h,中试以加入糖化罐为好,年产万吨酒精可增加经济效益愈80万元.     

克鲁维酵母y－85菊粉酶水解菊粉的研究及其中试

克鲁维酵母（Ｋｌｕｖｅｒｏｍｙｃｅｓｓｐ．）Ｙ－８５在菊粉提取液培养基中生长产菊粉酶，其细胞和胞外的菊粉酶活力分别约占菊粉酶总活力的７６％和２４％．试验中以酶发酵液作酶液．该酶的Ｓ／Ｉ值为１５．２．酶液在５０，５５和６０℃下保温１ｈ，活力分别残留１００％，９６％和６５％；在８℃下放置７ｄ，１４ｄ，酶活力分别残留９８％和９６％．在ｐＨ３．６～７．０内，酶活性十分稳定．５ｍｍｏｌＬ－半胱氨酸和Ｆｅ＋２分别可使酶活力提高１０．４％和４１．２％．ｙ－８５菊粉酶水解菊粉的适宜条件是：底物为总糖浓度１０％～１５％菊粉提取液，ｐＨ５．０，温度为５５℃，酶用量为底物每克糖加酶８００ｕ（以蔗糖为底物测酶活力）或２６．３ｕ（以菊糖为底物测酶活力）、搅拌酶解６ｈ．在上述条件上，底物降解率最高可达９８．５％．酶解液中，果糖占总还原糖量的８５％．用１１００Ｌ罐进行酶解中试，５批试验，底物降解率平均达９４．２％．     

杆菌肽生产菌种选育及发酵新工艺研究

杆菌肽是一种重要的饲料添加剂,开展菌种选育和发酵工艺研究提高杆菌肽产量十分必要。使用紫外线诱变技术选育淀粉酶分泌能力增强菌种,以加快杆菌肽积累速率。通过静态吸附和解吸实验筛选吸附杆菌肽的树脂。借助发酵吸附分离耦合试验以解除产物反馈抑制,并考察树脂加入时间对杆菌肽产量的影响。选育得到的菌株Bacillus licheniformis Y8226A发酵周期明显缩短。借助发酵吸附分离耦合策略,发酵开始30 h后在50 m L发酵液加入D152树脂1.0 g,最终杆菌肽产量与对照组相比提高了27.40%。通过紫外线诱变选育得到杆菌肽高效生产菌种,使用D152树脂开展发酵吸附分离耦合试验可显著提高杆菌肽产量。