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相似文献
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1.
目的繁殖并鉴定HO-1基因敲除(HO-1-/-)小鼠。方法将引进的HO-1基因敲除杂合子小鼠,进行SPF级饲养,与C57BL/6野生型小鼠配种繁殖,提取子代小鼠的基因组DNA,PCR法特异性扩增HO-1基因片段,使用双脱氧测序法测得基因序列。子代小鼠出现3种基因型:野生型、杂合子型及纯合子型。杂合子小鼠进一步配种繁殖,以获得更多的基因敲除纯合子小鼠,纯合子小鼠用以课题研究。结果 HO-1基因敲除杂合子小鼠的饲养和繁殖均获得成功,获得了HO-1基因敲除纯合子和杂合子小鼠。结论正确的饲养繁殖及鉴定方法是从HO-1基因敲除杂合子小鼠中获得纯合子小鼠的有效途径。  相似文献   

2.
目的建立(PTA-1-/-/ApoE-/-)双基因敲除小鼠(double-gene knockout,DKO)模型,探讨该小鼠的繁育及鉴定方法,为进一步利用该小鼠研究相关疾病奠定基础。方法将引进的PTA-1-/-及ApoE-/-基因敲除小鼠通过杂交和互交的方法进行繁殖,以得到DKO小鼠。结果经过PCR基因鉴定的方法证实PTA-1-/-/ApoE-/-双基因敲除小鼠繁育成功。结论正确的饲养繁殖及鉴定方法是获得该DKO纯合子小鼠的有效途径。  相似文献   

3.
目的建立及鉴定Pumilio1/Pumilio2(Pum1和Pum2)双基因条件性敲除的小鼠模型,为进一步研究PUF家族在哺乳动物精子发生中的生物学功能奠定基础。方法将构建的Pum1条件性敲除和Pum2条件性敲除的两个品系小鼠进行交配并繁殖,最终繁殖成功的子代小仔Pum1和Pum2两个基因均为纯合子。对子代以剪趾方式进行编号,提取子代小鼠脚趾或鼠尾基因组DNA,用PCR法和琼脂糖凝胶电泳鉴定基因型。结果 Pum1和Pum2双基因条件性敲除的小鼠模型繁殖成功,同时获得更多PUF家族双基因条件性敲除的小鼠。结论成功建立了Pum1和Pum2双基因条件性敲除的小鼠模型;正确的交配繁殖策略和鉴定方法是获得PUF家族双基因条件性敲除小鼠的有效途径。  相似文献   

4.
以高脂饲料饲喂昆明种小鼠构建高血脂小鼠模型,灌胃给予高、中、低剂量(0.4,0.2,0.1g/kg)蚯蚓冻干粉,每天1次,同时饲喂高脂饲料,以仅饲喂高脂饲料组小鼠为对照,共饲养10周.提取小鼠肝脏总RNA,应用半定量RT-PCR技术检测实验组与对照组小鼠胆固醇逆转运相关基因卵磷脂胆固醇酰基转移酶(lecithin cholesterol acyltransferase,LCAT)和脂蛋白酯酶(lipoprotein lipase,LPL)mRNA表达水平.结果表明,蚯蚓冻干粉极显著提高实验组小鼠LCAT mRNA表达水平(P0.01),显著提高LPL mRNA表达水平(P0.05),提示这是蚯蚓冻干粉能够降低高血脂小鼠血浆胆固醇水平的原因之一.  相似文献   

5.
目的 探讨繁殖和鉴定补体c3基因敲除小鼠的实验方法。方法将所引进的补体c3基因敲除杂合子小鼠(c3+/-)进行饲养并繁殖,其子代出现三种基因型的小鼠,即纯合子c3-/-、杂合子c3+/-、野生型c3+/+,采用ELISA与PCR相结合对子代小鼠基因型进行鉴定。结果繁育出135只子代小鼠,经鉴定,(=3+/+、c3+/-、C3-/-各为38只、68只、29只,经爿。检验,子代小鼠分离比例符合孟德尔遗传规律。结论正确的饲养繁殖以及子代鉴定是从杂合子小鼠中获得补体c3基因敲除小鼠的有效途径。  相似文献   

6.
目的繁殖和鉴定PAX-8基因敲除小鼠。方法将引进的杂合子小鼠进行饲养并繁殖,繁殖成功后其子代中将会出现野生型、杂合子以及纯合子3种基因型,提取每种基因型小鼠尾部基因组DNA,用PCR法进行鉴定,将其雄性杂合子与雌性杂合子交配,依照孟德尔遗传定律就有可能获得较多的基因敲除纯合子小鼠。结果PAX-8杂合子小鼠的繁殖和饲养均获得成功,亦获得了较多的基因敲除纯合子小鼠。结论正确的饲养繁殖以及鉴定方法是从杂合子中获得PAX-8基因敲除纯合子小鼠的有效途径。  相似文献   

7.
目的 观察p53基因敲除小鼠与BALB/c小鼠在生长发育和繁殖性能方面的差异.方法 p53基因敲除小鼠和BALB/c小鼠各34只,雌雄各半,观察其2周龄至12周龄的体质量和体长,并随机选取30笼一雌一雄所产第2胎仔鼠进行幼仔个数的统计.结果 在生长发育方面,3周龄时p53基因敲除小鼠与BALB/c小鼠体质量无明显差异,P=0.846>0.05;6周龄时p53基因敲除小鼠体质量明显低于BALB/c小鼠,P=0.000< 0.05;体长在3周龄和6周龄时p53基因敲除小鼠体长明显低于BALB/c小鼠,P=0.000 <0.05.在繁殖性能方面,p53基因敲除小鼠同样明显低于BALB/c小鼠,P=0.000<0.05.结论 初步研究了p53基因敲除对小鼠的繁殖与发育的影响,与BALB/c小鼠比较均有显著差异.  相似文献   

8.
目的为了繁育和鉴定p53基因敲除小鼠,将引进的杂合子小鼠进行饲养繁殖,杂合子用于继续保种。方法对其幼鼠剪尾提取基因组DNA,采用PCR方法进行基因型鉴定。结果对引进小鼠已成功饲养和繁殖,并得到纯合基因缺失型小鼠。结论正确的饲养、繁殖及基因鉴定方法对于基因敲除小鼠的获得和保种具有重要的意义。  相似文献   

9.
目的繁殖和鉴定ApoE~(-/-)小鼠,建立血管损伤模型,为进一步研究动脉粥样硬化奠定基础。方法将引进的小鼠采用1只雌性与1只雄性同笼的方式进行繁殖。从子代小鼠尾巴中提取DNA,用PCR法和琼脂糖凝胶电泳法鉴定小鼠的基因型。获取ApoE~(-/-)纯合子小鼠,并绘制其0~20周龄生长曲线。采用油红O脂类染色法从血管形态学方面观察ApoE~(-/-)小鼠。结果成功繁育出的ApoE~(-/-)纯合小鼠较C57小鼠生长缓慢,且20周龄ApoE~(-/-)小鼠血管有明显损伤。结论利用ApoE~(-/-)纯合子小鼠能够建立良好的血管损伤模型。  相似文献   

10.
目的对Ifnar基因敲除小鼠繁育及鉴定方法进行分析,为多种病毒研究提供理想的动物模型。方法将引进的纯合Ifnar基因敲除小鼠,以1雄2雌的合笼方式进行饲养繁殖,从仔鼠中提取鼠尾基因组DNA,PCR法扩增目的基因片段,琼脂糖凝胶电泳进行基因型结果判定。结果 Ifnar基因敲除小鼠繁育成功,获得了一批基因敲除鼠,使用PCR方法成功鉴定出Ifnar基因敲除纯合子小鼠。  相似文献   

11.
目的 建立Smad2基因敲除小鼠胚胎库。方法 利用OPS法对Smad2基因敲除小鼠胚胎进行玻璃化冷冻保存,并比较不同杂交组合小鼠的超数排卵数、解冻胚胎的复苏率及发育率。结果 两组不同杂交组合(Smad2^+/-♂×Smad2^+/-♀和Smad2^+/-×Smad2^+/-♀)小鼠平均超排卵数分别为14.13枚和24.60枚;复苏率分别为90.16%和91.67%;囊胚发育率分别为73.08%和77.05%。这些结果表明Smad2基因敲除杂合子母鼠的超排数量明显低于野生型母鼠的超排数量,而二者胚胎解冻后的复苏率和囊胚发育率没有显著差异。因此我们主要通过对野生型小鼠超数排卵,然后与Smad2基因敲除杂合子雄鼠交配的方法获取胚胎,进行玻璃化冷冻保存,现已冻存胚胎1256枚。结论 成功建立了Smad2基因敲除小鼠胚胎库。  相似文献   

12.
目的探讨两个封闭群昆明小鼠的行为学差异并评估行为学试验方法检测昆明小鼠行为的可信度。方法应用小鼠行为学试验检测两个不同封闭群昆明小鼠的行为差异并做试验方法的复测信度检验。两个封闭群昆明小鼠各取20只雄性小鼠分别记为A组、B组,两组小鼠经过适应性饲养3 d后进行首次试验,记录体质量(之后每天记录体质量并绘制体质量增长趋势图),做衣架试验、网屏试验、蔗糖偏嗜度试验、旷场试验和强迫游泳试验等。相隔7d进行复测试验。用SPSS17.0软件处理数据并检验各行为学方法的复测信度。结果行为学差异检测中A组、B组首测昆明小鼠体质量、蔗糖偏嗜度、旷场试验水平运动、总分、网屏试验各项结果差异具有统计学意义(P0.05);复测试验中体质量、蔗糖偏嗜度、网屏试验差异具有统计学意义(P0.05);复测信度试验中粪便颗粒试验为不可信(信度系数为负值),衣架试验和旷场试验中垂直运动记分可信度较差,其它试验相关性均为可信(体质量为高度可信)。结论 A、B两组封闭群昆明小鼠体质量增长速度、蔗糖偏嗜度和网屏试验存在差异;行为学检测方法中信度评级为体质量强迫游泳蔗糖偏嗜度水平运动总分网屏试验衣架试验垂直运动。  相似文献   

13.
以Eya1基因的敲除突变小鼠为实验对象,初步研究了Eya1基因在小鼠眼发育中的作用.结果发现,Eya1基因功能完全丧失的敲除突变纯合子(Eya 1-/-)胚胎的双侧眼皮均不能融合,27.3%的Eya1 /-胚胎单侧或双侧眼皮不能完全融合;而在Eya 1基因有较强表达的其它主要结构如晶状体(1ens)、色素视网膜(pigmental retina)、眼神(optic nerve)中均未发现异常.结果表明,Eya 1为小鼠眼皮融合的决定性基因;而在眼的其它结构的发育中存在与Eya 1具有互补作用的基因。  相似文献   

14.
温胆汤对高脂血症大鼠及小鼠体内脂质代谢调节机理研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
目的 :探求温胆汤对实验动物体内脂质代谢调节作用的机理。方法 :采用腹腔注射蛋黄乳剂的方法建立急性高脂血症小鼠模型 ,观察温胆汤对急性高脂血症成年小鼠粪便脂质含量、血清总胆固醇 (TC)、血清总甘油三酯 (TG)、低密度胆固醇 (LDL c)含量、血清丙二醛 (MDA)含量、血清超氧化物歧化酶 (SOD)活性、肝脏总脂解酶(LA)活性、脂蛋白脂肪酶 (LPL)活性和肝脂酶 (HL)活性的影响 ;建立大鼠高脂血症模型 ,观察温胆汤对大鼠血脂(TC、TG)水平、总脂解酶 (LA)、脂蛋白脂酶 (LPL)和肝脂酶 (HL)活性 ,以及肝脏低密度脂蛋白受体 (LDLR)基因表达的影响。结果 :温胆汤可降低小鼠粪便脂质含量 ,显著降低急性高脂血症小鼠血清TC、TG、LDL c含量 (P <0 .0 5 ) ,温胆汤还可提高血清SOD活性 ,降低MDA含量 ,达到降低体内脂质过氧化程度的目的。同时 ,温胆汤可提高肝脏脂蛋白脂肪酶 (LPL)活性和肝脏总脂解酶 (LA) ,但对肝脂酶 (HL)活性无明显影响。在针对高脂血症大鼠的实验研究中发现 ,温胆汤能够显著抑制大鼠血清总胆固醇 (TC)、血清总甘油三酯 (TG)浓度 ,提高脂蛋白脂酶(LPL)和总脂解酶 (LA)活性 ,但对肝脂酶 (HL)活性无明显影响 ;逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)实验显示高脂饲料能显著降低大鼠肝脏LDLRmRNA水平 ,温胆汤能显?  相似文献   

15.
对我院培育的近交系小鼠HAMS/C的生长,繁育和某些脏器纱数进行了初步研究,并与其并系DBA/S做了对照,结果表明:该系小鼠生长发育快,繁殖力高,仔鼠成活率。  相似文献   

16.
雌性Akt2基因缺失小鼠生殖表型研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
通过对雌性Akt2 基因敲除纯合子小鼠(Akt2(-/-))及野生型小鼠(Akt2(+/+))基础指标、大体形态学指标、血清糖脂水平和性激素水平等方面的评估,探讨Akt2基因缺失对糖脂代谢和卵巢功能影响.雌性Akt2(+/+)及Akt2(-/-)小鼠各16只,行口服糖耐量(OGTT)实验(2mg/kg),阴道涂片监测动情周期,于动情间期进行动力学实验,将纯合子和野生型小鼠分别随机分为空白组和刺激组2组,刺激组予HMG(人绝经期尿促性激素)(0.5IU/g)刺激2h,空白组予等体积的生理盐水刺激2h,检测各组小鼠体重、体内脂肪重量、血脂、空腹胰岛素水平和生殖激素水平,卵巢常规病理检测各组小鼠卵巢形态学变化.结果发现,同野生型小鼠相比,纯合子小鼠动情周期显着延长(P<0.05),随机血糖、0h血糖、2h血糖、空腹胰岛素水平和HOMA指数均显著升高(P<0.05),而血清甘油三醑(TG)水平则显著降低(P<0.05);性激素检测发现纯合子小鼠血清17羟孕酮(17-OHP)、雌二醇(E2)、△17-OHP、△E2均显着升高.综上,本文认为Akt2基因不仅可以影响机体糖脂代谢,同时也影响卵巢功能,说明胰岛素调节糖代谢的关键信号分子对卵巢生殖功能同样具有重要的调节作用.  相似文献   

17.
Effect of quercetin on HeLa cell system of cervical cancer was studied by methods of MTT and Annexin V-FITC/PI. The results show that quercetin has functions of inhibiting breeding of HeLa cells and inducing apoptosis of the cells. The total apoptosis rate is positively proportional to reaction duration and concentration of quercetin used. The maximum apoptosis rate being (88.76±2.35)% was obtained when the concentration was 50.0 μmol/L and the cells were treated with quercetin for 72 hours. Based on establishing a model of tumor of cervical cancer transplanted into nude mice, quercetin of different concentrations was injected into abdominal cavity of nude mice and situation of tumor growth was reviewed. The result showed that with quercetin concent'ration increasing from 0 to 100.0 μmol/L, the transplantation volume and weight of the tumors decreased from (279.59±70.58) mm^3 and (0.145±0.019) g to (128.72±36.12) mm^3 and (0.089± 0.019) g respectively, while apoptosis rate of the transplanted tumor increased from (9.63±1.85)% to (34,98±0.47)%, which proved that quercetin inhibited increment of volume and weight of transplanted tumor in nude mice bodies.  相似文献   

18.
目的观察在鼠疫F1单克隆抗体制备过程中,BALB/c小鼠的选择和饲养与所获腹水量和抗体效价的关系,为大量制备该单克隆抗体提供实验室参考依据。方法根据小鼠周龄、性别和饲养条件对BALB/c小鼠进行分组,并采用动物体内诱生法制备腹水,间接ELISA用来检测腹水中F1单克隆抗体效价。结果12~16周龄组、雄性和加强营养组小鼠所获腹水产量和效价均高于其它周龄组和对照组。结论选择适当周龄的雄性小鼠、饲养过程中加强营养和管理可适当提高腹水产量和抗体的效价。  相似文献   

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