胱抑素C和组织蛋白酶B轴对β淀粉样肽聚集和降解的影响

淀粉样蛋白沉积疾病是由错误折叠的蛋白在细胞内外聚集而引起的一类蛋白质构象类疾病.淀粉样肽β(Amyloid β,Aβ)被认为是引起阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease, AD)的致病蛋白，Aβ是由淀粉样前体蛋白(Amyloid precursor protein, APP)经一系列分泌酶切割而产生的，由于切割方式不同产生多种不同的肽段类型.人胱抑素C(Human cystatin C,HCC)是一种普遍存在于人体体液和组织液中的半胱氨酸蛋白酶抑制剂.HCC可与可溶性的Aβ结合，它与Aβ的原纤维共定位于AD病人的脑部病灶组织，表明它具有一定的神经保护作用.组织蛋白酶B(Cathepsin B,Cat B)是一种半胱氨酸蛋白酶，主要存在于脑内胶质细胞的溶酶体中.Aβ含量的增加可以刺激胶质细胞释放Cat B,对Aβ浓度进行调节，但Cat B在中枢神经系统中的Aβ前体蛋白处理和Aβ42代谢中发挥的作用仍有待确定.本文阐述了HCC-Cat B轴可能在AD进程的不同阶段发挥了不同的作用的观点，以期为AD的预防和治疗提供有价值的信息.     

钙蛋白酶和钙蛋白酶抑制蛋白系统在雄性生殖调控中的研究进展

钙蛋白酶（calpain）是一族钙离子依赖性的、水解半胱氨酸的蛋白酶,钙蛋白酶抑制蛋白（cal-pastatin）是钙蛋白酶的特异性抑制蛋白.钙蛋白酶-钙蛋白酶抑制蛋白系统在多种细胞中发挥作用,本文就国内外对该系统在雄性生殖调控中的作用的研究情况作一概括,为人们进一步了解该系统奠定基础.     

组织蛋白酶L及其酶学特性研究

组织蛋白酶L很难通过常规的肌动球蛋白提取方法完全去除.由琼脂糖凝胶6B凝胶层析图谱显示,组织蛋白酶L的活性主峰明显偏离肌动球蛋白主峰,表明该酶是肌动球蛋白非结合型酶.凝胶柱层析后测定L型组织蛋白酶粗酶液(Lmix)的活性,结果表明Lmix的热稳定性与pH和温度密切相关,其最适pH为5.0,最适温度为45℃.在最适pH5.0时,Lmix的活性随NaCl浓度的增加而增大.专一性底物及酶激活剂、抑制剂影响研究表明,Lmix为内含巯基的半胱氨酸型组织蛋白酶.     

线虫脂肪沉积中组织蛋白酶B的表达及功能研究

文章利用高糖/高胆固醇饮食诱导了线虫,油红O染色结果表明线虫脂肪沉积显著增加。为了研究组织蛋白酶B在诱导线虫过程中的作用,利用实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)研究了组织蛋白酶B同源基因的表达。选取其中的关键基因利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术,研究其在线虫脂肪沉积中的作用。结果表明:在线虫脂肪沉积改变后,组织蛋白酶B同源基因表达随之改变;而利用RNA干扰组织蛋白酶B关键基因cpr-3的表达,线虫的脂肪沉积未受影响。因此,组织蛋白酶B同源基因可能参与线虫脂肪沉积改变后的生理变化,而未直接参与线虫脂肪沉积的调控。     

八肋游仆虫组织蛋白酶B-1的克隆、表达和性质分析

为研究八肋游仆虫中组织蛋白酶B(cathepsin B,CTSB)的生物学功能,选用组织蛋白酶B-1(EoCTSB-1)为研究对象,通过PCR扩增获得EoCTSB-1的基因。利用生物信息学软件分析表明八肋游仆虫CTSB-1基因全长为980bp,不含有内含子,开放阅读框为862bp,编码286个氨基酸。氨基酸序列比对分析显示八肋游仆虫中组织蛋白酶B-1具有保守的催化活性位点,但缺少信号肽和封闭环结构。构建重组表达质粒pET30a-EoCTSB-1,并转入原核细胞中表达,经镍柱亲和层析以及变复性处理后获得较高纯度的EoCTSB-1蛋白,表达产物利用His-Tag的抗体进行western印迹检测,结果显示阳性。利用底物Z-Phe-Arg-AMC测得EoCTSB-1的最适温度为35℃,最适pH是5.0。     

海带多糖中蛋白质去除方法的对比研究

采用4种方法对海带多糖进行了脱蛋白研究,并比较了脱蛋白效果与多糖损失之间的关系.结果表明:这四种方法脱蛋白效果优劣顺序依次为蛋白酶解法、三氯乙酸沉淀法、鞣酸沉淀法和Sevag法.脱蛋白过程中使蛋白质沉淀的机理可能是造成多糖损失的主要原因,蛋白酶解法脱蛋白效果最好且多糖得率最高.     

若干蛇毒蛋白的结构生物学研究

以本研究组较有研究特色的五种蛇毒蛋白家族为线索,简要综述了蛇毒金属蛋白酶、蛇毒丝氨酸蛋白酶、蛇毒crisp蛋白、蛇毒磷脂酶A2及蛇毒神经毒素等蛋白家族有关结构生物学研究的结果、现状及进展.强调了蛇毒蛋白研究中蛇毒糖蛋白的结构生物学研究、超高分辨率晶体学研究及与蛇毒蛋白相关的复合物结构生物学研究的重要性.     

大黄鱼cyclin B1和cdc2 cDNA序列特征及组织表达分析

成熟促进因子(MPF)是诱导细胞从G2期转入M期的关键因子,在配子成熟过程中具有重要作用.MPF由周期蛋白B(cyclin B,CB)和周期蛋白依赖性蛋白激酶(CDK1,由cdc2基因编码)2个亚基组成.本研究克隆了大黄鱼(Larimichthys crocea)cyclin B1(Lc-cb1)和cdc2(Lc-cdc2)基因的cDNA序列,并分析了这2个基因mRNA的组织表达特征,为解析MPF在大黄鱼性腺发育和配子成熟的作用机理奠定基础.Lc-cb1基因全长cDNA 1 882bp,可编码397个氨基酸的蛋白;Lc-cdc2基因全长cDNA序列1 151bp,可编码303个氨基酸的蛋白.基于Lc-cb1 cDNA序列推导的氨基酸序列与6种脊椎动物的CB1氨基酸序列有较高相似性(67%~84%),并具有周期蛋白盒、毁坏盒、以及蛋白酶K位点(RRxSK)等CB预期特征.基于Lc-cdc2的cDNA序列推导的氨基酸序列也与其他6种鱼类的CDK1氨酸酸序列有较高相似性(88%~97%),并具有丝氨酸/苏氨酸激酶催化结构域、ATP结合相关的保守序列(GxGxxGxV)、周期蛋白结合相关的PSTAIRE序列等CDK1的预期特征.可见,本研究克隆获得的2条序列是Lc-cb1和Lc-cdc2 cDNA全长.实时荧光定量PCR结果显示,Lc-cb1和Lc-cdc2的2个基因mRNA表达具有相似的组织特异性,在性腺中mRNA水平均远远高于其他组织,表明Lc-cb1和Lc-cdc2是大黄鱼性腺发育相关的重要基因.     

基质金属蛋白酶与肿瘤关系研究进展

基质金属蛋白酶是一组Zn2+依赖性蛋白水解酶,能降解细胞外基质,金属蛋白酶抑制剂则能抑制其活性,这两组酶在很多瘤组织中表达增高.文章就基质金属蛋白酶及其抑制剂的表达与肿瘤的关系及在淋巴瘤方面的最新研究进展做了综述.     

酶解牦牛乳清蛋白制备ACE抑制肽的工艺研究

目的:乳清蛋白是牦牛乳中的重要成分,其经酶解制备的乳源性ACE抑制肽以安全性高和无副作用等优点在高血压的防治中具有重要的研究和应用价值.本实验研究利用乳清蛋白制备ACE抑制肽的工艺技术.方法:本实验对从耗牛乳中提取的乳清蛋白,分别根据碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶及胃蛋白酶各自的最适pH及温度,采用酶解法制备ACE抑制肽,以ACE抑制活性为指标初步筛选出最佳水解酶,并探究最佳酶水解乳清蛋白制备ACE抑制肽的最佳反应条件.结果:碱性蛋白酶为制备ACE抑制肽的最佳水解酶,英最佳反应条件为:pH8.5、温度60℃、E/S为5.5％、水解6h.制备的ACE抑制肽抑制率可达到85.2％.结论:碱性蛋白酶为最佳酶选,用碱性蛋白酶制备的ACE抑制肽体外抑制率较高,符合工业生产要求.这为进一步优化乳清蛋白降血压肽的制备工艺提供依据.     

一氧化氮在机体中的作用

一氧化氮（NO）广泛参与机体的生理和病理过程,不仅可以舒张血管,而且在体内是一种新型的神经元信使,并与部分疾病的发生有关。本文综述了NO在消化系统和心血管系统中的生理及病理作用,NO介导突触传递可逆性,NO与神经毒性作用以及NO介导兴奋性氨基酸的作用。     

海洛因中毒性脑病的生理特点与DWI表现

目的分析和探讨海洛因中毒性脑病的生理病理特点及DWI表现.方法对6例海洛因中毒性脑病患者行头颅磁共振弥散加权成像(DWI).结果可见双侧小脑、内囊后肢、枕顶叶深部白质、胼胝体、脑干等白质区域异常信号,常规MRI为长T1长T2信号,DWI弥散加权图呈高信号.结论根据海洛因中毒性脑病生理及病理特点行DWI可对本病早期诊断.     

Synchronization and rhythmic processes in physiology

Complex bodily rhythms are ubiquitous in living organisms. These rhythms arise from stochastic, nonlinear biological mechanisms interacting with a fluctuating environment. Disease often leads to alterations from normal to pathological rhythm. Fundamental questions concerning the dynamics of these rhythmic processes abound. For example, what is the origin of physiological rhythms? How do the rhythms interact with each other and the external environment? Can we decode the fluctuations in physiological rhythms to better diagnose human disease? And can we develop better methods to control pathological rhythms? Mathematical and physical techniques combined with physiological and medical studies are addressing these questions and are transforming our understanding of the rhythms of life.     

细胞凋亡的调控机制

细胞凋亡是在某砦生理或病理条件下，生活细胞受到某种刺激信号触发、按照一定程序发生的细胞主动自杀过程．本文着重阐述了细胞凋亡发生的调控机制及其生物学意义．     

Origin and physiological roles of inflammation

Inflammation underlies a wide variety of physiological and pathological processes. Although the pathological aspects of many types of inflammation are well appreciated, their physiological functions are mostly unknown. The classic instigators of inflammation - infection and tissue injury - are at one end of a large range of adverse conditions that induce inflammation, and they trigger the recruitment of leukocytes and plasma proteins to the affected tissue site. Tissue stress or malfunction similarly induces an adaptive response, which is referred to here as para-inflammation. This response relies mainly on tissue-resident macrophages and is intermediate between the basal homeostatic state and a classic inflammatory response. Para-inflammation is probably responsible for the chronic inflammatory conditions that are associated with modern human diseases.     

凝胶化改性壳聚糖膜预防感染性腹膜粘连的对比研究

目的对比研究凝胶化改性壳聚糖膜和透明质酸钠对感染性腹膜粘连的预防作用。方法SD大鼠80只,随机分成四组:假手术对照组(A组),感染对照组(B组),凝胶化改性壳聚糖膜组(C组),透明质酸钠组(D组)。利用大鼠蚓突盲端制造感染性腹膜粘连模型,然后每组分别用相应的方法处理污染面,处理后2、4周打开腹腔,以Bha-tia分级法评定蚓突盲端的粘连程度,并对盲端组织行羟脯胺酸(OHP)水平测定和病理学检查。结果术后2周和4周,C组的粘连程度显著轻于B组(P=0.000),OHP水平显著低于B组(P=0.000);D组的粘连程度、OHP水平和B组无显著性差异(P>0.05)。病理学检查:B组术后2周局部组织以急性化脓性炎症为主,4周时以肉芽组织增生和纤维组织形成的慢性炎症反应为主;C、D组的病理改变类型同B组相同,但C组的上述改变较B组明显减轻,而D组和B组间则无明显差异。结论凝胶化改性壳聚糖膜具有明显的预防感染性腹膜粘连的作用,而透明质酸钠的作用则不明显。     

CD147与恶性肿瘤关系的研究进展

CD147是广泛表达于人体多个组织的跨膜糖蛋白,属于免疫球蛋白超家族。CD147在不同组织中呈现不同水平的表达,此外其在不同种属间的表达亦存在很大差异,有研究表明CD147在多种生理及病理过程起重要作用。经检测CD147在多种恶性肿瘤中均呈现高水平表达,在肿瘤的发生发展中,CD147通过诱导基质金属蛋白（MMPs）的产生,实现对肿瘤生长、浸润及转移的促进作用。     

Excitatory glycine receptors containing the NR3 family of NMDA receptor subunits

The N-methyl-D-aspartate subtype of glutamate receptor (NMDAR) serves critical functions in physiological and pathological processes in the central nervous system, including neuronal development, plasticity and neurodegeneration. Conventional heteromeric NMDARs composed of NR1 and NR2A-D subunits require dual agonists, glutamate and glycine, for activation. They are also highly permeable to Ca2+, and exhibit voltage-dependent inhibition by Mg2+. Coexpression of NR3A with NR1 and NR2 subunits modulates NMDAR activity. Here we report the cloning and characterization of the final member of the NMDAR family, NR3B, which shares high sequence homology with NR3A. From in situ and immunocytochemical analyses, NR3B is expressed predominantly in motor neurons, whereas NR3A is more widely distributed. Remarkably, when co-expressed in Xenopus oocytes, NR3A or NR3B co-assembles with NR1 to form excitatory glycine receptors that are unaffected by glutamate or NMDA, and inhibited by D-serine, a co-activator of conventional NMDARs. Moreover, NR1/NR3A or -3B receptors form relatively Ca2+-impermeable cation channels that are resistant to Mg2+, MK-801, memantine and competitive antagonists. In cerebrocortical neurons containing NR3 family members, glycine triggers a burst of firing, and membrane patches manifest glycine-responsive single channels that are suppressible by D-serine. By itself, glycine is normally thought of as an inhibitory neurotransmitter. In contrast, these NR1/NR3A or -3B 'NMDARs' constitute a type of excitatory glycine receptor.     

玉米抗大斑病菌单基因系的建立及其在Exserohilum turcicum生理小种鉴定中的应用

利用美国A632,B37,B73,B68,C103,Va26等30个Ht单基因鉴别寄主, 按美国伊利诺伊大学的大田接种方案与鉴定方法, 建立了适合中国的监测玉米
大斑病菌生理小种鉴定的21个Ht单基因系. 从吉林省15个地区的不同玉米品种中采集玉米大斑病样本, 采用单孢分离获得了32个玉米大斑病菌菌株, 利用已建立的上述21个Ht单基因鉴别寄主, 通过美国的大田鉴定方案进行生理小种鉴定. 结果表明, 这32个菌株均为0号小种, 并未出现生理小种分化现象.     

一例老年恒河猴消化系统疾病诊断

摘要:本实验室人工饲养的一只老年恒河猴出现以腹泻、排脓样便、消瘦为主要体症的急性疾病。为研究老年恒河 猴消化器官病变的发生情况并进行诊断,本实验采用临床体征结合常规HE 染色对其消化系统进行组织学观察,结 果发现恒河猴的消化系统组织存在不同程度的病变,包括各种炎性细胞浸润,杯状细胞减少及黏液分泌减少,消化 道黏膜的变性、坏死,消化腺的萎缩等,诊断该老龄猴为生理性衰老。