微束激光对单细胞诱变机制研究

本文报道用微束激光对家蚕进行外源染色质的转移获得成功,观察到转移的染色质基因在受体中的当代形态性状表达.并论述短脉冲微束激光照射家蚕受精卵大细胞转移外源基因的同时,引起变异的主要机制.     

激光诱导荧光机理研究

研究荧光强度对激发速率和自发辐射速率的依赖性,导出二级级系统上级级粒子数速率方程,并在一定条件下对其求解。得到激光激发和荧光产生两个阶段中系统上能级粒子数及发射荧光光子数随时间的变化规律。     

激光诱导化学反应

<正> 前言激光具备有单色性好,频率可调,分辨率高,功率大等优良特性。用合适的激光频率选择性地活化反应分子的某一个特定的化学键,诱发化学反应按某一特定的方向进行,合成人们需要的化合物,这是一个引人入胜的新的研究领域,期待人们去开拓。     

激光诱导空化技术研究及应用

空化是一种常见的流体现象,人们试图通过各种方式来缓解甚至避免空化空蚀带来的危害。同时,人们也在研究如何将空化瞬间聚集的高能量转化为有利于工业生产的技术。随着激光技术的日益发展,激光诱导空化成为研究空化现象的重要手段,并广泛应用到众多领域,如微成形领域、材料强化、有机废水处理、生物医学领域等。文章综述了激光诱导空化的作用机理和其各个领域应用的研究进展,希望为激光诱导空化应用范围的进一步拓展和该技术的发展提供参考。     

基因计算机研究充满希望

正如人类基因组计划提醒我们的,遗传化学物质DNA(脱氧核糖核酸)具有令人生畏的信息储存能力———人们体内每一个细胞的细胞核中包含着构成整个人体的编码指令。计算机科学家现在正设法仿效自然,利用DNA建立一种完整的信息技术形式。实验2000年,威斯康星麦迪逊大学的科学家在简化和改进这种技术方面迈出了重要的一步。他们采取了不同于艾德尔曼和其他先驱者所进行的试管实验的办法,把DNA链固定到一块镀金的玻璃载片(一种DNA芯片)上。目前,这一领域还处在早期发展阶段。不论体外或体内,DNA计算的所有潜在用途还只是纯理论的探讨…     

间断基因的检测

叙述了某些不含遗传信息的碱基顺序,介绍了发现和检测间断基因的方法。     

基因拷贝数分析的研究

基因拷贝数分析的研究王瑛（中国科学院动物研究所，北京，１０００８０）陈来同（北京大学生命科学学院，北京，１００８７１）关键词基因拷贝数；单倍体基因组；α１－抗胰蛋白酶基因；大鼠ＲＡＬＲＳ－１重复序列中图分类号Ｑ５７８基因拷贝数（ｃｏｐｙｎｕｍｂｅｒ）...     

用基因芯片研究苦丁茶甙对K562细胞基因表达的影响

以人红白血病K562细胞株为材料,应用基因芯片技术研究苦丁茶甙对人红白血病K562细胞作用前后基因表达的差异,以诱导分化药物羟基脲处理作为正对照,分别提取药物处理前后细胞RNA进行逆转录cDNA,使获得的cDNA分别标记上Cy3和Cy5两种荧光物质;然后与由1632条cDNA片段制作的基因表达谱芯片杂交,经扫描及对获得的数据用相关软件分析,确定K562细胞经苦丁茶甙处理前后差异表达基因48条,有41条与羧基脲处理相同,其中上调表达的基因有32条,下调表达的基因有16条,这将为进一步建立基因芯片技术药物筛选模型奠定基础。     

用于培养动物细胞微载体的制备

合成了两种用于动物细胞培养的微载体:葡聚糖和明胶微载体。报道了合成方法。将产物初步用于Vero细胞培养,得到了满意的结果。细胞在微载体上的附着生长良好,和目前广泛使用的Cytodex 1微载体效果相仿。当DEAE-Sephadex 1.5微载体浓度为2mg/ml时,在1.5L Celligen细胞培养器中培养120小时,细胞浓度可达1.2×10~6细胞/毫升,为接种浓度的5倍,达到了文献中报道的水平。     

美国红鱼细胞色素b基因和控制区基因序列的初步分析

采用PCR技术扩增了美国红鱼线粒体DNA的细胞色素b和控制区基因片段,PCR扩增产物直接测序,分别得到1140bp和623bp的核苷酸序列。将所得序列与从Genbank中查到的美国红鱼序列进行比较,分析了序列中碱基的组成及变异情况,为美国红鱼的合理开发利用及养殖发展规划的制定提供遗传学数据,为保护中国海域生物种质资源多样性提供科学依据。     

流式细胞术优化MDCK细胞基因转染效率的研究

为探究脂质体介导的MDCK细胞基因转染效率,并获得最佳的优化放案,本研究选取不同配比的质粒和脂质体浓度,将p-EGFP-C1质粒转入MDCK细胞.转染后36 h,利用台盼蓝染色法检测细胞活率,流式细胞术检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达情况和转染效率,获得优化的转染条件.结果发现,转染后MDCK细胞,实验组...     

大鼠血管内皮细胞siRNA转染条件的优化

目的:旨在优化siRNA转染大鼠血管内皮细胞的转染条件.方法:将0.75μL和1.5μL的脂质体LipofectamineTM3000分别与20、40、60、80nmol带荧光标记的FAMsiRNA组合,转染6、12、18、24h后,用荧光显微镜计数阳性细胞率、MTT法检测各浓度条件下内皮细胞的存活率,筛选最优转染条件.结果:(1)转染12h后,用荧光显微镜检测20、40、60、80nmol各组,均可观察到绿色荧光(2)siRNA浓度为60nmol/L,脂质体为1.5μL的组合转染效率最高,继续增加siRNA的浓度,转染效率提高不明显.(3)转染时间超过24h,各组细胞荧光减弱,细胞死亡率显著增加.结论:结果表明,以1.5μL LipofectamineTM3000与60nmol/L的siRNA浓度组成转染混合物转染12h可以实现对大鼠血管内皮细胞高效转染并保持较高的细胞活性.     

低温对动物体细胞的损伤影响

低温保存细胞是最常见的长期保存方法,但低温保存是有条件的,降温过快或过慢及其复温速率都直接影响细胞的存活。综述了降温与复温对动物体细胞的损伤。     

纳米谷氨酸壳聚糖制备及其体外质粒转染研究

采用表面修饰方法制备出谷氨酸修饰的壳聚糖纳米基因载体。对样品进行红外分析、粒度分析、zeta电位分析、生物相容性、凝胶阻滞分析、DNA保护性试验、体外细胞转染研究。结果显示所制得的谷氨酸修饰的壳聚糖纳米颗粒平均粒径为170nm,其zeta电位为 4.7mV。红外分析显示谷氨酸已通过酰胺键结合在壳聚糖上。MTT实验结果显示纳米颗粒与细胞有良好的生物相容性。凝胶阻滞分析和DNA保护试验结果表明纳米载体可与DNA通过电性结合作用而结合,并可以有效保护DNA,防止核酸酶对其的降解作用。而体外细胞转染的结果表明,谷氨酸修饰的纳米粒能介导pEGFP-N1质粒转染HepG2细胞并在细胞中表达绿色荧光蛋白。因此,谷氨酸修饰的壳聚糖纳米颗粒可作为一种新型非病毒基因载体介导核酸类生物大分子进入细胞内。     

GUS基因对红豆草部分酶解小细胞团的转化

采用电击法，将大肠杆菌的ＧＵＳ基因（β－葡糖苷酸酶基因为报告基因）导入红豆草部分酶解小细胞团，利用ＧＵＳ基因产物与底物Ｘ－Ｇｌｕｃ反应的组织化学定位试验，检测到ＧＵＳ基因在受体组织中的表达。同时，对部分酶解的程度、不同电压条件下的转化效率以及两种质粒的不同启动子对ＧＵＳ基因表达的强度等进行了讨论。     

人RP2基因在果蝇胚胎细胞中的表达

将质粒pJLA503中的RP2编码cDNA用PCR的方法扩增,并与pIND-3myc质粒上的人c-myc编码序列连接到果蝇转基因载体pUAST上,构建了UAS－RP2－3myc和UAS－RP2(del6)-3myc融合质粒。用脂质体转染的方法,将质粒导入果蝇培养细胞系Schneider line2(S2),并用PCR加以证实,然后通过Western blot检测证明了RP2和RP2 del6的表达。证明了人的RP2基因在果蝇细胞中表达的可能性,说明果蝇系统是可以用来分析人的RP2基因功能的。     

脂质体--基因载体

概述了基因载体的作用、类型和脂质体用于基因载体的发展历史,介绍了一类很有前途的基因载体．阳离子脂质体的组成结构和分类及其转基因的作用原理,讨论了影响阳离子脂质体／DNA复合物物理化学性质的参数及其目标复合物的制备方法．