微波辅助双水相萃取黄芪茎总皂苷及其抗氧化活性

采用微波辅助双水相萃取法研究了黄芪茎总皂苷的萃取工艺条件及其体外抗氧化活性.采用单因素和正交实验对黄芪茎总皂苷的萃取工艺进行优化;通过对超氧阴离子自由基的清除率和还原力对其抗氧化活性进行评价.得到微波辅助双水相萃取黄芪茎总皂苷的最佳工艺条件:料液比(g∶m L)为1∶30,微波功率为500,W,醇水体积比(m L∶m L)为0.77,萃取时间为10,min,硫酸铵质量浓度为0.24,g/m L;双水相萃取工艺对黄芪茎总皂苷的富集倍数为2.39;黄芪茎总皂苷提取液的抗氧化活性随提取液质量浓度的增加而逐渐提高,但其抗氧化活性低于VC.优化后的微波辅助双水相萃取黄芪茎总皂苷的工艺比较稳定,黄芪茎总皂苷提取液具有一定的抗氧化活性.     

长白山狭苞橐吾多糖抗氧化活性研究

目的探讨狭苞橐吾多糖的抗氧化活性,为狭苞橐吾多糖作为天然抗氧化成分研究提供参考.方法通过水提醇沉法提取狭苞橐吾多糖,并利用Sevage法脱蛋白,离子交换层析进行纯化;采用铁氰化钾还原法、邻二氮菲法、邻苯三酚自氧化法测定狭苞橐吾多糖在体外的总还原力及清除羟自由基(·OH)、超氧阴离子自由基(O2-·)的能力;利用果蝇为动物模型,研究狭苞橐吾多糖对果蝇寿命和体内SOD和CAT活性的影响.结果狭苞橐吾多糖在一定浓度范围内,具有还原性,对·OH和O2-·均有清除作用,其清除率呈现剂量依赖关系;与对照组比较,狭苞橐吾多糖高、中、低剂量组果蝇的平均寿命和最高寿命能显著延长,果蝇体内SOD和CAT活力提高.结论狭苞橐吾多糖具有一定的综合抗氧化能力.     

芦荟凝胶对成纤维细胞紫外辐射损伤的保护作用

为了探讨芦荟凝胶对紫外辐射所致皮肤成纤维细胞氧化损伤的保护作用和机制,利用长波紫外线(UVA)辐射体外培养小鼠成纤维细胞株(NIH 3T3),建立紫外线损伤成纤维细胞模型。UVA辐射NIH 3T3细胞后,分别采用CCK-8法以及生化比色法检测不同质量浓度的芦荟凝胶对其增殖及抗氧化酶活性的影响。结果显示,UVA辐射对NIH 3T3细胞造成明显损伤,100、200、400μg·m L~(-1)芦荟凝胶均可以提高受UVA辐射损伤的NIH 3T3细胞的增殖活性,提高细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量,降低脂质过氧化物酶的活性,且呈剂量依赖性。说明UVA对NIH 3T3细胞有损伤作用,100~400μg·m L~(-1)的芦荟凝胶可以拮抗UVA所致的NIH 3T3细胞损伤,具有光保护作用。     

融合蛋白GSH-bFGF的构建、表达及体外活性检测

目的:设计构建和表达新型融合蛋白谷胱甘肽-碱性成纤维细胞生长因子(Glutathione-basic fibroblast growth factor,GSH-b FGF),并检测其体外抗氧化、抗衰老能力.方法:采用RT-PCR,酶切,连接,转化等分子克隆技术构建新型融合蛋白GSH-b FGF,并通过镍柱亲和层析、阳离子交换层析纯化该目的蛋白.通过CCK-8试剂盒检测GSH-b FGF对鼠源成纤维细胞NIH-3T3的促增殖活性.同时,经总抗氧化检测试剂盒检测GSH-b FGF的抗氧化能力.结果:克隆表达并纯化获得融合蛋白GSH-b FGF.CCK-8促增殖结果显示质量浓度为20 ng/m L的GSH-b FGF可显著促进鼠源成纤维细胞NIH-3T3增殖.体外抗氧化结果显示GSH-b FGF有显著的抗氧化活性,纯化得到的GSHb FGF蛋白的GSH浓度约为(0.06±0.02)μmol/L,抗氧化能力为(0.56±0.23)mmol/g.结论:新型融合蛋白GSHb FGF有显著的体外促增殖能力及抗氧化活性.     

真菌多糖的抗氧化活性研究

机体在生命活动的氧化代谢过程中不断产生各种活性氧自由基(ROS),ROS容易损伤机体内的组织,从而引发各种各样的疾病。大量的研究表明,大部分从自然界物质中分离获得的多糖类化合物具有抑制脂质过氧化和清除自由基等抗氧化作用。通过本次实验,研究了黑木耳、香菇多糖的抗氧化活性。结果表明:黑木耳多糖、香菇多糖都具有一定的体外抗氧化能力,其中香菇多糖具有较强的清除羟基自由基(·OH)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH·)的作用;并且黑木耳、香菇多糖也具有一定的体内抗氧化活性,均能不同程度的提高血清和肝脏中超氧化物歧化酶(SOD)活力以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,可以减少肝脏和血清中丙二醛(MDA)含量,增强心脏过氧化物酶(POD)活力以及减少全脑单胺氧化酶(MAO)活力。     

超声波提取轮叶党参多糖工艺优化及抗氧化活性

以轮叶党参为试材,采用单因素试验和响应面法相结合的方法研究轮叶党参多糖提取的最佳条件,评价其体外抗氧化活性.结果表明:在超声功率138 W,超声时间14 min,超声温度35℃条件下,轮叶党参多糖的平均得率为12.48%;轮叶党参多糖CLPS1具有较强的抗氧化能力,对DPPH·,·OH,ABTS+有很好的清除能力,IC50分别为(3.04±0.35)mg/mL、(2.494±0.4)mg/mL和(3.41±0.59)mg/mL.     

不同提取方法对姬菇多糖抗氧化活性的影响

本研究采用传统水提法、超声波提取法、超声波辅助水提法、酸提法、碱提法、超声波辅助酸提法和超声波辅助碱提法7种方法提取姬菇多糖,测定还原力、羟自由基(·OH)清除率、超氧阴离子自由基(O_2~-·)清除能力、DPPH自由基清除力作为体外抗氧化作用的评价指标,并与Vc对照.结果表明酸法提取多糖得率最高,可达6.58%.总体来看,超声波辅助水提法所得姬菇多糖的抗氧化活性最好,多糖浓度为10 mg·m L~(-1)时其还原力达到2.18,·OH清除率为95.56%;多糖浓度为1 mg·m L~(-1)时,O_2~-·的清除率达到62.35%;多糖浓度为2 mg·m L~(-1)时,对DPPH自由基的清除率达到80.32%.超声波辅助碱提法所得多糖的抗氧化活性也较好,而超声波辅助酸提法所得多糖的抗氧化活性最差.由此可见,采用超声波辅助水提法所得多糖有利于姬菇多糖生物活性方面的研究.     

姬松茸多糖酶降解对D-半乳糖诱导3T3细胞氧化损伤的保护作用

目的优化并建立姬松茸多糖(Agaricus blazei polysaccharide,ABP)的酶解工艺,探讨其对D-半乳糖诱导小鼠胚胎成纤维细胞(3T3)衰老的保护作用.方法采用响应面法检测姬松茸多糖最佳酶解工艺;用D-半乳糖诱导氧化损伤;采用噻唑蓝(MTT)法检测各时期细胞活力;测定抗氧化指标.结果姬松茸多糖最佳酶解工艺:加酶量为2.9%,温度为59℃,时间为2.1 h,该酶解方法姬松茸多糖提取率为11.18%.选取培养48 h的3T3细胞进行自由基活性检测,其中模型组与对照组比较细胞存活率降低,差异具有统计学意义(P0.01).给药组与对照组比较细胞存活率增加,在给药终浓度为100μg/mL时,细胞恢复效果最佳,细胞内SOD活力升高(P0.05),CAT活力降低(P0.01),MDA含量显著减少(P0.01),差异具有统计学意义,并且呈现剂量依赖性.结论该方法建立了高效、稳定的姬松茸多糖酶解工艺,获得的姬松茸多糖能够抑制细胞氧化损伤,对D-半乳糖诱导的3T3细胞衰老具有保护作用.     

微波协同双水相提取锦灯笼宿萼总黄酮及其抗氧化活性

采用微波协同双水相法探索锦灯笼宿萼总黄酮的提取工艺条件及其体外抗氧化活性.通过单因素和正交试验对锦灯笼宿萼中总黄酮的提取工艺进行优化;通过对DPPH·和·OH的清除率对其抗氧化活性进行评价.结果表明微波协同双水相提取锦灯笼宿萼总黄酮的最佳工艺条件：正丙醇-水比为0.7、微波提取时间20 min、料液比1∶50,硫酸铵质量浓度为0.35 g/mL,微波功率为400 W;锦灯笼宿萼总黄酮提取液的抗氧化活性随提取液总黄酮质量浓度量的增加而逐渐增强.说明优化的微波协同双水相提取锦灯笼宿萼总黄酮的工艺比较稳定,锦灯笼宿萼总黄酮提取液具有一定的抗氧化活性.     

对硫磷胁迫下锰对中华米虾SOD活性的影响

研究对硫磷胁迫下,饲料中添加适量的锰对中华米虾(Caridina denticulata sinensis)超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响.结果表明,对硫磷对中华米虾的24,48,72和96 h的半致死质量浓度(LC50)分别为15.00,8.20,6.83和4.60 μg/L.中华米虾有锰组和无锰组在不同质量浓度对硫磷(0～4.60 μg/L)的胁迫下,SOD活力受到明显影响,均呈现先升高后降低的趋势,饲料中添加有适量锰(150 μg /g)的实验组米虾SOD的活力要高于对照组米虾SOD的活力.可见,饲料中添加适量的锰可提高中华米虾SOD的活性,有益于提高虾体抗氧化的能力,增强虾体对环境胁迫的耐受力.     

硒化党参多糖的制备及其抗氧化性能研究

以亚硒酸钠和党参多糖为原料合成硒化党参多糖,电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定其中硒的质量分数为25.92 mg·g^-1。利用紫外-可见光谱、红外光谱两种表征手段对其结构进行了表征,证实了硒化党参多糖的合成。采用邻二氮菲-Fe²⁺氧化法和邻苯三酚自氧化法测定硒化党参多糖的抗氧化能力,结果表明,在实验设置的质量浓度范围内,硒化党参多糖的抗氧化能力随着质量浓度的增加而增加,且高于党参多糖。2.0 mg·mL^-1的党参多糖和硒化党参多糖对超氧阴离子自由基的清除率分别为47.05 %和54.46 %,对羟基自由基的清除率分别为50.20 %和61.75 %。为进一步研究硒化党参多糖作为抗氧化能力较强的食品和药品的可能性奠定了基础。     

芪参补气药茶保护线粒体及其机制

以黄芪和党参为原料组方制成芪参补气药茶(ACT),探索ACT对线粒体的保护作用及其机制。分别用AlCl₃比色法和硫酸苯酚法测定ACT的功能因子总黄酮、总糖及总多糖含量。用Ca²⁺诱导肝线粒体通透性转换(MPT),分光光度法测MPT程度;以Fe²⁺/维生素C诱发肝线粒体脂质过氧化,采用硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛(MDA)含量;测定ACT对Fe²⁺螯合能力及还原力的影响。实验测得ACT总糖含量为(26 ± 1.3)mg·mL^-1,总多糖含量为(12.5 ± 0.8)mg·mL^-1,总黄酮含量为(121 ± 8.5)μg·mL^-1。结果表明:ACT可抑制Ca²⁺引起的MPT,可一定程度上抑制线粒体MDA生成,具有较弱的Fe²⁺螯合能力及一定的还原力。能通过温和的抗氧化和清除活性氧作用,一定的还原力及抑制MPT来保护线粒体,从而维持机体氧化与抗氧化平衡,促进机体健康。     

党参多倍体植株二代的形态及细胞学观察

介绍了党参的药效和栽培现状,阐述了多倍体党参植株形态及细胞学研究的意义,对多倍体二代植株的倍性特征、多糖含量进行了测定。     

米炒党参与麸炒党参挥发性成分GC-MS分析

目的比较米炒党参与麸炒党参挥发性成分的差异．方法利用水蒸气蒸馏提取党参挥发油的方法，分别提取党参片、米炒党参、麸炒党参，利用GC-MS联用技术对挥发油成分进行分离鉴定．结果实验结果表明，党参经炮制后化学成分发生了变化．结论通过GC-MS联用技术，对米炒党参与麸炒党参挥发性成分进行了比较，该方法能够为阐释党参炮制原理提供科学依据．     

九种黔产植物多糖的体外免疫调节活性研究

目的:评价9种黔产植物多糖的免疫调节作用。方法制备脾淋巴细胞悬液,分别将样品与LPS或ConA共同作用于脾淋巴细胞,用MTT法测定淋巴细胞的增殖情况。将多糖作用于RAW264.7细胞,用ELISA测定细胞上清中TNF-α含量,判断样品对RAW264.7细胞的活化情况。结果:土党参多糖、薯蓣多糖、竹根假万寿竹多糖对LPS刺激B淋巴细胞增殖有促进作用。楮实多糖对ConA刺激T淋巴细胞的增殖有促进作用。轮叶沙参多糖、绞股蓝多糖、党参多糖、金樱子多糖对T、B淋巴细胞增殖均有促进作用。而绞股蓝多糖、薯蓣多糖、金樱子多糖、楮实多糖、竹根假万寿竹多糖能诱导RAW264.7细胞TNF-α表达上调。结论:九种黔产植物多糖在促淋巴细胞增殖和巨噬细胞活化中表现出明显差异,其中绞股蓝多糖有较好的免疫增强活性。     

银杏叶提取物对大鼠真皮FB增殖及胶原蛋白分泌的影响

原代培养大鼠真皮成纤维细胞（Fibroblast,FB）传代培养后,以不同浓度的银杏叶提取物（EGb761,20、50、100mg／L）对其生长进行干预,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测药物干预后24、48、72h时FB细胞活力变化,碱水解法测定药物干预后3、6d时培养液中羟脯氨酸含量变化,以分别反映EGb761对大鼠真皮FB增殖及胶原蛋白分泌的影响。研究表明EGB761在一定范围内能促进大鼠真皮FB增殖及及胶原蛋白分泌,且呈一定的剂量、时间相关性。     

鸡從多糖的分离及其性质研究

用热水抽提乙醇沉淀的方法从鸡從菌[Termitomyces albuminosus(Berk)Heim]子实体获得了一种灰白色多糖,其总糖含量为77.35% ,蛋白质含量9.14％。生物学研究表明:鸡（土从）多糖[TP]能促进机体免疫功能,增加胸腺、脾脏器官重量,ip 100ug/kg。天剂量,可使正常小白鼠外周血中白细胞总数增加33.69％,使红细胞中SOD酶活性显著升高,体外对脾淋巴细胞的转化也有显著的促进作用。     

药用植物党参传粉效率和结实率的研究

药用植物党参Ｃodonopsis pilosula(Franch.)Nannf.在自然授粉中结实率约为６％,其花柱的授粉率较高的,达７５％,为结实率的１２．５倍,柱头上的平均花粉量为７－１９个,但多数为来自自花的花粉,散粉期花粉活力较高,从不同处理下结实率实验看,党参的有性繁殖主要依靠异花授粉,其自身花授粉的结实率为１．０％,作者认为,在影响结实率的诸多因素中,异花授粉的效率以及植物对异花授粉的依赖程度是重要因素。     

芪参补气药茶清除线粒体活性氧研究

以黄芪和党参为原料,根据中医学原理组方制成芪参补气药茶(ACT),探索ACT清除线粒体活性氧作用及促进健康的机制。分别用AlCl₃比色法和硫酸苯酚法测定ACT的功能因子总黄酮、总糖及总多糖含量。以还原型辅酶Ⅰ/吩嗪硫酸甲酯(NADH/PMS)为超氧阴离子(O₂·^－)生成系统,过氧化氢(H₂O₂)/Fe²⁺体系为羟自由基(·OH)生成系统,分别用氮蓝四唑(NBT)还原法和Fenton反应显色法测定ACT清除O₂·^－及·OH的能力;用Na₂S₂O₃滴定法测定ACT清除H₂O₂的能力。ACT总糖质量分数为(26±1.3) mg·mL^-1,总多糖质量分数为(12.5±0.8) mg·mL^-1,总黄酮质量分数为(121±8.5) μg·mL^-1。ACT可一定程度上清除O₂·^－、·OH和H₂O₂。ACT具有温和的抗氧化作用,从而维持机体氧化与抗氧化平衡,这是ACT促进健康的潜在机制。     

基于白色念珠菌体外抑菌效果的复方苦参洗剂抑菌作用评价

观察复方苦参洗剂中君、臣、佐各药组联合抑菌性质以及协同增效作用。采用加热回流水提法提取各药组获得相应提取液,采用二倍稀释法测得相应各药组单用及联合对白色念珠菌的最低抑菌浓度(ρMIC)，采用联合抑菌指数（IFIC）判定两药组联合抑菌作用性质。结果显示，8味中药水提液的ρMIC范围为7.50 ~30.00 mg/mL,君、臣、佐各药组的 ρMIC范围为4.01 ~21.00 mg/mL，复方组ρMIC为2.22 mg/mL，黄柏+苦参、黄柏+白矾、花椒+白矾的IFIC≤0.5，黄柏+花椒、苦参+花椒、苦参+白矾3组0.5＜IFIC≤1；君药组+臣药组IFIC=0.375 0，君药组+佐药组IFIC=0.750 0，臣药组+佐药组IFIC=1.000 0。复方组及君药组的联合抑菌效果明显强于单味中药的抑菌效果，黄柏、苦参、花椒、白矾4味君药对白色念珠菌抑菌活性较强，复方苦参洗剂抑菌效果的增强与各药组抑菌作用的协同和相加有关。