激素对小麦幼穗组织培养效果的影响研究

分析了激素对两个基因型小麦幼穗组织培养效果的影响,结果表明,愈伤组织诱导率在每个组合中均可达100％,诱导培养基中加入2,4-D对植株再生和绿点分化频率的效果要显著优于Picloram,在所采用的有效2,4D浓度范围内,随着浓度的升高,绿苗的再生频率呈现上升的趋势,2,4-D的量为4.5mg／L时,植株的再生频率平均可以达到45％左右。     

小麦幼穗愈伤组织的诱导及器官形成

小麦是我国以及世界上主要粮食作物之一。以小麦为材料进行组织和细胞培养的工作一直受到人们的重视,研究进展也比较快。虽然国内外均有人以小麦种子、胚、胚乳、根、幼茎、心叶、幼穗、花药等诱导出愈伤组织并培养出再生植株,但一般再生植株的诱导率比较低,如用花药培养,再生植株诱导率为5%左右,用心叶分化出芽频率为7.1%,用幼穗分化出芽频率为8%。我们用小麦幼穗做外植体,愈伤组织诱导率达100%,再生植株的诱导率在73%以上。     

从白羊草成熟胚和幼穗培养诱导再生植株

由生长在北京地区的无融合生殖白羊草的成熟胚和幼穗诱导出愈伤组织，并由愈伤组织分化出植株．来源于成熟胚和幼穗的胚性愈伤组织的植株分化频率分别为４０％和８５％．     

小麦耐盐变异体的筛选——Ⅰ.小麦体细胞胚性无性系的建立

利用春小麦11个品种,通过幼穗和幼胚离体培养,研究了基因型,外植体和培养基成分对愈伤组织诱导率和分化率的影响.结果表明,不同基因型的愈伤组织诱导率和分化率差异明显.幼穗长度以10～14mm 时接种为宜,幼胚以开花后11～14d 接种效果最好.诱导培养基的效果以 MB>MS>N_6>LS,2,4-D 以2mg/L 较为合适,不宜加6BA 和 NAA,但加适量甘氨酸和谷氨酰胺有利于愈伤组织的诱导.分化培养基中加少量6BA 和 NAA 是必要的,而且 ZT 的作用优于 KT.通过以上研究,从中筛选出了3个能长期保持较高再生植株潜力的体细胞胚性无性系.     

小麦Ⅱ型胚性愈伤组织的获得及培养特性研究

从小麦品系“鄂35816”幼穗愈伤组织中得到了Ⅱ型胚性愈伤组织。根据愈伤组织的状态和生长速度提高继代频率，可促使I型向Ⅱ型胚性愈伤组织转变，并保持植株再生潜能；1．0－2．0mg／L，2，4－D、CaC.2H2O3．0mmol/L和KH2PO43．0mmol/L的组合有利于Ⅱ型胚性愈伤组织的生长和植株再生。     

籼稻9311成熟胚再生体系

建立9311水稻高效再生体系，将有利于人们以9311水稻为受体进行遗传改良及籼型水稻基因功能的研究．报道了9311成熟胚高效再生途径．以9311成熟胚为外植体，设计了5类（N6DP，N6DA，MSDP，MSDA和MSDAP）共13种不同愈伤组织诱导培养基，比较了9311成熟胚在不同培养基中愈伤组织的诱导以及初始愈伤组织被继代后的表现．结果显示：9311成熟胚在添加2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）的所有培养基中都能够形成愈伤组织；将最初被诱导的愈伤组织进行继代培养，在前4类培养基上诱导的初始愈伤组织，不论被分别继代于与原培养基成分相同的新鲜培养基上，还是被继代于MSDAP培养基上，继代后的愈伤组织都相继褐化死亡，而将从MSDAP培养基上诱导的初始愈伤组织继代在MSDAP培养基上，愈伤组织很少出现褐化现象，并且能够较快地增殖．由此表明，MSDAP培养基是9311成熟胚合适的愈伤组织诱导培养基和增殖培养基．采用MSDAP培养基培养，9311水稻成熟胚愈伤组织诱导率达87．5％．分化率为46．7％．再生植株的比例为23．3％、     

消毒剂对小麦组织培养的影响

通过对家用洗涤剂和升汞设置不同的处理时间梯度,比较了家用洗涤剂和升汞作为消毒剂对小麦幼胚、幼穗组织培养效果的影响,结果表明,体积分数为10%的白猫洗涤剂消毒处理20min与质量分数为0.1%的升汞消毒处理10min具有等同、高效的灭菌效果和组织培养效果,在单个组合中的抗污染率、愈伤组织胚性率、生根率、植株再生频率和绿点分化频率最高均可达100%,且显著高于所设置的其他各个梯度时间的处理效果;不同外植体的比较结果证实了幼胚的植株再生频率和每团愈伤组织的出苗数都显著高于幼穗.     

普通油茶体胚再生体系研究

为构建农杆菌介导的油茶遗传转化受体系统,选择普通油茶‘长林'4号、53号和166号的幼胚为外植体材料,进行多因素多水平的组织培养试验。结果表明:培养基的pH对愈伤组织诱导率影响不显著,愈伤组织的诱导率受油茶品种影响极显著; ‘长林'53号的幼胚极易实现胚性愈伤组织诱导和完整植株再生,MS培养基是最佳培养基,2,4-D和TDZ为幼胚较敏感的植物激素,对愈伤组织诱导影响最大; 当MS+2 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L TDZ处理时,‘长林'53号体胚诱导率为98%; MS+1 mg/L 2,4-D+2 mg/L KT+500 mg/L CH处理时,‘长林'53号体胚诱导率为89.6%。在不同2,4-D、KT、TDZ和添加物水平的L₉(3⁴)正交试验中,除3个处理外,其他处理组合的‘长林'53号体胚诱导率都达到100%。已分化的胚性愈伤组织在不含任何激素的MS培养基上,可以实现胚状体的萌发、生长及完整植株再生。     

小麦成熟胚愈伤组织诱导及植株再生体系的优化

为了建立和优化小麦成熟胚愈伤组织的诱导和植株再生体系,以京411、Brock、春麦S10鉴-6和春麦津强5号4种小麦的成熟胚为外植体,进行愈伤组织的诱导、分化及再生体系优化的研究.结果表明:(1)京411在各种诱导培养基中的平均出愈率高于其他3个品种;(2)京411在MS1(MS+2.0 mg/L 2,4-D+200 mg/L CH+100 mg/L MI+250 mg/L Glu)培养基中的出愈率最高,因此将该培养基定为京411的最佳诱导培养基;(3)同不切相比,采用纵全切的方式处理京411的成熟胚能够获得较高的出愈率和质量较好的愈伤组织;(4)在分化培养基F7(MS+10 mg/L ZT+0.1 mg/L IAA)中,京411成熟胚的愈伤组织分化率、出苗率和生根率最高,幼苗长势最好,因此该培养基可以用作京411成熟胚愈伤组织的分化培养基.     

小麦耐甘露醇变异细胞系的离体筛选及植株再生Ⅰ

目的 离体筛选小麦耐甘露醇变异细胞系并再生植株。方法 以耐盐系小麦850512r的幼穗和幼胚为外植体诱导胚性愈伤组织。以所得到的胚性愈伤组织为起始材料，采用一步和多步正筛选法离体筛选耐甘露醇变异细胞系。结果 成功获得小麦耐甘露醇变异细胞系，并再生植株。结论 小麦耐甘露醇变异细胞系的离体筛选并再生植株成功，证明在细胞水平上筛选并获得具有潜在耐水分胁迫特性的小麦新品系是完全可能的。     

不同基因型小麦成熟胚盾片组织培养效果研究

不同基因型及其外植体的愈伤组织诱导和植株分化研究是建立高效植株再生和遗传转化系统的基本条件。文章首次以去胚的成熟胚盾片为外植体材料,对10个小麦基因型进行了离体操作。结果显示:愈伤组织诱导率平均可达96.5%,10个基因型的愈伤组织都能分化出绿苗,分化频率最高可达10.5%,没有白苗化现象;根的分化与绿点、绿苗的分化之间具有显著的相关性;鄂恩1号的植株再生能力显著优于其它基因型,其植株再生系统已具备了遗传转化的基本要求。     

小麦幼茎组织培养中的植株再生

我们对小麦不同品种的幼穗幼茎在不同发育期,不同培养基上进行了2年的愈伤组织诱导及分化实验,并将幼茎与幼穗作了比较。二棱末期至小花分化期是幼穗及幼茎诱导愈伤组织的最适时期。不同品种对培养基的反应不一。不同时期的幼茎愈伤组织只有来源于二棱末期者能够在分化培养基上分化,其它时期者则不分化。品种间分化率差异较大。幼穗的一块愈伤组织可以分化多个苗,而幼茎的一块愈伤组织只发生一个苗。植株再生是通过器官发生的途径。     

一种简单方法提高原生质体再生植株频率

发展了一种简单有效的方法,提高从灿稻品种Ｐｕｓａ Ｂａｓｍａｔｉ１建立的超过１年龄悬浮细胞系中游离的原生质体再生植株频率。两步再生法,即先将愈伤组织转入含高浓度琼脂糖（１０ｇ／Ｌ）的再生培养基中培养后再转入含低浓度琼脂糖（４ｇ／Ｌ）的再生培养基中培养,有助于植株再生,两步再生法结合使用含高浓度激动素Ｋｉｎｅｔｉｎ（１０ｍｇ／Ｌ）的再生培养基,显著提高植株再生频率,利用此法,可使来源于超过１年龄的悬     

小麦(Triticum aestiviumL.)成熟胚与其他外植体再生能力的研究

六个品种小麦成熟胚等外植体再生能力的研究表明,不同外植体的再生能力按根尖、幼叶、茎节、幼穗、成熟胚的顺序递增。成熟胚再生能力强,愈伤组织诱导率达90%以上,出苗率可达44%,并且具有材料来源广泛、操作方便、不受季节和发育时期限制等优点,因此是小麦体细胞组织培养的适宜外植休来源。本文对不同外植体再生能力差异产生的原因也进行了分析和讨论。组织学观察表明,本实验所获得的再生植株属于器官发生的类型     

紫花苜蓿高频再生组织培养体系建立

以8个品种的无菌实生苗子叶和下胚轴为外植体,研究了4种不同培养程序及基因型对紫花苜蓿胚性愈伤组织、胚状体诱导及成苗移栽的影响.结果显示:4种培养程序对苜蓿的出愈率影响差别不大,但不同培养程序对苜蓿的分化率和成苗率影响差异显著,其中SHK-MSO-MSO在分化率和出苗率上表现较佳;另外,不同基因型在苜蓿出愈率和成苗率上反应不显著,但在分化率上反应显著,其中中苜一号,草原2号和保定苜蓿表现较佳.     

苜蓿不同品种愈伤组织诱导、分化和再生能力的比较研究

以新疆大叶、甘农1号、甘农3号和陇东4个苜蓿品种的下胚轴、子叶和子叶节为外植体,比较了不同苜蓿品种及外植体愈伤组织诱导、分化及再生能力的差异,研究了不同浓度及配比的植物生长调节物质对愈伤组织诱导和芽分化再生的影响。结果表明,4个苜蓿品种再生能力依次为新疆大叶>甘农3号>甘农1号>陇东苜蓿,下胚轴外植体在愈伤诱导培养基(MS 2mg/L2,4-D 0.2mg/LZT)上出愈率分别为94%,83%,71%和58%,胚性愈伤组织在分化培养基(MS 0.2mg/LZT 50mg/L谷氨酰胺)上分化率分别为15.8%,9.2%,7.1%和4.5%;下胚轴再生能力优于子叶节和子叶;丛生芽在生根培养基(1/2MS)上生成完整的根;各品种的再生苜蓿植株均成功移栽到土壤中,成活率100%。上述4个苜蓿品种分化再生能力的阶段性研究结果为今后通过基因工程方法改良苜蓿奠定了基础。     

花生不同外植体愈伤组织的诱导及植株再生

以成熟花生种子的上、下胚轴和叶片外植体为对象,在离体培养下,考察几种外植体再生能力的差异并对其作出对比分析.结果表明:上述外植体均能诱导出愈伤组织并能够进一步再生出幼苗,但不同外植体的再生能力有所差异,其再生能力大小依次为:上胚轴>叶片>下胚轴,培养基的差异对外植体愈伤组织诱导及再生起决定性作用,不同预培养时间对愈伤诱导及再生也有影响,总的来看是预培养时间短的外植体要好于预培养时间长的外植体.     

狭叶松果菊的组织培养和植株再生

以狭叶松果菊无菌苗叶片为外植体,通过正交试验筛选出最佳的愈伤组织诱导培养基:MS 6-BA0.5-mg/L NAA1.0-mg/L;最佳的丛芽诱导培养基为:MS 6-BA1.0-mg/L NAA0.5-mg/L.再生芽经附加IBA0.5-mg/L的1/2MS培养基生根后移栽成活获得再生植株.