rh—bFGF抑制顺铂诱导的人胃腺癌BGC—823细胞凋亡

目的：评价外源加入的rh-bFGF对抗肿瘤药物顺铂所致人胃腺癌细胞凋亡的影响。方法：利用顺铂诱导人胃腺癌BGC-823细胞产生的凋亡作模型,体外培养时在顺铂作用前或作用后加入不同浓度的rh-bFGF,观察细胞形态的变化和细胞凋亡经率的变化。结果：预培养的rh-bFGF质量浓度为10ng/mL及1ng/mL时抑制细胞凋亡的发生,共培养时则在质量浓度为1ng/mL时产生抑制调亡的作用。结论：外源加入的rh-bFGF在一定的浓度范围内,不信纸预培养还是与顺铂的共培养12h,均可不同程度的抑制顺铂胃腺癌BGC-823细胞的凋亡,并且这种剂量效应与rh-bFGF影响BGC-823细胞的细胞周期相关。     

癌细胞C-myc蛋白对他莫昔芬的应答

目的:观察C-myc蛋白在胃癌细胞系BGC823中的表达情况,探讨胃癌细胞BGC823经他莫昔芬(TAM)处理后,C-myc蛋白表达的变化.方法:使用10 5MTAM处理胃癌BGC823细胞系24 h后,通过免疫荧光细胞化学的方法及细胞计数,检测C-myc蛋白的表达变化,并通过WST1法检测细胞活力的变化.结果:C-myc在胃癌BGC823中高表达,经10 5 M TAM处理24 h后BGC823细胞活力明显下降(P<0.05,)同时C-myc的表达减弱(P<0.05).结论:C-myc在胃癌细胞BGC823中发挥生物学作用且与TAM介导的BGC823细胞活力下降相关.     

胃癌细胞C-myc蛋白对他莫昔芬的应答

目的:观察C-myc蛋白在胃癌细胞系BGC823中的表达情况,探讨胃癌细胞BGC823经他莫昔芬(TAM)处理后,C-myc蛋白表达的变化.方法:使用10 5MTAM处理胃癌BGC823细胞系24 h后,通过免疫荧光细胞化学的方法及细胞计数,检测C-myc蛋白的表达变化,并通过WST1法检测细胞活力的变化.结果:C-myc在胃癌BGC823中高表达,经10 5 M TAM处理24 h后BGC823细胞活力明显下降(P<0.05,)同时C-myc的表达减弱(P<0.05).结论:C-myc在胃癌细胞BGC823中发挥生物学作用且与TAM介导的BGC823细胞活力下降相关.     

中国鲎鲎素对人胃癌BGC—823细胞增殖的抑制作用

应用从中国鲎血细胞中提取的鲎素处理人胃癌BGC－823细胞,研究海洋生物活性物质的抗肿瘤作用。实验结果显示,经2．0μg/ml鲎素处理的BGC－823细胞生长缓慢,倍增时间延长,细胞集落形成能力减弱,细胞生长抑制率达62．67％,细胞分裂指数下降40．91％,处理后细胞碱性磷酸酶细胞化学反应减弱、分布改变、碱性磷酸酶和乳酸脱氢酶活力分别下降40．59％和76．05％。结果表明,鲎素能有效地抑制胃癌细胞的增活动,具有与癌细胞诱导分化物相似的抗肿瘤效果。     

人肝癌细胞移植瘤QGY—9204中细胞凋亡和坏死并存现象的初步分析

关于细胞凋亡和坏死的判别标准及其相互关系已逐渐成为研讨的热点。研究表明，ｐ５３基因的表达导致细胞凋亡，抑制肿瘤形成。在将Ａｄ／ｐ５３导入人肝癌细胞移植瘤ＱＧＹ－９２０４的研究中发现，实验组与对照组的移植瘤中均出现凋亡特征指标（ＤＮＡ梯型条带、凋亡小体等）。而离体增养的肝癌细胞ＱＧＹ－７７０３并未检出细胞凋亡现象。那么，实体瘤的ＤＮＡ梯型条带与凋亡和坏死有何关系？研究表明，瘤体内细胞凋亡和坏死并存，     

单核钌配合物的合成、表征及抗肿瘤活性研究

合成了两个含有硫醚配体的单核钌配合物Ru1和Ru2,通过元素分析、红外光谱、电喷雾质谱和核磁氢谱对其进行了表征,并做了紫外-可见吸收光谱及电化学测试。通过体外细胞毒性实验研究了Ru1和Ru2对宫颈癌细胞(Hela)、胃癌细胞(BGC823)和乳腺癌细胞(MCF-7)三种肿瘤细胞的细胞毒性。结果表明:Ru1的抗肿瘤活性比Ru2强,而Ru1和Ru2均对MCF-7最具有选择性,初步说明Ru1和Ru2有作为抗癌药物的潜力。最后通过荧光染色和流式细胞仪观察Ru1对MCF-7细胞凋亡情况。     

视黄素诱导的癌细胞凋亡及其对癌细胞生长抑制的相关性

以不同的受体选择性视黄素处理乳腺癌细胞，通过荧光显微术、ＴｄＴ测定和细胞生长测定，分析视黄素诱导的癌细胞凋亡及其对癌细胞生长抑制的相互关系；将受体ＲＡＲα基因转染乳腺癌ＭＢ－２３１细胞，发现受体转染与细胞凋亡诱导有关；ＲＡＲ和ＲＸＲ受体选择性视黄素联合使用，对诱导癌细胞凋亡和抑制癌细胞生长具有加强作用．结果证实，视黄素能够诱导乳腺癌细胞的细胞凋亡，并与抑制癌细胞的恶性生长相一致，这可能是视黄素抗癌作用的机制之一．     

TGF-β1对不同肺癌细胞生物学行为的影响

用重组人转化生长因子β1（TGF－β1）处理不同的肺癌细胞95C、95D，研究TGF－β1对不同肺癌细胞迁移、粘附等生物学行为的影响，从而揭示肿瘤细胞的恶性行为机制。按Dean Sheppard方法测定细胞迁移能力；用划痕法和琼脂滴法测定细胞迁移能力；同时还测定了各肺癌细胞的铺展。结果表明：95C的迁移能力、细胞铺展率和增殖率最高，95D次之；用TGF－β1处理后，95C、95D与Fn的粘附率和铺展率较对照组都有显著增加，TGF－β1处理24、48h后可以明显增加两株肺癌细胞的迁移率。TGF－β1处理对两株肺癌细胞的增殖和生长无显著影响。提示不同肺癌细胞迁移和粘附能力存在差异，TGD－β1对肺癌细胞生长学行为存在显著影响。TGF－β1对所介导的信号转导通路起着重要的调控作用，从而影响肺癌细胞的若干生物学行为。     

姜黄素联合光照对BGC -823细胞膜通透性及线粒体膜电位的影响

为了研究在光照和避光条件下姜黄素(CUR)对人胃腺癌BGC - 823细胞膜通透性及线粒体膜电位的影响,探讨CUR抑制BGC - 823细胞生长的机制,在体外培养的BGC - 823细胞加CUR后光照或避光处理24h,利用激光共聚焦显微镜(LSCM)检测线粒体膜电位变化,利用流式细胞仪(FCM)检测细胞膜通透性改变.结...     

中药苏木抑制胃癌活性组分鉴定及抑制效果研究

为了筛选中药苏木中抑制胃癌的活性成分,并探讨其对胃癌细胞BGC-823及荷BGC-823胃癌裸鼠的抑制作用,采用不同提取方法制备10种苏木提取物样品,用高效液相色谱法分别测定其组分含量;用MTT法检测其对BGC-823细胞的增殖抑制效果,通过分析各提取物主要组分的含量变化与其对BGC-823细胞抑制率的相关性筛选其抗癌...     

幽门螺杆菌cag7-n基因克隆表达及其重组蛋白对BGC-823细胞生物学的影响

目的研究克隆幽门螺杆菌（Helicobacter pylori）cag7-n基因对BGC-823细胞增殖和IL-8分泌的影响.方法采用PCR技术从H.pylori基因组DNA中扩增cag7-n基因片段,构建重组质粒pET-28a-cag7-n,转化大肠杆菌BL21,经Western blot鉴定,纯化的蛋白作用于BGC-823细胞,用MTT法检测蛋白对细胞增殖的影响.结果成功克隆cag7-n基因,经镍柱纯化后可获得纯度为98%的重组蛋白.纯化蛋白浓度在100,150,200μg/mL时,培养时间延长,细胞的增殖受到抑制;在相同的培养时间,细胞的增殖程度随蛋白浓度的增加而降低.结论成功克隆了cag7-n基因,并在大肠杆菌BL21中表达,经过镍柱纯化后得到纯度较高的蛋白,纯化透析后的蛋白与BGC-823细胞共培养,可诱导细胞因子IL-8在mRNA水平上的表达及其对BGC-823细胞增殖的影响.     

蛋白激酶C活性下降对Ha-ras基因表达及其调控序列结合蛋白的影响

愈益增多的研究表明,蛋白激酶C(PKC)在细胞增殖和转化调控中占有重要位置,一些癌基因产物影响细胞增殖和转化与肌醇脂代谢信号通路,特别是与PKC活性密切有关;ras癌基因就是其中之一。在ras抗性细胞株内只有当PKC活性超过某一阈值时,ras基因产物才能表现出其转化细胞的能力,并且这种转化能力需要PKC的激活;Hsiao等发现稳定表达PKC的细胞系更易被活化的Ha-ras基因转化。上述实验表明PKC和ras癌基因在转化细胞的过程中表现出最佳的协同效应。但ras基因和PKC之间精确的作用机制至     

钙调素拮抗剂TFP对BGC-823细胞增殖的影响及其分子机制的探讨

为了进一步探讨钙调素拮抗剂TFP对人胃癌细胞增殖的影响及其分子机制，利用MTT法及流式细胞光度术检测了TFP对细胞增殖的影响，进一步利用western blot的方法对细胞中p16^INK4a和cyclinD的表达水平进行了检测。结果表明：TFP处理可以明显提高BGC－823细胞中p16^INK4a的表达水平，而cyclinD1的水平则明显下降，提示TFP可能通过影响p16^INK4a的表达水平抑制细胞的增殖。     

紫龙金对BGC-823细胞增殖的抑制作用及对p16~(INK4a)启动子活性的影响

利用记数法和Brdu脉冲标记法研究了紫龙金对细胞增殖的影响,western blot检测结果表明:紫龙金(3,4mg.mL-1)处理可明显抑制人胃癌BGC-823细胞的生长、提高BGC-823细胞中p16的表达水平.进一步利用含有p16INK4a启动子片段(-967~-165区域)及荧光素酶报告系统的载体pGL3-Basic-p16N研究了紫龙金对p16INK4a启动子活性的影响及其作用的分子机制,结果表明,紫龙金可能通过提高p16INK4a启动子活性而促进p16的表达,从而抑制细胞的增殖.     

BGC-823细胞中慢病毒途径针对HIF-1α基因的RNAi实验

目的：构建人HIF-1α基因的shRNA慢病毒载体、包装生产重组慢病毒颗粒,病毒途径高效感染胃癌细胞株BGC-823,并验证基因沉默效率。方法：在NCBI数据查找人HIF-1α基因序列,然后使用siRNA在线设计软件,设计针对基因CDS区的3条siRNA序列及Negative序列。根据设计好的siRNA序列设计双链互补的shRNA-Oligo DNA,退火形成双链后与线性化载体链接,构建shRNA重组表达载体。经由293TN细胞包装shRNA重组慢病毒颗粒,随后使用重组病毒感染BGC-823,通过荧光标记蛋白GFP确定感染效率后收集细胞样本,分别采用Real-time PCR和Western blot方法检测靶基因在mRNA和蛋白质水平的沉默效率。结果：shRNA重组表达载体测序结果与设计序列完全一致,包装病毒后滴度达到1×104 ifu/μL。慢病毒感染BGC-823细胞取得了极高的基因转导效率。mRNA检测结果显示,siRNA3对于对与目的基因的沉默效果最好,较阴性对照序列组相比较,mRNA的表达量下降了92%,Western blot检测的结果与mRNA检测结果完全相符合。结论：通过慢病毒途径,可以在BGC-823细胞中高效的进行HIF-1α基因的沉默。     

过表达maspin对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响

通过构建maspin表达质粒,在人乳腺癌MCF-7细胞中过表达maspin,研究maspin对MCF-7细胞增殖率及凋亡率的影响.MTT检测实验表明,过表达maspin能够剂量依赖性抑制MCF-7细胞的增殖率.采用TUNEL法和流式细胞术检测maspin对MCF-7细胞凋亡的影响,结果表明过表达maspin可促进MCF-7细胞凋亡进而抑制其增殖.     

OA对人肝细胞HL-7702和肝癌细胞Bel-7402增殖的影响和对细胞凋亡的诱导作用研究

 以人肝细胞HL-7702和肝癌细胞Bel-7402为研究对象,通过MTT法、细胞外部形态观察、Annexin V.FITC&;PI双染法及TUNEL法等方法,研究了腹泻性贝毒的主要组分大田软海绵酸（Okadaic acid, OA）对其增殖的影响及对细胞凋亡的诱导作用。结果表明：OA对人两株细胞的增殖均有显著的抑制作用,24 h IC₅₀分别为65 ng/mL和60 ng/mL,且这种抑制作用呈剂量依赖性。OA导致两株细胞的形态均发生明显变化：细胞变圆,脱壁,细胞膜形成泡状突起,最终形成膜包裹的凋亡小体。Annexin V.FITC和PI双染法及TUNEL法检测均发现：OA能够诱导两株细胞发生不同程度的凋亡,且凋亡细胞的比例与OA的浓度相关。以上结果表明：OA能够通过抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡而对人肝细胞和肝癌细胞造成影响,且这种影响的程度与OA的浓度和作用时间密切相关。     

乳苣水提取物诱导肺癌细胞H1299和A549的凋亡

为探讨乳苣水提取物对体外培养的肺癌细胞H1299和A549的影响,用不同浓度的乳苣水提取物分别作用于H1299和A549细胞,从细胞形态(显微镜观察)、细胞增殖活力(cck8法)、细胞凋亡(AnexinⅤ-FITC/PI染色)、线粒体膜电位(JC-1染色)几个方面检测乳苣水提取物对H1299和A549细胞的影响.当处理浓度达到1.2 mg/mL,作用细胞48 h后,细胞出现明显皱缩的凋亡形态学特征,与对照组相比处理组细胞增殖活力显著下降(P0.05).进一步用流式细胞仪检测发现浓度达到1.2 mg/mL的处理组细胞凋亡率显著提高,同时检测到细胞的膜电位都明显下降,呈剂量依赖关系.这些结果表明乳苣可以通过诱导H1299和A549细胞凋亡从而抑制其生长和增殖,是一种潜在的预防和抑制肿瘤生长的药食两用植物.     

暹罗鳄胆汁提取物对人胆管癌MZ-ChA-1细胞的抑制作用

以暹罗鳄(Crocodylus siamensis)胆汁为材料,应用细胞培养、细胞计数、Hoechst33258染色、流式细胞仪等技术研究暹罗鳄胆汁提取物对人胆管癌MZ-ChA-1细胞凋亡的诱导作用.实验结果显示,胆汁提取物可明显诱导人胆管癌MZ-ChA-1细胞的凋亡,经1.75 mg/mL暹罗鳄胆汁提取物诱导处理24 h后,人胆管癌MZ-ChA-1细胞的增殖活动受到显著的抑制,细胞生长抑制率达86.71%;光镜观察结果显示,暹罗鳄胆汁提取物处理细胞后,细胞体积缩小,细胞核固缩;细胞核经Hoechst33258染色出现浓染致密的固缩形态和颗粒状荧光;细胞周期检测出现G0/G1期细胞比例升高,S和G2/M期细胞比例下降.研究结果表明,暹罗鳄胆汁提取物对人胆管癌MZ-ChA-1细胞凋亡的诱导具有显著作用,从而为进一步研究细胞凋亡机制提供重要基础和研究依据.