慢性肾衰血浆中红细胞生成抑制蛋白的分离纯化

本文采用慢性肾功能衰竭（ＣＲＰ）病人血浆为材料，通过硫酸铵分步沉淀，ＤＥＡＥＤＥ－５２纤维素离子交换层析、ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－１００凝胶层析及高效液相凝胶层析（ＨＰＬＣ），从中分离出一种蛋白质．经体外红系集落（ＣＷ－Ｅ）实验证明对ＣＦＵ－Ｅ有明显的抑制作用．该蛋白的分子量为５７０００，等电点（ＰＩ）为４．２，我们称这种蛋白为红细胞生长抑制蛋白（Ｅｔｙｔｈｒｏｒｏｉｅｓｉｓｉｎｈｉｔｏｒｒａｃｔｉｖｔｙｐｒｏｔｉｎ）．     

沙田柚花柱S-糖蛋白的分离及鉴定

采用层析和电泳相结合的技术,分离和鉴定沙田机花柱中与自交不亲和相关的蛋白质,结果表明：自交沙田柚花柱蛋白质提取液的３５％（ＮＨ４）２ＳＯ４盐析级分,经Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－５０层析,可得２个峰,其中峰Ⅰ具有抑制自交花粉管生物的活性,峰Ⅰ含２种蛋白质,且均为糖蛋白,蛋白质Ａ相对分子质量为３２．１０ｋｕ,等电点为ｐＨ７．２;蛋白质Ｂ相对分子质量为２５．１２ｋｕ,等电点为ｐＨ６．４．峰Ⅰ还具有核酸酶活性     

一种具有刺激红系细胞集落生成的螺旋藻（Spirulina…

从螺旋藻体中通过ＤＥＡＥ纤维素层析，硫酸铵分部沉淀和葡聚糖Ｇ７５凝胶过滤得到一种具有离体情况下刺激红系细胞集落生成的功能蛋白质。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测分子量为１５０００道尔顿，等电点为４．８，含有藻蓝胆素。该蛋白命名为螺旋藻１５０００蛋白（Ｓｐｉｒｕｌｉａ ｐｌａｔｅｎｓｉｓ１５０００，ＳＰ－１５０００）。     

短裙竹荪菌丝体糖蛋白DdGP-3P3纯化及性质研究

短裙竹荪菌丝体经热水抽提，乙醇分级沉淀，级分3经DEAE－Cellulose柱层析纯化得到短裙竹荪菌丝体糖蛋白DdGP-3P3。经测定该糖蛋白为均一组分，相对分子质量为113KDa，红外光谱呈现出典型的多糖吸收峰，含有β－型糖苷连接键。β－消去反应测定，该糖蛋白中糖和蛋白质的连续键为O－型糖肽键。纸层析和气相层析分析得知DdGP-3P3含有D－葡萄糖（D－glucose)、D-甘露糖（D－Mannose)和D－半乳糖（D－galactose)，其摩尔比为2．01：1．00：1．23。氨基酸分析表明它含有16种氨基酸。     

离子交换层析和凝胶过滤分离纯化抗凝血多肽

以DEAE－C52离子交换层析和SephadexG50凝胶过滤成功地从盐源出蛭（Haemendipsa yanyuanensis)头部分离纯化了抗凝血多肽，获得了蛋白质质量浓度为1.17mg.mL^-1，抗凝血酶比活性为152.78U.mg^-1的抗凝血多肽，证明了DEAE－C52离子交换层析和SephadexG50凝胶过滤是分离盐源山蛭抗凝血多肽的有效方法。     

罂粟花粉中一种寡糖成分的研究

从罂粟花粉中提取纯化得到一种寡糖成分，经纸层析，气相色谱，快原子轰击质谱，核磁共振和甲基化分析证明该寡糖为（１→３，１→６）－ａ－Ｄ－葡萄四糖。     

蛋白质分离纯化与层析技术进展

蛋白质分离纯化是蛋白质产品工业化生产的关键之一。文中分析了蛋白质分离纯化的特点，指出了分离纯化蛋白质应解决的一些问题。层析技术是一种有效的蛋白质纯化方法，文中从层析方法、层析固定相、层析过程的数学模拟三方面评述了层析技术的新进展     

天门冬糖蛋白AG-b的研究

ＡＧ＿ｂ为４０％丙酮沉淀的天门冬糖蛋白级份,它的β－消去反应产物在２４３ｎｍ有紫外吸收峰,表明其糖和蛋白质连接键为０－型糖肽键。凝胶层析测定ＡＧ－ｂ中多糖部分ＰＡ－Ｉ分子量为２．１９×１０６。１３ＣＮＭＲ波谱显示,ＰＡ－Ｉ具有α１→２、α１→４和α１→６三种糖苷键,不含有糖醛酸组份。ＩＲ光谱显示,ＡＧ－ｂ在１２５０ｃｍ－１和１７３０ｃｍ－１处有吸收峰,说明其含乙酰基团。     

蛋白质组学研究中磷酸化蛋白质(肽)富集策略及展望

蛋白质磷酸化是细胞信号转导途径中重要的调控过程,但磷酸化蛋白质(肽)丰度低、化学计量低、易降解等限制了磷酸化蛋白质(肽)的研究.磷酸化蛋白质(肽)的制备是蛋白质磷酸化研究成功的关键步骤.笔者综述了磷酸化蛋白质(肽)的一些富集策略:基于抗体技术、亲和性标签磷酸化蛋白质富集策略,基于固相金属亲和层析、金属氧化亲和层析、IMAC连续洗脱、离子交换层析、亲水相互作用层析的磷酸化肽富集策略,熟练掌握及综合应用这些磷酸化蛋白质(肽)的富集策略,对于研究细胞信号转导途径中的调控因子具有重要作用.     

黑卵蜂寄主识别利它素的性质研究

通过盐析，柱层析和分子筛层析，从松毛虫雌蛾附腺中分离到一种ＳＰ－Ｉ组份，经生化方法检测鉴定，此组份是一种糖蛋白，分子量为１．３５×１０＾－５，等电点为４．２，蛋白质含量９２％，糖含量８％。它能引衣松毛虫黑卵蜂和松茸毒蛾黑卵蜂在非天然寄主上的产卵检查，刺探行为，是一种黑卵蜂寄主识别利它素。     

昆虫细胞杆状病毒表达人生长激素的纯化及性质研究

在昆虫细胞杆状病毒中表达的人生长激素，经CM－52离子交换柱层析和Phenyl-Sepharose CL-4B疏水柱层析后，去除了93％杂蛋白。再用CNBr-activated Sepharose 4B亲和柱层析的方法，获得高纯度的生长激素样品。SDS－PAGE结果表明，纯化样品在SDS－PAGE图谱呈现一条带，分子量为22kD。Western杂交结果表明，纯化样品与生长激素标准品有相似的免疫活性。胰肽图谱分析结果显示纯化样品和标准品具有相同的一级结构。DNS－CL测N末端表明，纯化样品的N末端为苯丙氨酸，所有这些性质均与天然人生长激素相同。     

用柱层析技术纯化孕血清中的早孕因子（EPF）

采用ＤＥＡＥ，Ｓ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦ·Ｆ离子交换层析，ＣｏｎＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ，ＨｅｐａｒｉｎＳｅｇｈａｒｏｓｅ亲和层析，从１１０例妊娠３～８周早孕妇女混合静脉血清中提取，纯化早孕因子（ＥＰＦ）。以玖瑰花结抑制试验（Ｅａ－ＲＩＴ）检测孕血清及各阶段提取物的ＥＰＦ活性，盘状聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其纯度．结果表明提取，纯化的ＥＰＦ达电泳纯，在国内尚未见报导。     

猪脾血红素加氧酶的纯化和某些性质研究

通过DEAE——纤维素层析.羟基磷灰石层析及Sepharose CL-6B层析,从猪脾中获得了纯的血红素加氧酶。纯化的酶在聚丙烯酰胺凝胶电泳及SDS-聚丙烯酰胺电泳中均呈现现单一条带。测得该酶分子量约为30500道尔顿,含272个氨基酸残基。氨基酸组成分析表明该酶中谷氨酸、谷氨酰胺含量丰富,而半胱氨酸和色氨酸含量低。在280nm处具有较低的消光系数(E1%1cm=8.12),而在406nm处具有强烈的光吸收。Triton×-100和EDTA对酶有稳定作用。     

苏铁蕨多糖的提取及其组分分析

采用低温-微波工艺提取苏铁蕨[Brainia insignis（Hook．）J．Sm．]的木质根状茎部分,以95％乙醇、水为溶剂分步提取,获苏铁蕨粗多糖,经纯化为精制多糖．以凝胶过滤色谱法（GFC）测定苏铁蕨多糖的数量及分子量．结果：苏铁蕨中含1种多糖,其数均分子量为31514g·mol^-1,重均分子量为35034g·mol^-1;多糖经酸解成单糖并衍生为乙酰化糖肟,对照乙酰化的标样采用气相色谱法（GC）测定其中含5种单糖组分,其相对含量：葡萄糖88．816％;半乳糖4．631％;阿拉伯糖3．314％;木糖2．085％;甘露糖1．154％．     

人工栽培南方红豆杉紫杉醇的含量分析

采用高效液相色谱法对人工栽培南方红豆杉枝、叶、皮、种子中紫杉醇的含量进行测定,并与文献报道的东北红豆杉、南方红豆杉、云南红豆杉的紫杉醇含量比较．结果表明,人工栽培南方红豆杉种子、枝条、叶和皮中的紫杉醇含量分别是0．01256％,0．00193％,0．00102％和0．01483％,它们均有开发利用价值,研究为合理开发利用人工栽培南方红豆杉枝提供了依据．     

绿色木霉NUST~(996)发酵产纤维素酶的提纯和性质分析

该文研究了绿色木霉发酵产纤维素酶的情况。对NUST996的纤维素酶酶活力和发酵参数进行了测定 ,通过葡聚糖SephadexG - 2 0 0柱层析对纤维素酶进行了分离提纯 ,表明其主要含 2种组分。通过红外、紫外光谱等手段进一步分析其组成 ,对其中CMC(羧甲基纤维素酶 )组分对热及 pH的稳定性进行了分析 ,并测定了其米氏常数。     

新型低膦系列水质稳定剂--膦酸基羟乙酸的研究

以二烷基亚磷酸酯与乙醛酸为原料,经一步反应得到膦酸基羟乙酸(HPA),产率为70%. 采用红外光谱、31P-NMR及液相色谱分析证实了合成产物的分子结构. 此合成路线克服了欧洲专利报道的剧毒、苛刻的反应条件和复杂的工艺路线等缺点. 对HPA的耐蚀性进行了探讨,得到了理想的结果.     

大豆胰蛋白酶抑制剂的制备与性质测定

用DEAE-纤维素柱层析分级洗脱,从大豆中分离出三种胰蛋白酶抑制剂。以BAEE作底物,测得三种组份对胰蛋白酶的抑制程度为16.6％、25.0％和100％。三种抑制剂的分子量分别为20000、21000和12000,等电点是pH3.4、pH2.7和pH4.5。     

中华眼镜蛇毒神经生长因子的研究

采用ＣＭ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＣＬ－６Ｂ和ＳｅｐｈｏｓｉｌＣ８以及ＨＰＬＣ层析方法，自广西产中华眼镜蛇毒中分离纯化神经生长因子（ＮＧＦ），此ＮＧＦ经８ｄ鸡胚背根神经节体外培养证明具有促进神经纤维生长的活性。经ＨＰＬＣ及聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定为单一组成，经ＳＤＳＰＡＧＥ及ＨＰＬＣ测定分子量分别为２４．１ＫＤ和２４．９ＫＤ，等电聚焦电泳测得ｐＩ为８．２，氨基酸组分分析表明ＮＧＦ含酸性氨基酸较少，通过１２５｜标记ＮＧＦ测定出ＮＧＦ在生物体内主要分布于肾、肺、及周围神经     

涠洲岛珊瑚礁海洋真菌的分离鉴定及其抗MRSA活性筛选

本研究从广西涠洲岛礁栖珊瑚、海绵和海藻等样品中挖掘海洋真菌资源，旨在筛选发现潜在的具有抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）活性的菌株。研究首先采用稀释分离法从采集的珊瑚、海绵和海藻等样品中分离纯化出真菌，基于内转录间隔区（ITS）序列和系统发育树分析对菌种进行鉴定；然后采用大米培养基对分离得到的单一菌株进行小量发酵，利用乙酸乙酯提取浓缩获得提取物；最后采用薄层色谱（TLC）、高效液相色谱（HPLC-DAD）等方法分析菌株提取物中代谢产物的丰富度，并采用滤纸片琼脂扩散法对菌株粗提物进行抗MRSA活性初步筛选。结果从样品中分离获得40株海洋真菌，以曲霉属（Aspergillus）和木霉属（Trichoderma）为主，其中A.terreus MF01、A.flavus MF07、T.asperellum HP01、Fusarium equiseti HP08和A.unguis HP17等菌株具有丰富的代谢产物及抗MRSA活性。本研究发现的菌株MF01、MF07、HP01、HP08和HP17具有潜在的抗MRSA活性，为后续开展活性代谢产物研究提供基础资料。