实验用斑马鱼主要疾病及其实验动物标准化研究过程面临的主要问题

斑马鱼是目前国际上用于实验研究最广的鱼类,但是鱼类实验动物尚未实现实验动物的标准化,甚至还没有国家或地方统一的技术标准。本研究收集、分析整理了实验用斑马鱼的主要疾病以及培育饲养实验用斑马鱼所面临的生物净化问题的资料及数据,为我国鱼类实验动物标准的制订和标准化鱼种群的建立及其质量控制与评价提供技术依据。     

斑马鱼分枝杆菌病的研究概况

斑马鱼作为一种常用的实验模式生物,在生物学和医学的许多研究领域得到了广泛应用。然而,国内外对于其病害的研究极少。分枝杆菌病是实验斑马鱼的常见病,危害最大,约占其总病例数的20%。斑马鱼对分枝杆菌具有天然的敏感性,因此该菌对实验斑马鱼构成了巨大的威胁,影响了许多重要的科学实验。本文从病原的种类,生物学特性,疾病的症状,诊断方法和病原检测技术以及控制等方面对斑马鱼的分支杆菌病进行了介绍,希望能引起人们足够的重视,并能积极的展开相关研究。     

稀有鮈鲫--一种新的鱼类实验动物

鱼类作为低等脊椎动物的代表和水生态系统的代表 ,具有繁育力强、体外受精、体外发育、胚体透明等特点 ,过去一直是胚胎学、遗传学、水毒理学、行为科学、环境科学等领域常用的材料。自从Streisinger关于斑马鱼人工雌核发育及纯系建立的文章在Nature上发表后 ,以斑马鱼、青为代表的鱼类很快成为了实验动物的“新宠” ,并在发育遗传学、环境科学领域的研究中扮演了越来越重要的角色。我国从 2 0世纪 90年代开始先后进行了稀有鲫、剑尾鱼、红鲫等鱼类的实验动物化研究 ,并于 2 0 0 1年成立了中国实验动物学会水生实验动物专业委员会。稀…     

原位杂交技术在两栖类基因定位中的应用

原位杂交技术在哺乳类及鱼类基因定位研究中有应用。作者在此基础上进行改进,报告了使用染色体原位杂交技术进行两栖类基因定位的方法。本文还对该方法的意义、应用前景及存在问题进行了讨论。     

基于甲状腺激素受体的环境内分泌干扰物研究进展

甲状腺激素(thyroid hormone,TH)通过甲状腺激素受体(thyroid hormone receptor,TR)介导发挥调节功能,TR为激素依赖性转录因子,作为TH应答元件调节靶基因的转录。在对TR结构与功能阐述的基础上,通过分析多种类型的EDCs干扰哺乳类、两栖类和鱼类等动物TR的研究结果,支持将TR作为检测EDCs效应的生物指标;同时介绍和分析了目前采用的TR蛋白和mRNA检测技术。未来研究可在EDCs干扰甲状腺系统功能的分子机制方面做深入探讨。     

重铬酸钾对斑马鱼的急性毒性及组织过氧化氢酶活性的影响

为研究Cr6+单一毒性对斑马鱼的毒性安全评价,选择重铬酸钾进行急性毒性试验,观察斑马鱼在染毒3~96h的症状,以半数致死浓度(LC50)判断重铬酸钾对斑马鱼的毒性作用。结果表明,24h、48h、72h、96h的LC50分别为426.5795mg/L、141.2538mg/L、138.0384mg/L、128.8250mg/L,经鱼类急性毒性分级表判断重铬酸钾为低等毒。同时研究了不同浓度Cr6+对斑马鱼组织过氧化氢酶(CAT)活性的影响,发现鱼肝和肌肉中的CAT活性随着浓度的增加呈抛物线。     

铁布自然保护区的鱼类、两栖类和爬行类

1986年至1999年对铁布自然保护区的鱼类、两栖类和爬行类调查结果显示,该保护区有鱼类3科7属10种,两栖类有4科6属6种,爬行类有3科4属4种.对它们的区系组成和生态分布进行了讨论.     

铁布自然保护区的鱼类、两栖类和爬行类

1986年至1999年对铁布自然保护区的鱼类、两栖类和爬行类调查结果显示,该保护区有鱼类3科7属10种,两栖类有4科6属6种,爬行类有3科4属4种．对它们的区系组成和生态分布进行了讨论．     

基于DESI-MSI技术和斑马鱼模式动物研究异甜菊醇类化合物的血脑屏障通透性

目的:本研究利用解析电喷雾电离质谱成像(DESI-MSI)技术和斑马鱼模式动物分析异甜菊醇类化合物的血脑屏障通透性,并分析其对神经细胞的抗缺氧保护作用.方法:以异甜菊醇钠(STVNa)及其衍生物(K-9)为目标小分子化合物,以斑马鱼为实验动物,通过浸泡给药,冷冻切片,利用DESI-MSI技术分析目标化合物在斑马鱼体内的组织分布,研究化合物的入脑情况;用OGD/R细胞模型检测其抗缺氧神经细胞保护活性.结果:质谱成像结果显示STVNa及K-9的离子信号在斑马鱼体内分布不同,前者整体分布较为均匀,后者更集中于眼部、脑部、腹鳍、尾鳍等特定器官或部位.细胞活性结果显示K-9具备不逊于STVNa的抗缺氧再灌注的神经细胞保护活性.结论:利用DESI-MSI技术和斑马鱼模式动物研究异甜菊醇类化合物的血脑屏障通透性,可为中枢神经药物研发初筛提供方法参考.     

维生素D受体免疫组织荧光染色方法建立

建立维生素D受体(Vitamin D Receptor,VDR)特异性免疫荧光染色方法,对人十二指肠组织中VDR进行测定。采用石蜡包埋的方法对组织进行永久性固定、并制作组织石蜡切片,利用苏木精-伊红(Hematoxylin&Eosin,H&E)方法鉴定组织形态结构的完整性,利用免疫荧光(Immunofluorescence,IF)染色方法对组织中VDR进行免疫荧光染色,确定抗体使用最佳浓度范围并优化实验条件。结果表明:人十二指肠VDR在绒毛上皮细胞的胞质中高表达,一抗D-6的最佳稀释比率为1∶100,二抗A594的最佳稀释比率为1∶250,抗原最佳复性条件为0.01 mol/L p H 6.0柠檬酸缓冲液中850 W功率微波煮沸20 min。按照此方法制作的石蜡切片组织形态结构完整,VDR染色特异性高,重复性好。