近交系NJS小鼠的生物学特性研究Ⅰ．繁殖性能与生长发育的观察

对作者培育的近交系ＮＪＳ小鼠的繁殖性能与生长发育进行观察，结果表明：ＮＪＳ小鼠的基代虽来源于ＫＭ远交群，但由于高度近交和定向选择，其产仔、泌乳等繁殖性能已大大下降。有关繁殖性能指标为：配产间隔２５．９±４．５／ｄ、胎间隔４７．１±１１．４／ｄ、窝产仔数７．６±２．６／只、离乳仔数６．２±２．３／只、离乳率８０．５±２５．２／％、初生个体重１．５５±０．１２／ｇ、泌乳力４４．６７±１７．１２／ｇ、离乳个体重１０．３５±０．９５／ｇ。３０、６０、９０日龄雄鼠个体重分别为：１７．０±２．１／ｇ、２７．８±１．７／ｇ、３１．８±２．１／ｇ，雌鼠分别为：１５．８±０．９／ｇ、２３．５±１．４／ｇ、２５．５±１．６／ｇ。与其他近交系相比较，ＮＪＳ小鼠的繁殖性能与Ｃ＿（５７）ＢＬ／６近似，比ＢＡＬＢ／ｃ、ＤＢＡ／２显著高（Ｐ＜０．０１）。离乳前后ＮＪＳ小鼠的生长速度与ＢＡＬＢ／ｃ近似，比Ｃ（５７）ＢＬ／６、ＤＢＡ／２显著快（Ｐ＜０．０１）。     

自然杀伤（NK）细胞在免疫缺陷小鼠体内的研究进展

为了研究自然杀伤细胞对正常人及人类恶性淋巴造血细胞的排斥作用，将严重的联合免疫缺陷突变小鼠或ｂｅｉｇｅ小鼠分别与Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠杂交。Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ－ｓｃｉｄ小鼠显示成熟的Ｔ、Ｂ细胞严重丢失并伴随ＮＫ１．１细胞的百分比增加。虽然２月龄内的小鼠血清免疫球蛋白含量甚微，但７．５月龄的小鼠均可检出免疫球蛋白。Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ－ｓｃｉｄ／ｓｃｉｄ小鼠与Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ＋／＋对照组小鼠比较，溶血性补体     

小鼠左右生殖器官生育机能的差异

本实验观察了怀孕１０天以上的封闭群ＫＭ母鼠，近交系Ｃ＿（５７）ＢＬ／６ｊ母鼠，近交系ＢＡＬＢ／ｃ母鼠，杂交（ＤＢＡ／２×ＬＣＥＢ）Ｆ＿１母鼠和杂交（Ｃ＿（５７）ＢＬ／６ｊ×ＬＣＥＢ）Ｆ＿１母鼠的卵巢上黄体数和子宫内的胚胎数。在五组实验中观察结果（见表１，２）。在近交系方面，Ｃ＿（５７）ＢＬ／６ｊ实验组出现左右两边生殖器官的生育机能差异显著（Ｐ＜０．０１），在其他实验组中，左右两边生殖器官的生育机能差异不显著（Ｐ＞０．０５）。由于它们的遗传背景不同，在各自的繁殖基因控制下，可以出现这些遗传多态现象。     

野生小鼠体外受精技术实验初探

应用实验小鼠体外受精技术对Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠和Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ与ＤＢＡ／２杂交的Ｆ１代ＤＢＦ１小鼠进行了体外受精实验研究,就体外受精相关指标与国际常规工作做了比较;同时将这些技术应用于实验动物化中的ＴＷ（Ｔｉａｎｊｉｎ Ｗｉｌｄ）野生小鼠,就小鼠精子质量、野生小鼠体外受精情况及体外受精机理做了初步探讨。     

抗小鼠雄性特异性抗原（H—Y抗原）单克隆抗体的研究

将经Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ雄鼠脾细胞免疫的同系雌鼠脾细胞与Ｂａｌｂ／ｃ小鼠骨髓瘤ＳＰ２／０细胞进行融合,以雌、雄鼠脾细胞作细胞性ＥＬＩＳＡ、间接免疫荧光和精细胞间接免疫荧光技术进行筛选,共建立了５株稳定分泌抗Ｈ－Ｙ抗原的单克隆抗体杂交瘤细胞株。该杂交瘤细胞可在Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ与Ｂａｌｂ／ｃ杂交子一代雌性小鼠腹腔生长并形成腹水性抗体。鉴定结果证明这些抗体具有较好的特异性。     

AMS／5近交系小鼠的临床生理生化正常值的测定

ＡＭＳ／５近交系是我院由封闭群ＬＡＣＡ小鼠经过近亲交配而育成的新品系。经过遗传品质检测达到了基因的纯合，符合近交系标准。现已广泛的应用于我院的生物医学研究。本文报导了２０多项该品系小鼠的生理生化指标，结果表明：生理指标多数雌雄间存在差异，并且与文献报导的其它品系结果不同。生化指标只有ＬＤＨ－Ｌ、ＣＫ、Ｇｌｕ、ＧＯＴ雌雄间存在差异，与文献报导相比Ｇｌｕ、ＧＯＴ、ＧＰＴ高。并且ＬＤＨ－Ｌ、ＧＯＴ、ＧＰ     

两种杂交群（BALB／c♂×不同♀系）与BALB／c小鼠繁殖性能及单抗腹水产量的比较

对两种杂交群（ＢＡＬＢ／ｃ♂×ＫＭ，ＢＡＬＢ／ｃ♂×ＬＡＣＡ♀）的繁殖能力及制备单抗腹水的产量同ＢＡＬＢ／ｃ近交系进行比较。实验表明，两杂交群的各项繁殖指标均优于ＢＡＬＢ／ｃ，总离乳鼠数分别为ＢＡＬＢ／ｃ的１．９８、２．０７倍，接种人肺炎支原体Ｆ８瘤细胞，ｋＣＦ１（ＢＡＬＢ／ｃ×ＫＭＦ１小鼠）的腹水产量为ＢＡＬＢ／ｃ的２．５倍，效价相同；制备六种单抗腹水ＬＣＦ１（ＢＡＬＢ／ｃ×ＬＡＣＡＦ１）的产量均优于ＢＡＬＢ／ｃ，分别为ＢＡＬＢ／ｃ的１．１７～２．８８倍，除Ｅ１０抗体滴度低外，其它各抗体效价相同或接近于ＢＡＬＢ／Ｃ。     

重度联合免疫缺陷（SCID）小鼠的繁育及其应用研究初报

应用带过滤罩的透明鼠笼在层流架内繁育先天性Ｔ和Ｂ淋巴细胞免疫缺陷的重度联合疫缺陷（ｓｅｖｅｒｅＣｏｍｂｉｎｅｄＩｍｍｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ，ＳＣＩＤ）小鼠获得成功。１９９３年５月自中国医学科学院实验动物研究所引进了３对ｓｃｉｄ小鼠种鼠以来，现已近交繁育至第十代共繁育ｓｃｉｄ小鼠７Ｚ０只，其寿命均超过１２个月。平均产仔数为５．５只，不育率为１４．９％，离乳率为８８．２％。ｓｃｉｄ小鼠４－１０周龄的体重与ＢＡＬＢ／ｃ小鼠相比无明显差异，微生物学检测符合ＳＰＦ级小鼠标准。解剖发现其胸腺极小，胸腺的相对重量仅为同龄ＢＡＬＢ／ｃ小鼠的６％左右；脾脏相对重量为２７－３７％；外周血淋巴细胞仅占白细胞总数的１１－２６％。应用酶联免疫酶标法测定３－４周龄和大于１０周龄的ｓｃｉｄ小鼠血清ＩｇＧ的含量均小于１×１０￣（－３）ｍｇ／ｍｌ，没有发现ｓｃｉｄ小鼠的“渗漏”现象。人癌移植于ｓｃｉｄ小鼠后获得３种人癌移植瘤：肺腺癌（ＬＡＸ－８３）、肝细胞肝癌（ＬＣ－４１２）、结肠粘液腺癌（ｃｏｌｏｎ），其平均瘤重均显著大于ＢＡＬＢ／ｃ裸小鼠。     

CXA—1重组近交系小鼠生物学特性研究

对培育成功的ＣＸＡ－１重组近交系小鼠进行部分生物学特性观察（１）皮肤移植：（２）毛色基因测试；（３）血液学常规值，结果表明，同系异体植皮观察１００天以上，未见排斥现象，毛色基因测试，Ａ、Ｂ位点均为纯合，基因型为ａａｂｂｃｃＤＤ，血液学常规和血清蛋白质均在正常范围内，本观察所得结果可为ＣＸＡ－１重组近交系小鼠在科学实验中应用提供资料。     

近交系BALB／c小鼠繁殖与保种方法的建立和应用

在保种繁殖过程中，采用修饰平行线系统保种法对近交系ＢＡＬＢ／ｃ小鼠进行严格兄妹交配繁殖，保持完整的谱系记录，控制饲养环境条件，成功地建立了ＢＡＬＢ／ｃ小鼠基础群及血缘扩大群，广泛提供科学研究试验应用。     

H-2基因检测方法在北京市实验动物遗传质量抽检中的应用

目的为贯彻实施新国标,通过检测小鼠H-2单倍型,确认近交系小鼠免疫遗传质量。方法依据新国标GB/T14927.2-2008中的微量细胞毒检测方法,检测北京地区主要生产厂家的BALB/c和C57BL/6小鼠共70只的H-2单倍型。结果共抽检4个单位的BALB/c和C57BL/6近交系小鼠70只,经检测BALB/c为H-2Dd和H-2Kd,C57BL/6为H-2Db和H-2Kb,符合率100%,质量符合要求。结论经抽检,北京地区主要生产厂家2个品系小鼠免疫遗传质量合格。     

BALB/c和昆明（KM）小鼠脓毒症盲肠结扎穿孔模型的比较

目的比较应用BALB/c和昆明（KM）小鼠建立脓毒症盲肠结扎穿孔（Cecal Ligation and Puncture,CLP）模型的区别。方法 BALB/c和KM小鼠各30只,分别建立假手术组和CLP模型组,术后6 h进行血常规、生化检测、病理切片检查,术后72 h比较两种品系小鼠盲肠结扎模型的生存率。结果术后72 h两品系小鼠假手术组存活率均为100%,CLP组BALB/c小鼠存活率为40%,KM小鼠存活率为60%,BALB/c小鼠72 h生存能力低于KM小鼠（P〈0.05）。与各自品系的假手术组相比,BALB/c小鼠和KM小鼠在术后6 h白细胞上升,血小板下降,谷丙转氨酶、谷草转氨酶升高（p〈0.05）,肺损伤明显,而红细胞、尿素氮和肌酐无明显差异。结论 BALB/c小鼠较KM小鼠对脓毒症盲肠结扎模型的敏感度更高。     

清洁级小鼠感染嗜肺巴氏杆菌情况的初步调查

从１５只患结膜炎、肺炎的小鼠中分离出嗜肺巴氏杆菌１２株。随后对其群体中１０个品系８５只小鼠进行普查,结果感染率最高为ＣＢＡ及ＡＭＭＳ／１３小鼠,达２５％,ＡＢＬＢ／ｃ及ＡＭＭＳ／１也有检出,应引起生产者足够的重视。     

近交系小鼠微卫星DNA引物的筛选和Tm值优化研究

目的通过对近交系小鼠微卫星引物的筛选和Tm值优化研究,以探索小鼠DNA多态性检测方法。方法随机选用32对位于小鼠不同染色体的微卫星引物,用PCR扩增方法对常用C57BL/6、C3H、BALB/c、DBA/2、129、FVB及SCID近交系小鼠DNA多态性进行扩增和电泳分析,并对其中25对引物的Tm值进行优化。结果 25对引物可稳定扩增,2对引物在不同品系小鼠间表现为单态性,23对引物在不同品系间呈多态性,10对引物呈显著多态性(3～4个态性)。结论所筛选和优化的25对微卫星引物,对不同品系小鼠DNA可稳定扩增,其电泳结果具有较高的DNA多态性,可反映不同品系小鼠的遗传概貌。     

BALB/c与C57BL/6小鼠互为供受体心脏移植急性排斥模型的对比

目的建立并比较BALB/c与C57BL/6小鼠互为供受体心脏移植急性排斥模型。方法采用BALB/c与C57BL/6小鼠互为供受体建立心脏移植模型,术后评估免疫排斥情况、并发症、观察移植心脏存活时间并做病理检查。结果手术成功率为94.7%。A组(BALB/c→C57BL/6)与B组(C57BL/6→BALB/c)的生存时间无统计学差异。两组均可见典型急性排斥病理改变,两组间无明显统计学差异。两组移植心脏的心功能情况无明显差异。结论近交系BALB/c和C57BL/6基因小鼠遗传稳定,可以建立稳定的急性排斥反应模型。C57BL/6适合作为受体,移植时间明显缩短,造模成功率较高。     

四氯化碳诱导近交系C57BL/6小鼠建立肝纤维化模型

目的 比较不同剂量四氯化碳诱导近交系C57BL/6小鼠肝纤维化模型的效果,以建立稳定的肝纤维化模型。方法 选择5周龄的C57BL/6近交系小鼠,分别腹腔注射给予高、中、低剂量的四氯化碳诱导肝纤维化,实验结束后取血及肝脏组织,检测血浆丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)的水平及肝脏病理变化。结果 近交系C57BL/6小鼠药物诱导后,各剂量组动物均能存活到8周,高剂量组存活率仅为20%远低于中、低组;血清转氨酶含量升高程度、肝组织病理改变存在剂量时间效应关系。病理分析表明,各剂量组均可见肝细胞变性/坏死、中央静脉周围/汇管区混合细胞浸润及肝脏纤维化。结论 10%四氯化碳给药8周后能诱导近交系C57BL/6小鼠形成较稳定的肝纤维小鼠模型,为后续肝纤维化机制研究及药物筛选工作奠定了基础。     

近交系小鼠8个遗传生化标记杂合位点的研究

目的为了更加准确有效地监测近交系小鼠的遗传质量,对近交系小鼠的8个遗传生化标记杂合位点进行 研究。方法将近交系小鼠CBA／Ca与BALB／c交配得到杂交Fl代动物CCBFI,同时将近交系小鼠CBA／Ca与 C57BL／6交配得到杂交Fl代动物B6CBFI,对CCBFI和BbCBFI进行遗传生化标记检测。结果找到近交系小鼠 8个遗传生化标记的杂合位点。结论近交系小鼠的8个遗传生化标记位点相对应的等位基因均为共显性。杂合 位点的图谱可以作为监测近交系小鼠质量的判定标准。     

小鼠白细胞减少症模型的建立

目的 为小鼠白细胞减少症模型的建立提供基础资料。方法 选用ICR小鼠和C57BL/6J小鼠以5Gy的剂量60Co-γ射线一次性全身照射小鼠,测定小鼠外周血白细胞总数。结果 在本实验条件下,ICR小鼠的正常白细胞数量极显著低于C57BL/6J小鼠;雄性C57BL/6J在照射后第3 d白细胞数量显著高于其雌性小鼠。结论 小鼠的品系、性别对60Co-γ射线照射建立的白细胞减少症模型具有一定的影响。     

C57BL/6J胚胎冷冻小鼠的遗传监测和分析研究

目的用生化标记和微卫星检测法观察近交系C57BL/6J小鼠胚胎冷冻后的遗传质量是否发生改变。方法采用国标(GB/T 14927.1-2008)生化标记基因检测法对4只玻璃化冷冻、解冻移植后获得的C57BL/6J F1代小鼠的13个生化位点进行预检测,再根据微卫星DNA多态性的遗传监测方法进行多态性分析。结果4只玻璃化冷冻后移植获得的C57BL/6 F1代小鼠的遗传概貌与国标(GB/T 14927.1-2008)中的14个生化位点完全一致;并与本文作者已建立"几种常用近交系小鼠微卫星DNA多态性的分析研究"的遗传监测结果完全相符。结论玻璃化冷冻法(EFS40,straw)对C57BL/6J冷冻胚胎小鼠的遗传物质并未造成影响,其遗传特性保持稳定,是可行的小鼠胚胎冷冻方法。     

遗传工程小鼠冻存卵巢异体原位移植比较研究

目的 对 C57BL / 6 J 为背景的遗传工程小鼠卵巢冷冻及复苏后原位移植进行研究,建立遗传工程小鼠卵巢 冷冻方法,弥补小鼠资源保种体系。 方法 采用 DAP213 方法冷冻保存了 C57BL / 6 J 及 SCARB2、PSGL1、IGB3S 三 个遗传工程小鼠 10 日龄幼鼠的卵巢,将四个品系 10 日龄幼鼠的新鲜卵巢及冻存复苏卵巢原位移植到 4 周龄 C57BL / 6 J 及 C57BL / 6 J( Cg) —Tyrc- 2 J / J( B6 albino)受体雌鼠,术后饲养 5 周与 10 周龄性成熟 C57BL / 6 J 雄鼠交 配,观察移植出生幼仔。 结果 C57BL / 6 J 新鲜卵巢和冻存卵巢,三个品系遗传工程小鼠的冻存卵巢原位移植到 C57BL / 6 J 和 B6 albino 受体中,均可以恢复正常功能,交配后得到仔鼠。 结论 采用 DAP213 方法冻存 C57BL / 6 J 及以 C57BL / 6 J 为背景的遗传工程小鼠卵巢,复苏后原位移植到 C57BL / 6 J 和 B6 albino,交配后产仔,卵巢冻存方 式是小鼠资源库保存的一个重要补充。