中药复方板蓝根颗粒抗柯萨奇B_4病毒作用的实验研究

采用中药复方板蓝根颗粒进行了体外抗柯萨奇病毒B4(CVB4)的研究,通过观察病毒引起的细胞病变效应(CPE)、MTT法检测细胞活性,作为考核药物抗病毒作用.结果表明:中药复方板蓝根颗粒对CVB4无直接灭活作用,但能抑制CVB4在Hep-2细胞内的的生物合成和阻止CVB4的吸附,其半数抑制浓度(IC50)分别为1129.00和1130.44μg/mL,治疗指数(TI)均为2.78.在100～1600μg/mL范围内复方板蓝根颗粒与CVB4抑制率呈明显的量效关系(P<0.01),在1600μg/mL时能抑制CVB4在Hep-2细胞内的增殖>50%.研究表明中药复方板蓝根颗粒能有效地抑制CVB4在Hep-2细胞中的增殖,其抗病毒作用发生在阻断病毒吸附细胞和抑制病毒进入细胞之后的复制增殖.     

中药大黄抗柯萨奇病毒作用的实验研究

采用大黄1～4#有效提取部位进行了体外抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的研究.通过观察病毒引起的细胞病变效应(CPE)、MTT法检测细胞活性,作为考核药物抗病毒作用.结果表明:大黄1～4#有效提取部位对CVB3无直接灭活作用,也不能阻止CVB3的吸附,而能抑制CVB3在Hep-2细胞内的的生物合成,其半数抑制浓度(IC50)分别为34.7、33.0、33.9、34.3 mg/L,治疗指数(TI)分别为7.2、7.6、7.6、7.2.与病毒唑(IC50=30.6 mg/L,TI=6.6,P＞0.01)相当,优于大黄提取液(IC50=48.5 mg/L,TI=4.7,P＜0.01).在2.5～120 mg/L范围内1～4#部位与CVB3抑制率呈明显的量效关系(P＜0.01),120 mg/L时能完全抑制CVB3在Hep-2细胞内的增殖.所以大黄1～4#有效提取部位安全高效地抑制CVB3在Hep-2细胞中的增殖.     

大黄素体外抗柯萨奇病毒B_4的实验研究

为研究大黄素的体外抗柯萨奇病毒B4(CVB4)作用,以病毒唑为阳性对照药,用MTT法从药物抑制病毒增殖、直接杀灭和抗吸附3种方式评价了大黄素抗CVB4效果,并用实时定量PCR检测了大黄素对CVB4基因mRNA表达的影响,用空斑法测定了大黄素对病毒感染细胞不同时间空斑形成率的影响.结果表明:大黄素不能直接杀灭病毒或阻断病毒吸附细胞,但能显著抑制病毒在细胞内的生物合成,其IC50=(14.10±0.74)μM,TI=(4.35±0.60),能显著降低细胞内CVB4基因mRNA表达(p0.05),其抑制作用发生在病毒进入细胞0~4 h.故大黄素主要通过抑制CVB4穿入细胞后复制环节发挥抗病毒作用,并具有时间依赖性和剂量依赖性.     

基于网络药理学探讨连花清瘟胶囊防治新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的作用机制

目的基于网络药理学方法研究连花清瘟胶囊活性成分防治新型冠状病毒肺炎的作用机制。方法通过文献挖掘确定连花清瘟胶囊活性成分,依托TCMSP、SwissTargetPrediction数据库检索活性成分靶点,利用Cytoscape3.6.1软件绘制连花清瘟胶囊活性成分-靶点网络;运用GeneCards数据库查询新型冠状病毒肺炎靶点,将其与连花清瘟胶囊活性成分靶点相互映射,筛选出共同靶点。应用STRING平台构建靶蛋白相互作用网络并提取关键靶点,对关键靶点进行GO(Gene Ontology)基因功能和通路分析。结果连花清瘟胶囊24个活性成分作用于33个新型冠状病毒肺炎靶点,其中NOS2与血管紧张素转化酶II(ACE2)共表达;TNF、TP53、IL6、CASP3、IL2、MAPK14、RELA共7个关键靶基因参与免疫系统过程、多细胞生物过程、解毒过程、刺激反应、抗氧化活性等生物过程及功能,调控百日咳、南美锥虫病、乙型肝炎、肺结核、甲型流感、EB病毒感染、单纯疱疹病毒感染、PI3K-Akt、TNF、MAPK、T细胞受体等信号通路。结论连花清瘟胶囊对SARS-CoV-2入侵人体受体ACE2具有一定的阻断作用,同时发挥抑制机体炎症风暴、调节机体免疫的作用。     

中药大青叶有效单体抗流感病毒作用

采用中药大青叶有效单体进行体外抗流感病毒(H1N1)的研究,通过观察病毒引起的细胞病变效应(CPE)、 MTT法检测细胞活性,红细胞凝集实验检测病毒血凝滴度,考核药物的抗病毒作用.结果表明:大青叶有效单体1#, 2#, 3#, 4#对流感病毒无直接灭活作用,也不能阻止流感病毒的吸附,而能抑制流感病毒在MDCK细胞内的的生物合成.其半数抑制浓度(IC50)分别为30.80, 29.74, 27.56, 25.85 mg/L,治疗指数(TI) 分别为6.33, 9.30, 10.77, 15.05. 其抗流感病毒效果优于病毒唑(IC50=101.05 mg/L, TI =5.25),和抗病毒口服液(IC50=104.41 mg/L, TI=5.03), P<0.01.在160 mg/L时能抑制流感病毒在MDCK细胞内的增殖达90 %左右.在40～160 mg/L内大青叶1#, 2#, 3#, 4#单体能明显降低流感病毒血凝滴度(P<0.05).大青叶有效单体1#, 2#, 3#, 4#能安全高效地抑制流感病毒在MDCK细胞中的增殖.     

人工合成绿蝇防御素及其活性研究

采用人工合成的方法研究绿蝇防御索（phormicin A）对细胞及肿瘤作用效果，实验结果发现，人工合成的绿蝇防御素可以在较低浓度下抑制革兰氏阳性菌的生长（MIC＝5－75μg/mL），其中以金黄色葡萄球菌的反应最为敏感，MIC为5μg/mL，而且当人工合成的绿蝇防御素浓度升至300μg/mL时可以抑制大肠杆菌的生长，但无法抑制绿脓杆菌的生长，此外，它还能抑制MDA435乳腺癌细胞及TSU前列腺癌细胞的体外增殖，抑制率分别为22．21％（P＜0．05）和35．53％（P＜0．01）。     

黄芩提取物及含药血清体外抑制呼吸道合胞病毒作用的实验研究

研究了黄芩提取物及其含药血清体外抑制呼吸道合胞病毒（RSV）的作用。通过细胞培养,采用观察细胞病变（CPE）和活细胞染色计数法（MTT）,观察清热抗感冲剂及其含药血清在Hep-2细胞中抑制RSV的作用。结果表明：黄芩提取物及其含药血清具有不同程度抑制RSV病毒复制作用,其半数中毒浓度（TC50）分别为3924mg/L、1/4.35稀释度;半数有效浓度（IC50）为165mg/L、1/54稀释度;治疗指数分别为23.78、10.83。这表明黄芩提取物及其含药血清具有抑制RSV在Hep-2细胞内复制的作用。     

中药大青叶有效单体抗柯萨奇病毒作用

采用中药大青叶有效单体进行体外抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的研究,通过观察病毒引起的细胞病变效应(CPE)、MTT法检测细胞活性,作为考核药物抗病毒作用.结果表明:大青叶有效单体1     

合欢花水提物对大鼠脑胶质瘤C6细胞株的增殖抑制与凋亡诱导作用

采用MTT法检测合欢花水提物对C6细胞增殖活力的影响,流式细胞术检测该水提物对C6细胞的诱导凋亡作用.结果表明:合欢花水提物能抑制C6细胞的增殖,且具有剂量和时间依赖性,其在24 h、48 h、72 h时对C6细胞的半数抑制率(LD50)分别为:305 μg/mL、50 μg/mL、15 μg/mL.流式细胞术结果显示:200 tμg/mL、300μg/mL合欢花水提物均可诱导C6细胞发生早期凋亡,与对照组细胞相比,早期凋亡率分别由对照组的0.7％增加到了4.3％、14.3％.提示合欢花水提物抑制C6细胞增殖机理与诱导细胞凋亡途径有关.     

甘草酸单铵及与无环鸟苷合用体外抗I型单纯疱疹病毒活性

本文采用中性红染料摄入法并结合倒置显微镜下观察。在细胞培养系统中（ＲＫ１３细胞）研究了甘草酸单铵（ＭＡＧ）抗Ｉ型单纯疱疹病毒活性、可能作用环节及与无环鸟苷（ＡＣＶ）合用抗病毒作用。实验结果表明，ＭＡＧ可直接灭活病毒（ＥＤ５０为１ｍｇ／ｍＬ），尤其可抑制细胞内病毒的增殖。另外，４ｍｇ／ｍＬ ＭＡＧ可完全抑制各剂量ＨＳＶ－Ｉ．ＭＡＧ与ＡＣＶ合用表明了相加抗病毒作用。     

金线莲多糖对α-葡萄糖苷酶活性及糖尿病小鼠血糖的影响

研究了金线莲多糖体外抑制α-葡萄糖苷酶活性及其对四氧嘧啶诱导糖尿病小鼠血糖的影响.结果表明:金线莲多糖体外能抑制α-葡萄糖苷酶的活性,半抑制浓度值(IC50)为78.66μg/mL;对小鼠餐后血糖表现出较好的控制作用,血糖抑制率为(53.65±13.65)%;连续给予糖尿病小鼠金线莲多糖(300mg/kgbw)14d后,小鼠血糖值较模型组显著降低(P0.05).实验结果表明金线莲多糖具有显著的降血糖功效,其作用机制与影响糖代谢酶的活性,抑制糖异生有关.     

毛脉酸模体外抗菌及抗病毒作用的实验研究

研究毛脉酸模体外抗菌抗病毒的活性.采用二倍稀释法,体外测试毛脉酸模不同提取方法下对常见几种细菌的最低抑制浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)采用CPE法进行体外抗病毒(流感甲型病毒HA)实验,按Reed-Muench法计算各提取部位的药物半数有毒质量浓度(TC50)、半数抑制浓度(IC50)和选择指数(SI).毛脉酸模水煎液和70%乙醇冷浸液均显示有明显的体外抑菌和杀菌活性.毛脉酸模水提物和75%乙醇提取物对流感甲型病毒的抑制较强,半数抑制量质量浓度分别为(IC50)6.2 mg/mL和0.4 mg/mL,治疗指数(TI)分别为16和16.毛脉酸模醇提液是抗菌抗病毒活性较高的活性部位,值得进一步开发利用.     

玉竹中高异黄酮类化合物生物活性研究

采用四唑盐(MTT)比色法、白细胞弹性蛋白酶抑制剂筛选模型及二氢乳清酸脱氢酶抑制剂筛选模型对从玉竹中分离出的4个高异黄酮类化合物进行生物活性评价,探讨化合物结构与其活性之间的构效关系.高异黄酮类化合物1～4对肿瘤细胞K562,A549和HCT-15具有细胞毒性,IC50为7～35μg/mL;化合物1～4对人白细胞弹性蛋白酶有抑制作用,IC50分别为13.1,70.4,13.8,55.2μg/mL;化合物2,4对二氢乳清酸脱氢酶有一定的抑制作用,IC50分别为10.0,11.1μg/mL.高异黄酮类化合物的生物活性与其取代基的类型及位置有关.     

苦丁茶对MCF-7人乳腺癌细胞的体外抗癌效果

对市售的苦丁茶进行MCF-7人乳腺癌细胞体外抗癌效果和体内抗转移效果评价.通过MTT实验、DAPI荧光染色分析和RT-PCR分析说明其体外抗癌效果.200μg/mL苦丁茶(81%抑制率)水提物表现出对MCF-7人乳腺癌细胞较强的生长抑制效果.200μg/mL比100和50μg/mL苦丁茶水提物具有更强的细胞诱导凋亡效果,Bax,caspase-3和caspase-9的mRNA表达得到增强,Bcl-2表达减弱.苦丁茶水提物处理后炎症相关因子NF-κB,iNOS和COX-2表达减弱,展示了苦丁茶的抗炎特性.由此得出,一定质量浓度的苦丁茶具有良好的抗癌预防效果.     

EVn-50抑制人宫颈癌Hela细胞增殖及诱导凋亡的研究

目的探讨EVn-50对体外培养的人宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养人宫颈癌Hela细胞,台盼蓝拒染法检测EVn-50对人宫颈癌Hela细胞增殖的影响;平皿克隆形成法、软琼脂克隆形成法测定EV-n50对人宫颈癌Hela细胞锚定依赖性生长和锚定非依赖性生长作用的影响;AO／EB染色荧光显微镜观察EVn-50诱导Hela细胞凋亡的形态学改变;DNA凝胶电泳确证EVn-50诱导Hela细胞凋亡作用。结果EVn-50对体外培养人宫颈癌Hela细胞的增殖具有显著抑制作用,呈浓度依赖性。EVn-50可诱导Hela细胞凋亡,AO／EB染色可见典型凋亡小体;DNA凝胶电泳在EVn-50浓度100μg／mL作用48h出现典型“梯形”DNA条带。结论EVn-50具有抑制人宫颈癌Hela细胞增殖并诱导细胞凋亡作用。     

峨眉岩白菜总三萜纯化及活性分析

以峨眉岩白菜为研究对象，采用沉淀分级溶解法初步纯化其总三萜化合物并比较纯化前后总三萜抗氧化、抑菌和抑癌活性.结果表明：经4次冻干后，样品提取率从38.13 %降低到26.79 %，提取物中总三萜含量从48.58 %升高到70.99 %；纯化后的总三萜化合物总还原能力增强，对DPPH自由基的清除能力增强，IC50由0.32 mg·mL－1降低到0.27 mg·mL－1；峨眉岩白菜总三萜对铜绿假单胞杆菌和枯草芽孢杆菌均有一定的抑制能力，纯化后能提高总三萜对两种菌的敏感度；纯化后总三萜提取物对Hela细胞24和48 h的IC50从纯化前的102.5和69.00 μg·mL－1降低到59.01和28.56 μg·mL－1，对A549肺癌细胞24和48 h的IC50从纯化前的238.90 μg·mL－1和172.00 μg·mL－1降低到84.32 μg·mL－1和65.99 μg·mL－1.因此沉淀分级溶解法可适用于峨眉岩白菜总三萜的纯化，纯化后的总三萜体外抗氧化、抑菌活性和抑癌活性均有一定程度的提高.