海滨锦葵杂交后代的RAPD分析

报道了海滨锦葵植物基因组DNA的提取方法、RAPD(随机扩增多态性)-PCR(聚合酶链式反应)反应程序及RAPD标记对海滨锦葵两对组合亲本及其杂交后代进行的分子鉴定.初筛出的38个引物中有20个(52.6%)能在J2×J1组合亲本间扩增出31条特征带,初筛出的32个引物中有8个能在J3×J4组合亲本间扩增出12条特征带.组合J2×J1的8个杂交后代用OPB15引物扩增后均表现出父本J2的特征带,是真杂种;组合J3×J4的28个后代用引物OPB15扩增后,表现父本特征带的F1代个体数为24个,为真杂种,其余4个为假杂种.     

东北红豆杉杂交种鉴定及遗传多样性分析

为保护东北红豆杉种质资源,同时为新品种选育提供科学依据,采用EST-SSR分子标记技术对126个东北红豆杉杂交样本及其亲本基因组DNA进行了扩增,分析了杂交种与其父、母本间扩增谱带的多态性,建立了杂交种快速鉴定体系,并结合形态学特征对杂交后代的遗传多样性进行了分析.结果表明:从已开发的EST-SSR引物中筛选出12对多态性较高的引物,多态性比率为83.5%,平均PIC值为0.668,表现出了较高的多态性;平均观测杂合度(Ho)为0.440(0.257～0.587),平均期望杂合度为0.659(0.523～0.796),可见,期望杂合度比观测杂合度要高;遗传分化系数(FST)平均值为0.136(0.011～0.213),表明红豆杉杂交种群体间遗传分化程度适中,说明基因在杂交群体间流动较大,群体特征相对稳定;采用2对红豆杉多态性EST-SSR引物对杂交种材料进行鉴定分析,最终从126份杂交后代样本中鉴定出99个真杂交样本.     

红莲型水稻不育系与保持系线粒体DNA酶切分析

为研究红莲型水稻细胞质雄性不育的分子基础，我们提取纯化了红莲型水稻丛广４１Ａ和丛广４１Ｂ的线粒体ＤＮＡ，采用限制性内切酶酶切片段长度多态性（ＲＦＬＰ）方法比较了红莲型不育系和保持系线粒体ＤＮＡ酶切图谱，发现两者之间存在一定的差异，部分支持了细胞质雄性不育与线粒体ＤＮＡ有关的结论。     

微卫星标记分析籼粳亚种间的遗传多样性

208对引物中具有多态性的引物123对，占所用引物的59．13％，不同染色体的微卫星分析的多态性不同，染色体9，10微卫星的多态性高于其它染色体，染色体12上的微卫星标记的多态性最差，仅为46．15％．聚类分析表明，所有的供试材料可分为两群，即籼稻群和粳稻群，聚类结果与亲本材料亲缘关系基本一致，说明微卫星标记能较好地区分籼稻和粳稻，由于农艺性状是基因表达的结果，易受环境影响，聚类结果不能从整体上充分反应品种间的遗传变异，42份常用杂交水稻亲本材料聚类分析表明，恢复系和不育系遗传基础均较狭窄，但恢复系和不育系之间的遗传距离相对较远，从一定程度上反映了遗传距离与杂种优势正相关。     

银鲫人工杂交试验中雄核发育现象的RAPD实验证据

以随机扩增多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术为手段，对生野鲫，雄性异育银鲫及其杂交ＦＩ代（选择性状接近父本的５％Ｆ１代），父本回交Ｆ１你进行了遗传多态分析，从１５０个随机序列引物中筛选得到９种引物，并用它们可得到３６个用作遗传标记的ＲＡＰＤ多态性条带，其中的２２条父本显性条带均遗传子代，而１４条母本性条带则均未被遗传子代，对两亲本和子代中的ＲＡＰＤ标记条带的分布情况及相似系数分析，以及聚类分析结果均支持     

燕麦品种间杂交后代SSR遗传变异分析

采用SSR分子标记技术研究燕麦杂交后代与亲本之间在DNA分子水平上的遗传变异,为杂交亲本选配提供基因组水平理论依据。试验从50对SSR引物中筛选出11对多态性明显、重复性比较好的引物,共扩增出143个DNA片段,其中111个片段呈现多态性,占总扩增片段的63.3%;燕麦杂交后代与亲本的相似性系数范围为0.42~0.77。UPGMA聚类分析结果表明,SSR标记能将这14个杂交后代相互区分开,且品系Ⅱ比品系Ⅰ遗传变异较大。     

红花性状标记杂交棉新品种鲁05H9 SSR指纹图谱构建及应用

利用SSR分子标记技术对红花标记杂交棉新品种鲁05H9及其亲本材料进行多态性检测,从多态性高、重复性好的98对SSR核心引物中筛选出12对在双亲间具有多态性的引物、在F1中表现为杂合带的共显性标记。利用该12对引物构建了鲁05H9及其亲本的SSR指纹图谱。利用核心引物组合扩增的方法,可以鉴定鲁05H9的真实性和纯度,对于品种保护、纯度鉴定及杂交种推广具有极其重要的意义。     

利用RAPD检测技术推测杂交落羽杉群落间的亲缘关系

采用随机引物扩增多态性DNA（RAPD）技术，对8个可能是杂交墨西哥落羽杉片林样本、其杂交母本-墨西哥落羽杉和杂交父本的同类-柳杉，共计12个样本进行了亲缘关系鉴定和遗传多样性分析，从31个引物筛选出17个随机引物，共扩增出164条带，其中，多态带有162条，占全部条带的98.8%，检测结果表明：在编号为8，11，12的3个柳杉样本中，11号与原杂交父本亲缘关系最近；1，4，9号是杂交墨杉群落的可能性最大；5号可能是未杂交的墨杉纯林，其他群落的样本是否为杂交墨彬尚不能通过本试验得出明确结论。     

黄瓜杂交种子纯度的RAPD鉴定

鉴定和分析了黄瓜品种真实性，并建立了应用于鉴定亲本及其杂交种子的RAPD指纹图谱。从102条引物中筛选出了应用于黄瓜种子纯度鉴定的引物32条：13条偏母型引物，9条偏父型引物，5条互补型引物，2条特异型引物及3条缺失型引物。利用4条引物S293，SS87，S297，S300鉴定3份黄瓜种子的纯度，在94粒种子中有父本混杂2粒，母本混杂1粒及6粒其它种子混杂，从而表明该份黄瓜种子的纯度为90．04％。建立了黄瓜早青二号父本T03雄性系、早青二号母本B35雌性系以及其杂交种子的RAPD的指纹图谱。     

基于SSR标记的丛生竹杂种鉴定、遗传分析和指纹图谱构建

【目的】 准确鉴定丛生竹杂交种,分析杂种及其亲本的遗传关系,开发可以利用的指纹图谱。【方法】 以孝顺竹(Bambusa multiplex)×麻竹(Dendrocalamus latiflorus)、孝顺竹(B. multiplex)×粉单竹(B. chungii)两个杂交群体为材料,从已公布的竹子SSR引物中随机选取30对引物进行筛选、检测和分析。【结果】 发现6对SSR引物(P8、P9、P18、P19、P20、P27)适于孝顺竹×麻竹组合的杂种鉴定和遗传分析,鉴定结果表明34个子代全部为真实杂种,杂种真实率为100%;另外6对SSR引物(P2、P9、P10、P11、P20、P28)则适于孝顺竹×粉单竹组合的杂种鉴定和遗传分析,鉴定结果表明59个子代中有54个真实杂种,杂种真实率为91.5%。孝顺竹×麻竹的杂种遗传了较多的母本位点,而孝顺竹×粉单竹的杂种则遗传了较多的父本位点。利用SSR引物扩增出的位点分别构建了两个杂交群体的指纹图谱,为品种保护提供了保障。【结论】 SSR引物能有效地鉴定丛生竹杂交种的真伪,父母本的遗传位点在不同杂交组合的子代中遗传概率不同,杂交群体指纹图谱的构建可为品种保护提供保障。     

水稻光温敏雄性不育基因连锁标记的分离与鉴定

两系法杂交稻是一种利用水稻杂种优势的重要途径，主要依据水稻光温敏雄性不育系在不同条件下的育性转换用于配制杂交种．以培矮64S(PTGMS)与明恢63杂种自交的F2代为供试材料，采用随机放大多态性DNA(RAPD)技术分离与培矮64S的PTGMS基因连锁的分子标记．在F2代2个分别代表可育和不育的群体以及亲本株系中，采用100个RAPD引物扩放基因组DNA筛选多态性DNA片段．RAPD引物S8产生的DNA片段中，除重复顺序外，有一个长度为0．85kb片段为单拷贝．分子杂交表明，这一单拷贝标记与培矮64S的PTGMS基因连锁．     

抗广谱除草剂pursuit水稻的抗性遗传分析和利用

以4个恢复系测64、明恢63、特青和02428为母本,分别与抗除草剂pursuit(普杀特)水稻品种PT2杂交,遗传分析表明,PT2的抗性遗传符合一对显性核基因的模式.通过杂交一代和回交二代已将抗性基因转移到恢复系,初步培育出4个抗性恢复系测64-P、明恢63-P、特青-P和02428-P;它们与不育系杂交,选育到4个杂交稻组合.考种结果发现,抗除草剂组合基本上能保持原组合的产量水平,苗期喷药可完全淘汰假杂种.利用这项技术可望解决三系、两系或化学杀雄杂交稻制种过程中出现的纯度问题,且有利于新杂交稻组合的选育.对该项技术在生产上的应用前景和存在问题进行探讨.     

小粒野生稻型细胞质雄性不育系的创建及其恢保关系鉴定

小野1A是由小粒野生稻(Oryza minuta Presl.)中天然不育株与Y58S/内香B杂种后代优秀单株经多代回交转育而成。由于该雄性不育细胞质来自小粒野生稻,称为XY型雄性不育细胞质。恢保关系鉴定结果表明,XY型细胞质雄性不育系与野败型(WA)、印尼水田谷型(ID)、K型和红莲型(HL)细胞质雄性不育系的恢保关系不同,WA型、ID型、K型和HL型的保持系和恢复系中部分可以作为XY型雄性不育细胞质的保持系,部分可以作为XY型雄性不育细胞质的恢复系。XY型雄性不育细胞质突破了WA型、ID型、K型和HL型等雄性不育细胞质的恢保关系,扩大了保持系育种范围,可以用品质优良的栽培品种培育出高标准优质米不育系。由此可见,XY型雄性不育细胞质的发掘,不仅丰富了杂交稻细胞质遗传多样性,而且为培育高标准优质米不育系、进而实质性提高杂交稻稻米品质开辟了一条崭新的育种途径。     

不同品种果蝇及其杂交后代的RAPD多态性分析

通过果蝇近交系的建立,用ＲＡＰＤ技术研究了不同品种果蝇及其杂交后代的ＤＮＡ多态性。结果表明：（１）近交作为一种育种方法,只要利用得当,得是大于害的,在畜禽育种的某些条件下还是可以采用的;（２）不同品种或系间有特异性的ＲＡＰＤ带;（３）在近交系与它们的杂交后代间的ＲＡＰＤ带中,多数带为正反交子代与双亲均相同或正反交子代与单亲共有的带,但有些带上亲代与子代间存在着擀和量的差异,在质的差异上出现双亲中没     

Characterization and molecular marker screening of a rice bacteria-resistant gene Xa-min(t)

To test the resistant spectrum of the Xa-min(t) gene introgressed from Oryza minuta, thirty-four isolates of different bacterial blight pathogen, Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo), from 11 countries were used to inoculate the Xa-min(t) introgression line 78-15. Four rice cultivars, IR24, C64 (IRBB21), Nipponbare and Zhonghua 11 were used as controls. The results showed that the Xa-min(t) gene was broad-spectrum and highly resistant to diverse Xoo isolates. The methods of bulk segregant analysis (BSA), randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) and sequence characterized amplified regions (SCAR) were used to analyze F2 individuals of the hybrid IR24×78-15 and molecular genetic markers linked to Xa-min(t) gene were identified. A total of 800 arbitrary decamer oligonucleotide primers were used for RAPD analysis. Two RAPD markers, BE05300 and BE061400, produced by primers BE05 and BE06 respectively, were closely linked to the Xa-min(t) gene. Based on the sequences of these two markers, sequence specific primers were designed and used to screen all F2 plants. One RAPD marker, BE05300, was converted into a stable SCAR marker (ScBE05300). Linkage analysis was carried out using markers ScBE05300 and BE061400 on 948 and 719 F2 individuals of the hybrid IR24×78-15. Our results indicate that the genetic distances from Xa-min(t) to ScBE05300 and BE061400 are 2.2 cM and 3.7 cM respectively on the same side. This study may facilitate the construction of the fine physical map of the Xa-min(t) gene.     

松枯梢病菌RAPD分子水平遗传距离分析

对来自中国、美国、英国、南非和智利的松枯梢病菌23个菌株进行RAPD分析。用12个引物共扩增出135个RAPD标记,其中多态性标记占96.3%。各菌株间的Nei相似系数UPGMA法聚类结果表明,国内外23个菌株可大致分为3个类群:来自智利的CWS41与所有菌株的遗传关系最远;来自中国的F2和J2次之;其他的国外菌株与国内菌株的遗传关系则较近。此次实验未将来自美国的B型菌株与其他菌株区分开。     

甘蓝型杂交油菜"蜀杂9号"种子纯度的RAPD鉴定

通过50个随机引物对“蜀杂9号”亲本进行RAPD扩增,选出了两个能在父、母本间产生多态性扩增的随机引物S18和S31,在杂种F,代中验证了它们的特异性和稳定性,证明随机引物S18和S31能分别在F1代中稳定扩增出父本和母本的特异标记片段S18750与S31550．对该引物的RAPD-PCR的反应体系优化后,对“蜀杂9号”父、母本和杂种F1代的单株进行了随机检测,结果表明这两个RAPD标记配合使用能稳定可靠地鉴定甘蓝型杂交油菜“蜀杂9号”种子的纯度．     

利用RAPD方法鉴定西瓜杂种纯度的研究

以不同西瓜杂交种及亲本自交系为材料，研究利用RAPD技术鉴定西瓜杂种的纯度及种质。结果表明：在反应条件适合、引物选择正确的情况下，RAPD技术完全适合于西瓜杂交种纯度的早期鉴定及种质鉴定。同时发现，引物OPD16及OPA07适合种内鉴定，而引物OPA10、OPA13、OPH18可用于杂种纯度鉴定。同时，对利用同工酶技术和RAPD技术在进行西瓜杂交种鉴定过程中的优缺点进行了分析与讨论。     

RAPD 在油用向日葵自交系鉴定和遗传分析中的应用

利用RAPD标记对8个油用向日葵自交系进行了鉴定和遗传分析。从40个UBC引物中筛选出12个能产生稳定遗传多态性的引物，利用其中3个引物提供的RAPD标记可将8个自交系逐一加以鉴别。12个引物对8个自交系共扩增出41条带，其中39条（占95.1％）具有多态性，每个引物可扩增出1～7条带，平均为3.4条带。不同自交系之间的RAPD遗传距离在0.13～0.85之间，平均为0.42。按UPGMA方法可将8个自交系聚为2大类、4个亚类。     

酿酒酵母与雨生红球藻的细胞融合子的RAPD鉴定

用7条随机引物对雨生红球藻(Haemotococcumpluvies)、酿酒酵母(Saccaromycescerevisiae)及其融合酵母变株进行RAPD分析.在融合子的54条谱带中,有7条为双亲共有,占12.96%,与酿酒酵母相同的18条(33%),与雨生红球藻相同的17条(30.9%),其余12条(23.54%)为融合子的新谱带,结果表明该融合子很可能是雨生红球藻、酿酒酵母细胞杂种.