复方黄芪生脉饮化学成分的UPLC-Q-TOF/MS分析

对复方黄芪生脉饮中的化学成分进行定性分析,采用UPLC-Q-TOF/MS,AC-QUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×50 mm×1.7μm),0.1％甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,质谱使用ESI负离子模式下采集数据.根据UPLC-Q-TOF/MS产生的一级和二级质谱信息,结合对照品及相关文献,共推测鉴定出25个化合物.所建立的方法选择性高、灵敏度强,能够对复方黄芪生脉饮中的化学成分进行快速鉴别和分析,为黄芪生脉饮的药效物质基础研究提供依据.     

UPLC法测定略阳天麻中天麻素

建立了天麻中天麻素含量的超高效液相色谱紫外检测法,主要采用Waters Acquity-BEH C18柱(1.7μm,50 mm×2.5 mm),以乙腈和0.1%甲酸为流动相,流速0.3 m L/min进行梯度洗脱,乙腈洗脱浓度和时间为:3%(0 min)—20%(3 min)—3%(4 min)—3%(5 min),柱温30℃,进样量5μL,检测时间5 min,二极管阵列检测器,检测波长220 nm。该色谱分析条件下,天麻素能达到较好的基线分离,检测时间为5 min,经方法学考察可知该方法可行性高,能准确分析天麻中的天麻素,方法快速、方便、准确可行。     

液相色谱-串联质谱法同时快速测定婴幼儿谷物食品中3种莨菪烷生物碱

采用固相萃取净化去除样品中蛋白类物质的干扰,建立婴幼儿谷物食品中3种莨菪烷生物碱的液相色谱-串联质谱检测方法.样品经体积分数为80％(v/v)乙腈水溶液提取后,经Oasis PRiME HLB SPE固相萃取柱净化.净化后的样品采用Agilent Poroshell 120 EC-C18柱(2.7μm,3.0 mm×75 mm)分离,以0.1％(v/v)甲酸乙腈溶液和0.1％(v/v)甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,多反应监测正离子模式扫描,采用基质溶液外标法定量.3种莨菪烷生物碱在1.0～50.0μg·L-1浓度范围内线性关系良好(R2﹥0.999),方法的检出限均为0.5μg·kg-1;回收率为86.8％ ～103.3％,相对标准偏差为5.2％ ～8.9％.该方法前处理操作简便,灵敏度和准确度高,可实现婴幼儿谷物食品中3种莨菪烷生物碱的同时快速测定.     

UHPLC-MS/MS法测定大鼠不同脑区乙酰胆碱的含量

建立一种快速、简便、准确的液-质联用法以检测大鼠4个脑区中内源性神经递质乙酰胆碱的含量.采用Waters Acquity UPLC HSS PFP柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以0.1%甲酸水-0.1%甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为0.3 m L/min,柱温为35℃,离子源为电喷雾离子源,采用正离子多反应监测扫描方式检测.健康大鼠麻醉后,快速于冰上取脑分区,样品称重,与5倍0.1%甲酸水匀浆,再与4倍0.1%甲酸乙腈(含内标)沉淀蛋白,离心取上清进行LC-MS/MS检测.在本研究所建立的实验条件下,乙酰胆碱的方法学验证结果符合相关规定,其浓度在0.5~200 ng/mL范围内线性关系良好(r0.99),定量下限为0.5 ng/m L,基质效应和回收率均大于80%,日内、日间精密度均在15%范围内,可准确、精密地检测大鼠脑区中乙酰胆碱的含量.由结果可知,乙酰胆碱在纹状体中含量显著高于其他3个脑区(P≤0.01,n=10).全面检测不同脑区乙酰胆碱的含量,能够根据其脑内含量的变化解析神经相关疾病的发病机制,有利于疾病的诊断和治疗.     

双黄连粉针中间体与制剂UPLC-MS指纹图谱相关性

为建立双黄连粉针中间体的UPLC-MS指纹图谱.采用ACQUITY UPLCTM BEH C18Column(1.7μm,2.1×50 mm,Waters Corp,Milford USA)作为色谱柱;乙腈-0.1%甲酸为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 m L/min,柱温40℃.建立了13批双黄连粉针中间体的UPLC指纹图谱共有模式,特征图谱有26个共有峰,以对照品为对照,指认了3个主要色谱峰,各色谱峰有较好的分离效果.对13批双黄连粉针剂中间体的特征图谱进行聚类分析,并采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)"对其质量进行评价.本方法快速、高效,可用于双黄连粉针剂中间体的质量控制,同时与成品制剂之间具有良好的相关性.     

UPLC-MS/MS法测定苦蘵宿萼中physalin H和physalin D的含量

建立了同时测定苦蘵中2种酸浆苦味素类化合物含量的方法.应用超高效液相色谱(UPLC)与Qtrap质谱(MS)联用同时测定苦蘵中酸浆苦味素H(physalin H)和酸浆苦味素D(physalin D)2个成分的含量.采用Waters Acquity BEH C18(100 mm×2.1 mm, 1.7μm)色谱柱,以水(0.1%甲酸)-乙腈(0.1%甲酸)为流动相,梯度洗脱,柱温35℃,流速0.3 mL·min~(-1),使用ESI~+离子源,多反应监测(MRM)模式扫描,对physalin H和physalin D进行定量.结果表明physalin H和physalin D在5～10 000 ng·mL~(-1)范围内具有良好的线性关系,相关系数(r)分别为0.999 7和0.999 5;平均加样回收率(n=5)分别为71.1%和71.0%,RSD值分别为1.36%和1.47%.该方法准确可靠,可用于苦蘵药材中physalin H和physalin D的含量测定,为有效控制苦蘵药材的质量奠定了基础.     

超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱法同时检验全血中5种4-取代卡西酮类结构类似物

为实现对同位置不同取代基团的卡西酮类结构类似物的准确分析,建立了超高效液相色谱-四级杆飞行时间串联质谱法(UPLC-QTOF-MS)检验全血中4-甲基甲卡西酮(4-methylmethcathi-none,4-MMC)、4-氟甲卡西酮[1-(4-fluoroph-enyl)-2-methylaminopropan-1-one,4-FMC]、4-氯甲卡西酮[1-(4-chlorophenyl)-2-(methylami-no)propan-1-one,4-CMC]、4-溴甲卡西酮[1-(4-bromophenyl)-2-methylaminopropan-1-one,4-BMC]、4-甲氧基甲卡西酮[1-(4-methoxyphe-nyl)-2-methylaminopropan-1-one,Me-thedrone]5种同位置不同取代基团的卡西酮类结构类似物.前处理选用沉淀蛋白法:室温下,将不同浓度混标毒品与全血的混合物震荡1 min,在12000 r/min转速、温度为5℃的条件下离心7 min.离心结束之后,取上清液待用.采用ACQUITY UP-LC?BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm)分离,以0.1％甲酸水和0.1％甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱,电喷雾电离正离子扫描多反映检测模式.5种毒品检出限(信噪比S/N≥3)在0.5～1 ng/mL,定量限(S/N≥10)在1～2 ng/mL,基质效应为72.97％ ～101.44％,回收率为98.18％ ～119.77％,日内及日间精密度RSD≤9.95％.本文方法快速、准确,可实现全血中5种4-取代卡西酮类结构类似物定性定量分析,满足实际检验工作需要.     

HPLC法测定鲜天麻中多指标成分的含量

建立了高效液相色谱测定鲜天麻中天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、腺苷、巴利森苷A、4,4'-二羟基二苄基醚6种成分含量的方法。采用Agilent 1120高效液相系统,YMC-PEAK ODS-A column(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-甲醇溶液(B),梯度洗脱:0~5 min,5%B;5~65 min,5%~40%B;65~80 min,40%~100%B;分析时间80 mins;流速1 m L/min;柱温25℃;进样量50μL。其中天麻素、对羟基苯甲醇、对羟基苯甲醛、腺苷、巴利森苷A、4,4'-二羟基二苄基醚6种成分在线性范围内均具有良好的线性关系(R≥0.999 2);平均回收率在94.20%~99.68%,相对标准偏差小于1.96%。在不同品种的鲜天麻中,6种成分的量存在差异,红天麻各成分含量稍高于乌天麻。同一品种天麻中,巴利森苷类成分含量较高,腺苷和4,4'-二羟基二苄基醚含量均较低,且鲜天麻中提取的天麻素等6种成分在8 h内稳定。该方法分离效果与重复性好、快速、简便,能够为客观、全面地研究天麻药材提供参考。     

超高效液相色谱-三重四极杆串联质谱法检测全血中常见安眠镇静类药物

建立了超高效液相色谱-三重四极杆复合线性离子阱质谱快速筛查确证全血中49种安眠镇静类药物.样品前处理采用固相支撑液液萃取法.色谱条件：色谱柱为Waters C18(2.1 mm×50 mm, 1.7μm),以5 mmol/L乙酸铵-(体积分数为0.1%)甲酸水溶液(A),甲醇(B)为流动相,进行梯度洗脱.在0.1～200.0 ng/mL内,49种常见药物展现出良好的线性关系(R²>0.99),最高检出限为0.1 ng/mL;最高定量限为0.5 ng/mL;全血基质中50、100、200 ng/mL 3个加标水平下回收率为65.9%～109.0%,日内精密度为2.0%～17.6%、日间精密度为2.0%～16.3%.该方法可应用于生物检材中49种常见安眠镇静物质的检测.     

不同炮制方法对天麻6个成分含量的影响与评价

目的:建立HPLC法同时测定天麻中6个成分含量,并采用雷达图分析及评价其物质基础改变与不同炮制方法的相关性。方法:采用迪马C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相乙腈(A)-0.05%磷酸(B),梯度洗脱,体积流量1.0 m L/min;检测波长270 nm;柱温25℃。将3批不同炮制方法天麻样品中6种化学成分含量数据采用SPSS 10.0软件进行组间t检验统计处理;以代表批次天麻的6种化学成分进行雷达图分析。结果:方法学验证结果表明,3批不同炮制方法天麻的6个化学成分在各自线性范围内呈良好的线性关系(r0.9990),平均回收率在99.5%~101.0%之间(RSD 0.9%~2.9%);不同炮制方法的样品测定分析结果表明,天麻的组分和含量存在差异性,其中巴利森苷A含量在微波炮制中具有统计学意义(P0.05);雷达图结果表明,天麻素的含量在蜜制和微波后较其它工艺高,对羟基苯甲醇的含量则在酒制后较其它工艺高;而5-HMF大部分只在微波工艺中检测到。结论:本检测方法快速、准确,可为中医临床用药提供科学依据,为建立不同规格天麻饮片质量标准提供参考和数据支撑。