嗜热芽孢杆菌β-半乳糖苷酶发酵条件研究

以嗜热芽孢杆菌为菌种,研究发酵生产β－半乳糖苷酶的条件。应用均匀设计法优化发酵培养基组成,结果为（ｇ／Ｌ）：乳糖０．５、蛋白胨２．０、牛肉浸膏２．０、Ｋ２ＨＰＯ４ ０．０１。在温度５５℃、初始ｐＨ７．０、摇床转速２００ｒ／ｍ ｉｎ 和１０％ 接种量条件下,发酵２４ｈ,β－半乳糖苷酶酶活力达１３．２Ｕ／ｍ Ｌ。在乳糖水解反应中,证实该酶能催化转半乳糖苷反应,合成半乳糖低聚糖。     

紫苏籽油超临界萃取最佳工艺条件的研究

采用正交试验确定了超临界ＣＯ２萃取紫苏籽油的工艺条件,并与传统的溶剂萃取法进行比较,实验结果表明,萃取的最佳条件为：压力２０ＭＰａ,温度４０℃,时间６ｈ,ＣＯ２流量为３０Ｌ／ｈ,草取率可达３７．２％,α－亚麻酸含量为７３．１％,比传统的溶剂萃取法有很大的优越性。     

半胱氨酸共存情况下一种快速准确测定谷胱甘肽的新方法

２０～３０ｍ ｍ ｏｌ／ Ｌ 半胱氨酸在 ２ｍ ｉｎ 内可与 φ＝ ０．０３ 甲醛完全反应而被掩蔽。利用谷胱甘肽与 ５,５′二硫代双（２硝基苯甲酸）（ Ｄ Ｔ Ｎ Ｂ）的颜色反应,测定产物在波长 ４１２ｎｍ 的 Ｏ Ｄ 值,通过计算或标准曲线可迅速得出谷胱甘肽含量,误差小于 ２％ 。     

激光复合诱变黑曲霉原生质体选育热稳定菊粉酶高产菌

以菊粉酶产生菌黑曲霉ＡＳ－４原生质体为对象,经激光和亚硝基胍复合诱变,从大量突变株中最终选育出高产热稳定的菊粉酶产生菌ＡＬ－１５４．在以菊芋提取液为碳源、玉米浆加０．３％酵母膏为氮源的基本培养基中,菊粉酶活力达１４６．３ｕ／ｍＬ,比出发株提高近３倍．其产酶最适营养条件为：起始ｐＨ４．５～５．０,２８～３０℃,３６ｈ时产酶量达最高．酶作用最适条件为ｐＨ５．０,６０℃;该酶遗传性能稳定,热稳定性强,６０℃保温处理２ｈ,其酶活性不变,６５℃保温３０ｍｉｎ,仍保留９８％的初始酶活     

洁霉素产生菌原生质体的形成、再生和融合

洁霉素产生菌不论生长在含有甘氨酸的S培养基或不含甘氨酸的S培养基的菌丝中,其细胞壁均可被溶菌酶溶解而释放出原生质体。甘氨酸浓度为1.0％破壁效果最好,溶菌酶的作用浓度以2.5mg/ml为最佳。原生质体在Hb培养基上能够很好地再生。用P培养基配制的40％(w/v)PEG1000溶液,能有效地诱导洁霉素产生菌原生质体融合。融合重组频率达6.7％。     

酵母嗜杀质粒融合转移──Ⅰ．融合转移系统的建立

以嗜杀酵母ＥＲＲ１和啤酒生产酵母ＡＳ２４２０出发菌株，建立了供体菌ＭＫ２－３：Ｋ＋Ｒ＋Ｌｅｕ－ρ＋（ｎ）和受体菌ＡＳ２４２０－１：Ｋ－Ｒ－ｌｅｕ＋ρ°（２ｎ）．对原生质体制备再生条件的研究结果表明两株菌的原生质体制备条件不尽相同；同一菌株原生质体形成与再生的最佳条件也不相同．有利于融合再生的原生质体制备条件是ＭＫ２－３：菌龄３０ｈ，蜗牛酶解量３０ｇ／Ｌ酶解时间３０ｍｉｎ，此时原生质体形成率为８０％，而再生率达１７．１％，这些条件对嗜杀活性无影响，再生菌落的嗜杀活性率达１００％；而ＡＳ２４２０－１；菌龄２４ｈ，蜗牛酶量２０ｇ／Ｌ，酶解时间３０ｍｉｎ，原生质体形成率为８１％，再生率为１８．１％．对四种渗透压稳定剂的再生效果实验表明甘露醇效果最佳，氯化钾次之，考虑到廉价，氯化钾是很好的代用品，在３０％ＰＥＧ６０００及Ｃａ２＋条件下进行原生质体融合，融合率可达８．９×１０－６，对其中的融合子ＭＡＲ４的遗传性状及嗜杀活性的稳定性检测，ＤＮＡ含量及细胞大小测定，ｄｓＲＮＡ质粒的提取及电泳结果分析和发酵性能测定，结果表明融合子ＭＡＲ４具有较高的嗜杀活性并可以稳定遗传，有与供体菌ＭＫ２－３嗜杀质粒ｄｓＲＮＡ相同的电泳行为，     

超声波对烟草花粉的生物学效应及其诱导外源基因向烟草花粉的转移

用超声波法处理烟草花粉的生物学效应及它诱导ＧＵＳ基因转化烟草花粉,获得了短暂表达的研究结果．单核晚期和双核早中期的烟草游离花粉,置于含０．４ｍ ｏｌ／Ｌ甘露醇的缓冲液中,随着超声强度提高或／和处理时间的延长,对烟草花粉的活力和萌发率具有显著影响．声强０．５Ｗ／ｃｍ ２、时间１０～２０ｍ ｉｎ 是比较理想的参数．将游离花粉与质粒ｐＢⅠ１２１ 混合,以声强为０．５Ｗ／ｃｍ ２ 的脉冲超声波处理１０ｍ ｉｎ, 检测ＧＵＳ基因的平均短暂表达频率（ＴＴＦ％ ）,单核晚期花粉为１８．６％ ,双核早中期花粉为３５．７％ ．对超声转化的不同发育时期的烟草花粉,分别以两条不同途径操作和筛选转基因植株：（１） 单核晚期的花粉：直接进行体外培养、植株再生和筛选,以期获得单倍体转基因植株．在卡那霉素选择培养基上,花粉细胞进行两次或多次分裂后即行停止;（２） 双核早中期的花粉,在体外培养成熟后授粉,收获种子,检测种子中外源基因是否存在．在所收３４１ 粒种子中,没能筛选到卡那霉素抗性植株．就如何筛选超声波转化花粉、获得转基因植株的技术途径进行了讨论．     

超滤浓缩担子菌发酵液聚合物的研究

利用中空纤维超滤器对灵芝发酵液中聚合物的浓缩进行了较系统的研究,并推导出该超滤器放大的适宜计算公式．结果表明：截留分子量１００００ｄ的聚砜不对称膜是适于超滤浓缩灵芝发酵液的超滤膜．适宜的超滤条件为操作压力０．２ＭＰａ,料液温度２０～３０℃,循环速度０．２２ｍ／ｓ;在此条件下超滤２００ｍｉｎ,通量及截留率分别稳定在９．１Ｌ／（ｍ２ｈ）和９６％左右,发酵液聚合物浓缩５倍以上,其收率达９２．６％．     

木聚糖降解菌的筛选和木聚糖酶性质的研究

筛选两株生长快、产木聚糖酶活力高的菌种；黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ，ＡＮ０１）、链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｓｐ．Ｓｔｒ７Ｂ），酶活力分别达１２８ｍｇ／Ｌ·ｍｉｎ和１７６ｍｇ／Ｌ·ｍｉｎ；酶反应最适温度分别为６０℃与５０℃；最适ｐＨ值为５．０和６．０，并分别在ｐＨ２．２～５．０，５．８～６．４酶活性稳定；在６０℃条件下保温１．５ｈ，酶活力分别剩余２０．５％，８８．５％，其中ＡＮ０１株原酶液在９０℃保温１０ｍｉｎ，活力仍剩余１４．５％．Ｃｕ２＋对酶活表现出极强抑制，Ｆｅ２＋，Ｍｇ２＋，Ｃａ２＋等离子则有促进作用；用纸层析法探讨了不同培养时间各种产物产生的情况．     

苝醌类化合物产生菌固态发酵工艺研究

从云南省西北部山区采集到一株能产生Ｂａ醌类化合物的寄生菌属真菌,以ｍ（米）：ｍ（玉米粉）：ｍ（麦麸）＝２：１：１为基础培养基,研究了温度,ＰＨ,碳源,氮源,水对该菌产生北醌类化合物的影响。并用正交实验选择了固态发酵的最佳培养条件：在每千克基础培养其中添加２０ｇ蛋白胨和０．８ｋｇ水,温度２６℃,ＰＨ自然,北醌类化合物的质量分数约为０．２％。     

高邮神居山二号汉墓的木材鉴定

1979年南京博物院在江苏高邮县神居山发掘汉墓两座,前后经历四年时间。根据发掘资料初步考证,一号墓墓主人可能为西汉广陵国第一代历王胥,二号墓墓主人当为历王胥的夫人。刘胥为汉武帝之子,掌广陵王国,辖今扬州、高邮、宝应等地。神居山汉墓为大型“题凑”木椁墓。“题凑”木椁墓迄今全国已发掘出六座,但保存都不完好,唯高邮神居山汉墓保存较好。二号汉墓有三椁两棺,该墓木结构部分经推算约由500多立方米木材组成,用材种类很多。关于汉代墓葬结构所用木材,历史文献有所记载,为弄清这方面的问题,同时为研究中国古代丧葬制度及中国古代建筑史,我们对二号汉墓结构用材进行了鉴定。 一、材料和方法 送检木材分外棺木、内棺木、内椁木、“棺柩架”、中椁木、外藏椁盖木、“棺柩架”木栓、“题凑”木、“题凑”上盖木、“题凑”下盖木、木牍、地龙、底木、御马俑、木马等部分(附示意图),内木马因压缩变形,基本组织已无法分辨。棺椁由于埋入地下达两千余年之久,木材变色、腐朽,并压缩变形,有些已面目全非。鉴定工作主要以显微构造为依据,辅以肉眼和扩大镜下的宏观特征。     

新本尼登虫Neobenedenia sp. 的扫描电镜观察

报告作者在扫描间下详细观察新本尼登虫Ｎｅｏｂｅｎｅｄｅｎｉａ ｓｐ．和本尼登虫Ｂｅｎｅｄｅｎｉａ ｓｐ．之超微结构,并比较两者之间的差异。     

Aspergillus sp.1-13菌株β-木糖苷酶的提纯和部分性质

通过80 %饱和度硫酸铵沉淀、DEAE -SephadexA -50离子交换柱层析和SephadexG -100凝胶过滤柱层析等方法从Aspergillussp .1 -13菌株的白酒丢糟固体培养物的抽提液中分离纯化到一种 β-木糖苷酶。通过SDS -PAGE分析测定其分子量为110.9KD。该酶最适反应pH值为3.2～3.8之间,最适反应温度为70℃。该酶具有较宽的 pH稳定性 ,并且在60℃以下较稳定。     

石油降解菌的分离、表征及其降油最适状态研究

从油田污泥中分离到两株能有效降解石油烃的革兰氏染色阴性、好氧细菌。x-1菌株,呈粗杆状(1.0-1.2×2.2-3.7μm),两端圆,主要成连也有成对,周生鞭毛。x-3呈短粗杆状(1.0-1.3×1.6-3.4μm),两端圆,成对或成短连,也有单个。经初步鉴定均为无色杆菌属(Achromobactersp.)。研究了影响菌株降油能力的主要影响因素,并确定两种菌株的适宜降油条件,其中x-1菌株在35℃,pH7.5和油浓度5000mg/L的条件下以及x-3菌株在25℃,pH7.5和油浓度1000mg/L的条件下具有较好的石油降解能力。     

豆荚软珊瑚的次生代谢产物研究(Ⅱ)

从中国南海海域采集的豆荚软珊瑚Lobophytum sp.中分离了3个化合物.经IR,FABMS,NMR等波谱技术,确定它们的化学结构为:(24S)-麦角甾-5-烯-3β,7α-二醇,Δ4,5(E), Δ8,9(E)-鞘胺醇-正十六碳酰胺,(2S,3R,4E,8E)-1-(β-D-吡喃葡萄糖甙)-N-[(R)-2′-羟基-二十碳酰基] -9-甲基-4,8-二烯-1,3-二醇-2-氨基-十八烷,其中第3个化合物为新化合物.     

游离和固定化Synechococcus sp.细胞对铬(Ⅵ)生物吸附性能的比较研究

从pH值、温度及吸附动力学等方面比较研究游离和经海藻酸固定化的微藻Synechococcus sp.细胞生物吸附剂对Cr（VI）的吸附性能. 研究结果表明： 游离细胞吸附剂在较宽的pH值（1～12）范围内稳定, 其表面电位等电点为pH=3;在等电点前（pH〈3）细胞对Cr（VI）吸附明显增强;在等电点后（pH＞3）细胞对Cr（VI）也表现出一定的吸附. 这表明Cr（VI）主要通过静电吸附到细胞上, 吸附的作用点为蛋白质表面的质子化氨基. 游离细胞经海藻酸固定化后, 其表面电位等电点移至pH=2, 但两者的吸附行为相似, 且都与在海藻酸钙上的吸附行为显著不同, 说明固定化细胞对Cr（VI）的吸附主要是游离微藻细胞的作用;Cr（VI）在游离和固定化细胞上的吸附是一个快速的过程, 在其质量浓度低于1 g/L的范围内符合Freundlich吸附等温方程, 在10～50 ℃吸附不受温度影响.     

脂肪酶产生菌的筛选及其脱墨的初步研究

采取油墨污染的土样,通过矿物油富集培养,平板筛选共得到76株菌株.酶活测定表明2株酶活较高,分别为5 446和12 298 U/L.经分类鉴定表明一株属于假单胞菌属(Pseudomonas sp.),一株属于产碱菌属(Alcaligenes sp.).对后者产酶条件进行了研究,结果表明以1%蔗糖为碳源,1%牛肉膏为氮源的液体发酵培养基,起始pH7.0,20 mL装液量,30℃发酵72 h产酶最高.利用酶液对废报纸进行初步脱墨,证实了该酶对采用矿物油为连接料的油墨有明显的分解作用.     

扁担塘两种底栖动物的周年生产量

研究了1996年4月至1997年3月间扁担塘两种底栖动物———幽蚊和圆扁螺的周年生产量,采用体长频率法测算的生产量分别是:幽蚊周年生产量湿质量为0.1419g·m-2·a-1,干质量为0.0114g·m-2·a-1,P/B系数为1.8;圆扁螺的周年生产量带壳湿质量为1.6266g·m-2·a-1,去壳干质量为0.0732g·m-2·a-1,P/B系数为7.1.但与国外数据相比,这些结果比较适中,说明扁担塘并不是幽蚊和圆扁螺的最适生长环境.     

九节属药用植物Psychotria sp.化学成分分析(Ⅰ)

首次对广东九节属植物Psychotria sp.的化学成分进行系统研究,从其甲醇总提取物的乙酸乙酯溶解部分,通过硅胶柱层析得到四个多酚类成分。应用物理常数对照和现代波谱分析技术对其进行结构研究,确定其为:11-O-丁香酰矮地茶素(1)、岩白菜素(2)、没食子酸(3)和没食子酸甲酯(4)。化合物1,2,3,4均首次在此属植物中发现。