广西巴马小型猪不同年龄生殖激素水平的分析

目的探讨广西巴马小型猪不同年龄生殖激素水平。方法利用ELISA酶免疫试剂盒和多功能标记免疫测定系统,对不同年龄的雌雄巴马小型猪血清生殖激素浓度进行测定。结果雄性巴马小型猪血清TESTO、FSH浓度从2月龄到6月龄呈上升趋势,在6月龄时达到最大值(分别为12.2 ng±8.9 ng/mL和64.6 ng±6.1 ng/mL),6月龄后浓度呈下降趋势;血清LH浓度从2月龄到4月龄呈上升趋势,在4月龄时达到最大值(46.8 ng±12.5 ng/mL),4月龄后呈下降趋势。雌性巴马小型猪从2月龄到4月龄,血清FSH、LH、E2浓度都呈现出显著升高趋势,到4月龄时达到最大值(分别为51.9 ng±54.0 ng/mL,23.2 ng±31.6 ng/mL,79.3 pg±93.0 pg/mL),4月龄后又都呈现较明显下降趋势。     

广西巴马小型猪生长期日粮蛋白与能量水平需要的测定

目的本试验对生长期(45~117日龄)的广西巴马小型猪进行了生长饲养实验。方法试验一:选择40头40日龄断奶广西巴马小型猪,按平均体重随机分为四组(10头/组)。在45~80日龄,四个组分别喂以含蛋白质水平为13%、14%、16%、18%的日粮;在81~117日龄,仍以上面的40头广西巴马小型猪为实验材料,分别喂以含蛋白质水平为11%、12%、13%、14%的日粮。试验二:选择40头40日龄断奶广西巴马小型猪,按平均体重随机分为四组(10头/组)。分别喂以日粮1(CP15%、DE12.95 MJ/kg),日粮2(CP15%、DE13.37 MJ/kg),日粮3(CP13%、DE12.95MJ/kg)和日粮4(CP13%、DE13.37MJ/kg)。结果在45~80日龄,上述不同蛋白质含量的日粮对广西巴马小型猪的总增重影响差异不显著(P>0.05);在81~117日龄,蛋白水平为12%、13%、14%的日粮对小型猪的总增重影响差异不显著(P>0.05),但蛋白质水平为11%的日粮组总增重显著低于前面三组(P<0.05)。试验二的结果表明,4种不同能量与蛋白组合的日粮对生长期(45~75日龄)小型猪的总增重影响差异不显著(P>0.05)。结论本实验结果表明广西巴马小型猪生长期(45~117日龄)日粮营养需要水平为粗蛋白12%~13%,消化能12.95 MJ/kg。日喂料量为体重的2.0%~2.25%即可维持广西巴马小型猪的生长期(45~117日龄)较缓慢的生长速度。     

固力本钙离子在广西巴马小型猪中注射效果初探

目的以广西巴马小型猪作为实验动物,探讨固力本钙离子用于静脉注射、肌肉注射和皮下注射的可行性。方法去甲肾上腺素静脉滴注巴马小型猪12次(用量2.0 mg/kg体重);固力本钙离子静脉滴注巴马小型猪和用过去甲肾上腺素的实验猪(1粒钙离子的稀释液分别为100 mL~200 mL的生理盐水、葡萄糖水和蒸馏水);固力本钙离子肌肉注射、皮下注射巴马小型猪(1粒钙离子的稀释液分别为100 mL~200 mL的生理盐水、葡萄糖水和蒸馏水);对照巴马小型猪静脉滴注生理盐水50 mL。结果钙离子静注过程中实验猪大多会表现心率、呼吸减缓,实验猪无异常反应,表现安静;钙离子静注稀释液用蒸馏水较好;以2.3 mg/mL的浓度滴注较合适。静注去甲肾上腺素过程中实验猪心率、呼吸加快,反应激烈;经去甲肾上腺素静注后的巴马小型猪对钙离子静脉注射的反应则完全不同,表现安静。钙离子肌肉注射和皮下注射实验猪均无不良反应。结论通过对巴马小型猪的实验,初步确认固力本钙离子可用于静脉注射、肌肉注射和皮下注射。     

巴马小型猪平板跑步机训练参数的测定

摘要: 目的 探究适于巴马小型猪跑步训练的模式及巴马小型猪跑步机训练参数的测定。方法 选取 9 月龄雄性 去势普通级巴马实验用小型猪 8 头,平均体质量为( 53. 46 ± 2. 52) kg。进行每日 1 次、连续 4 周的跑步训练。跑步 过程中,视巴马小型猪的情况以 0.3 km/h 或其倍数的速度增速,直至巴马小型猪不能耐受时再根据实际情况适当 减速,最终至巴马小型猪不能继续跑动,趴地喘息则停止跑步。测定每日各跑步速度和对应的跑步时间等跑步参 数及跑步前后即时的生命体征。结果 经过 1 周适应性训练后,8 头巴马小型猪均已适应跑步。经过 3 周平稳熟 练跑步训练,其最大跑步速度达 3. 4—7. 5 km/h; 最长跑步持续时间达 1 530 s。巴马小型猪平均跑步持续时间 735. 26 s。巴马小型猪跑步训练模式呈缓慢加速 － 快速加速 － 快速减速 － 缓慢减速。跑步训练后即时耳温、肛温、 收缩压较跑步训练前极显著性升高,心率、呼吸极显著性增快; 经过 3 周跑步训练后,巴马小型猪安静状态下的生 命体征除呼吸频率极显著加快外,余无显著变化。结论 巴马小型猪跑步过程经历缓慢加速期 － 快速加速期 － 快 速减速期 － 缓慢减速期等阶段。结果证明巴马小型猪可适应跑步训练,为其干预方式的扩展提供实验支持．     

性别对小型猪基础麻醉效果的影响

目的探究性别对小型猪基础麻醉效果的影响。方法 30只巴马香猪和24只农大Ⅱ系小型猪,雌雄各半。首剂量200 mg陆眠宁复合10 mg咪达唑仑,于耳后颈部肌注,完成基础麻醉。观察记录动物达到保定效果所用的时间以及追加药物的剂量。结果巴马香猪组,雌性较雄性平均追加30%～50%的首剂量;农大Ⅱ系组,雌性较雄性平均追加50%～100%的首剂量。结论研究表明性别影响小型猪的基础麻醉用药量和麻醉起效时间。加大对雌性个体的麻药剂量,可以缩短麻醉躁动期和手术准备时间。     

餐饮职业对男性精液质量影响分析

目的:探讨餐饮职业与男性精液质量的相关性。方法:对120例不育男性(餐饮工作组75例、非餐饮工作组45例)和90例正常生育男性进行精液参数测定,从精液量、液化时间、精子密度、a级精子百分率、b级精子百分率、a+b级精子百分率、精子活率、精子畸形率等方面进行分析。结果:(1)不育餐饮工作组、不育非餐饮工作组与对照组相比,精子密度、精子活率、a级精子百分率、b级精子百分率、a+b级精子百分率显著降低(P0.05),液化时间及精子畸形率升高(P0.05)。不育餐饮工作组与不育非餐饮工作组相比,精液量、a级精子百分率、a+b级精子百分率、精子活率显著降低(P0.05),精子畸形率显著升高(P0.05)。(2)不育餐饮工作组精子密度、精子活率、a级精子百分率、b级精子百分率、a+b级精子百分率与工作时间之间呈负相关(P0.05);精子畸形率与工作年限之间呈正相关(P0.05)。结论:(1)餐饮职业可引起男性精液质量异常;(2)餐饮职业者工作年限龄对精子质量的影响存在时效关系。     

广西巴马小型猪的培育

目的以广西巴马香猪作为原始基础群,要培育出体型尽量小、两头乌毛色整齐、繁殖性能好、遗传性稳定、有关生物学特性明确、适于实验应用的小型猪品系。方法①纯繁闭锁繁育;②封闭群(A系)主要采用群内随机交配方式;③近交系(B系)是在第10世代封闭群的基础上开始选择近交家系,采用连续全同胞兄妹高度近交方式;④定向选择;⑤遗传监测;⑥饲养试验;⑦广西地方标准的制定;⑧有关生物学特性的研究;⑨实验应用。结果①1994年鉴定专家将培育的实验小型猪命名为"广西巴马小型猪",至今己有22年培育历史。②至2009年完成了广西巴马小型猪封闭群21世代的培育。③至2009年完成了广西巴马小型猪近交系11世代的培育。④对小体型、两头乌毛色的整齐性、多产性的选择及性格温顺的驯养均有效。⑤19个微卫星座位上平均观察等位基因数:17世代广西巴马小型猪封闭群为3.00个,在21个微卫星座位上近交系7世代平均观测等位基因数为1.9048个、平均有效等位基因数为1.5461个,平均基因纯合率为0.7232。⑥确认在广西巴马小型猪生长期间营养需要:蛋白质水平12%、能量3100kcal/kg、钙0.65%、有效磷0.32%。⑦在对质量控制因素研究的基础上制定出广西地方标准DB45/T546-2008《实验动物小型猪》(发布日期:2008.09.08、实施日期:2008.10.08)。⑧国内多家研究机构的应用表明广西巴马小型猪是应用于心血管病和糖尿病等研究的优秀模型动物。结论成功培育出适于医学、生物学实验应用的、具有独特优异特性的广西巴马小型猪封闭群和近交系。     

三个品系实验用小型猪部分血液生化指标比较

目的检测广西巴马小型猪、五指山小型猪和中国农大小型猪三个品系实验用小型猪的血液生化指标并进行比较。方法选用4月龄广西巴马小型猪和中国农大小型猪,5月龄五指山小型猪,用日立-7600型自动生化分析仪检测三个品系小型猪的血液生化指标,对同一品系雌、雄小型猪的测定值及对3个品系小型猪的13项指标进行组间比较。结果三个品系小型猪的血液生化测定值比较接近。在13项检测指标中,广西巴马小型猪的ALT、BUN低于其他两个品系(P<0.05),五指山小型猪的TG高于而ALP低于其他两个品系(P<0.01)。雌雄小型猪之间除广西巴马小型猪的BUN差异有显著性(P<0.05)外,其余各项指标雌雄间差异不显著(P>0.05)。结论同一品系小型猪的大部分血液生化测定值不受性别影响;3个品系小型猪的血液生化测定值接近。     

钼对小鼠生殖毒性研究

为了探讨高剂量钼的生殖毒性作用,选择40只雌性和20只雄性小鼠(60日龄),随机分成4组,每组10只雌性和5只雄性小鼠,分别为空白对照组、低钼组(100 mg/L)、中钼组(200 mg/L)和高钼组(400 mg/L)。试验处理4周后,雌雄合笼饲养,进行生殖毒性试验。记录产仔数,计算分娩率和每胎产仔数。取F1代小鼠,检测雄鼠睾丸细胞微核率、精子畸形率、精子数量、雄鼠卵泡刺激素和睾酮水平,以及雌鼠卵泡刺激素和雌激素水平。试验结果显示:高钼可显著地降低小鼠的繁殖性能,F1代时,高钼组小鼠分娩率显著低于对照组(P<0.01),而F1代雄性小鼠睾丸细胞微核率、精子畸形率显著高于对照组(P<0.01),精子数量、睾酮水平显著低于对照组(P<0.01)。长期高钼暴露对小鼠有一定的生殖毒性。     

广西巴马小型猪 ApoE 基因外显子 2 片段的多态性分析

摘要: 目的 克隆广西巴马小型猪载脂蛋白 E( ApoE) 基因外显子 2 片段并分析该片段的多态性,为建立广西巴马 小型猪动脉粥样硬化模型奠定基础。方法 以广西巴马小型猪基因组 DNA 为模板,PCＲ 扩增 ApoE 基因片段,应 用 PCＲ-SSCP 方法分析其多态性。结果 克隆获得长 237 bp 的 ApoE 基因外显子 2 片段,测序结果比对参考序列同 源性为 100% 。PCＲ-SSCP 分析发现在该片段的 229 位点存在多态性,表现为 AA 型、AT 型和 TT 型 3 种基因型。结 论 成功克隆广西巴马小型猪 ApoE 基因外显子 2 片段,该片段存在多态性,有 AA、AT 和 TT 3 种基因型,基因型频 率分别为 0. 302、0. 489 和 0. 209。     

广西巴马小型猪促生长激素释放激素成熟肽的克隆及序列分析

目的扩增广西巴马小型猪促生长激素释放激素(GHRH),分析其序列结构特点。方法以广西巴马小型猪基因组DNA为模板,用特异性引物扩增GHRH外显子3,再用引物延伸悬挂PCR法扩增GHRH成熟肽,纯化后,连接、转化到大肠杆菌,筛选阳性克隆,测序。结果经测序证实广西巴马小型猪GHRH外显子3及其成熟肽的基因序列与相关文献报道一致。克隆得到的广西巴马小型猪GHRH序列全长为132 bp,其中外显子3基因序列长105bp。同源性比较发现,广西巴马小型猪GHRH外显子3基因序列与GenBank(NCBI)中报到的猪GHRH外显子3相比,同源性为97.14%,有3处发生碱基变化。结论本实验成功克隆了广西巴马小型猪GHRH成熟肽序列。     

广西巴马小型猪生长素(Ghrelin)cDNA的克隆及序列分析

目的扩增广西巴马小型猪生长素(Ghrelin)cDNA序列,分析其序列结构特点,为进一步从分子水平上对广西巴马小型猪的生长发育提供理论依据,也为日后构建原核表达载体、研究Ghrelin基因的生物功能奠定基础。方法以广西巴马小型猪胃底组织总RNA为模板,用特异性引物扩增Ghrelin的cDNA,纯化连接pMD18-T载体后转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆体,鉴定后测序。结果经测序证实克隆得到的广西巴马小型猪Ghrelin cDNA序列全长为357 bp,与相关文献报道一致。同源性比较发现,广西巴马小型猪Ghrelin cDNA基因序列与GenBank报道的猪相应序列同源性为99.7%,只有一处发生碱基突变。结论本实验成功克隆了广西巴马小型猪Ghrelin cDNA。     

广西巴马小型猪肌肉生长抑制素(Myostatin)cDNA克隆和序列分析

目的通过RT-PCR扩增广西巴马小型猪Myostatin cDNA序列,经过连接、转化、克隆测序后,与NCBI中发表的猪Myostatin序列进行同源性比较,分析广西巴马小型猪Myostatin的cDNA序列结构特点及与其他物种间的聚类关系,为日后构建Myostatin高效表达载体及进一步研究Myostatin对广西巴马小型猪肌肉生长的影响奠定基础。方法以广西巴马小型猪的肌肉组织总RNA为模板,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR),利用合成的特异性引物,扩增得到巴马小型猪肌肉生长抑制素(Myostatin)cDNA的全序列。该扩增片段经纯化后,连接到pMD18-T载体上扩增,经一系列鉴定后,测序。结果本实验克隆到巴马小型猪Myostatin基因cDNA序列长度为1128 bp,与GenBank报道的猪Myostatin基因cDNA序列同源性高达99.7%,与人、奶牛、家鼠等物种的cDNA序列间同源性可达到92.3%以上,证明Myostatin基因具有较高的保守性。同时发现广西巴马小型Myostatin基因cDNA序列有三处存在碱基突变,两个为同义突变,一个为错义突变。     

广西巴马小型猪生长激素(pGH)基因全序列克隆及序列分析

目的克隆广西巴马小型猪生长激素(pGH)基因全序列,并与已发表的其它品种猪的生长激素(pGH)基因全序列进行比较,探讨该基因在广西巴马小型猪中可能存在的变异。方法以广西大学巴马小型猪基因组DNA为模板,扩增巴马小型猪生长激素基因的全序列,将该扩增片段亚克隆到pMD18-T载体后测序。再将测序结果在NCBI进行BLAST。结果测序结果证明克隆得到了巴马小型猪GH基因,全长为2 007 bp。同源性比较发现,巴马小型猪GH基因全序列与GenBank中发表的五指山猪、太湖猪及普通猪的GH基因全序列的同源性分别为99.4%、98.3%、93.9%。     

三个品系小型猪静脉糖耐量试验及相关血清生化指标的比较

目的比较三个品系小型猪静脉葡萄糖耐量及血糖相关指标的差异。方法实验用4月龄广西巴马小型猪和贵州小型猪,5月龄五指山猪,在相同饲养条件下进行实验。静脉注射50%葡萄糖进行静脉葡萄糖耐量试验;常规生化方法检测血清血糖;化学发光法检测血清胰岛素;放免法测定HbAlc。结果静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT)中,注糖后10 min血糖达到峰值,贵州小型猪和广西巴马小型猪分别在60 min和90 min时恢复至实验前血糖值。五指山猪在120 min时恢复至注糖前水平,而且在30~90 min各时间点的血糖值高于广西巴马小型猪和贵州小型猪(P<0.05)。三组动物中,贵州小型猪HbA1c含量较高(P>0.05),五指山猪胰岛素水平较低(P<0.01)。三个品系小型猪的空腹血糖和胰岛素敏感指数差异不显著(P>0.05)。结论在IVGTT实验中,三个品系小型猪的血糖下降趋势基本一致,五指山猪有一定特殊性;相关血清生化指标测定值接近。     

反相高效液相色谱法测定PELA微粒中胰岛素含量

为测定PELA微粒中胰岛素含量,建立反相高效液相色谱方法. 以Zorbax300SB-C18高效液相色谱柱分离;检测波长为220 nm;流动相组成为:V(H2O(含φ(TFA)＝0.15%))∶V(CH3CN)＝66∶34;保留时间为4.3 min. 结果在ρ(胰岛素)为10～200 μg/mL范围内,峰面积(A)与胰岛素质量浓度(ρ)成线性变化,其线性方程为:ρ=7.82×10-2A +9.88×10-2,相关系数r=0.999 95. 日内差和日间差分别为0.6%和0.7%. 当ρ(胰岛素)为60, 80和100 μg/mL时的回收率分别为(98.1±0.5)%, (99.6±1.5)%和(99.4±1.0)%(n＝6). 测得胰岛素在PELA微粒中的包封率为(56.3±3.3)%(n＝6).     

松墨天牛的人工饲育技术研究

【目的】 为了获得虫龄整齐、生理状态一致的幼虫及虫体内无松材线虫的成虫,开展了松墨天牛的室内人工饲育技术研究。【方法】 利用自行配制的人工饲料3种配方:A(松树木屑100 g+琼脂40 g+蔗糖20 g+酵母粉12.5 g+安息香酸钠2 g+山梨酸钾1 g+0.5 mol/L H₂SO₄ 10 mL+水800 mL)+B(松树木屑100 g+琼脂40 g+蔗糖20 g+酵母粉12.5 g+安息香酸钠2 g+山梨酸钾1 g+0.5 mol/L H₂SO₄ 10 mL+胆固醇1.5 g+抗坏血酸4 g+酪蛋白20 g+氯化胆碱1 g+水800 mL)+C(松树木屑100 g+琼脂40 g+蔗糖20 g+酵母粉12.5 g+安息香酸钠2 g+山梨酸钾1 g+0.5 mol/L H₂SO₄ 10 mL+麦胚粉25 g+胆固醇1.5 g+抗坏血酸4 g+酪蛋白20 g+氯化胆碱1 g+水800 mL),比较了人工饲料配方对松墨天牛发育历期及生活力的影响。【结果】A、B、C 3种人工饲料饲养的松墨天牛幼虫均可正常生长发育。发现取食配方A的幼虫发育历期平均为(90.6±9.3)d,蛹期为(11.9±1.3)d,化蛹率为6.4%,羽化率为66.7%。化蛹7 d后,雌、雄蛹质量分别为(0.37±0.03)g和(0.30±0.04)g; 羽化7 d后,雌、雄成虫体质量分别为(0.27±0.03)g和(0.21±0.02)g,取食配方B的幼虫发育历期平均为(71.9±4.0)d,蛹期为(12.8±0.7)d,化蛹率为18%,羽化率为75.8%。化蛹7 d后,雌、雄蛹质量分别为(0.33±0.02)g和(0.27±0.03)g; 羽化7 d后,雌、雄成虫体质量分别为(0.29±0.02)g和(0.22±0.03)g,取食配方C的幼虫的发育历期平均为(71.3±2.0)d,蛹期为(11.1±0.3)d,化蛹率为58.3%,羽化率为88.1%。化蛹7 d后,雌、雄蛹质量分别为(0.63±0.03)g和(0.49±0.03)g; 羽化7 d后,雌、雄成虫体质量分别为(0.53±0.03)g和(0.43±0.03)g。【结论】 以取食配方C饲养的天牛幼虫,其发育的各项指标均明显优于以取食配方A和B饲养的天牛。     

发酵青刺果种子的酚类物质组成及抗氧化活性分析

以青刺果种子为研究对象,利用4种不同丝状真菌(少孢根霉3152、米曲霉变种2083、米根霉40503、米根霉3005)分析发酵前后的总酚、总黄酮含量及抗氧化活性的变化.结果表明少孢根霉3152、米曲霉变种2083、米根霉40503这3种真菌发酵均可显著提高其总酚、总黄酮含量,其中米曲霉变种2083发酵48 h后效果最佳(总酚、总黄酮含量分别为750.74±11.33、833.70±3.77 mg/100 g种子干重).发酵前后其含量最高的酚类物质均为芦丁,由67.12±0.69μg/g增加至108.07±0.18μg/g.发酵能改善青刺果种子的抗氧化能力,其中少孢根霉3152发酵48 h清除DPPH·的效果最佳,米曲霉变种2083发酵48 h对ABTS+·的清除最强.发酵可以显著提高青刺果种子的总酚、总黄酮含量以及抗氧化活性,适合作为功能性食品的原料加以开发.