甘草、红景天及黄芪粗提取物对UVB诱导小鼠皮肤慢性光损伤的保护作用

目的研究甘草、红景天和黄芪三种粗提取物对皮肤慢性光损伤的保护作用。方法甘草、红景天和黄芪三种粗提取物局部外用于小鼠背部皮肤后给予UVB辐射,每天1次,连续30天,分别采用TUNEL、ELISA和免疫印迹检测小鼠背部皮肤组织的细胞凋亡指数、TNF-α含量和caspase-8蛋白水平。结果与空白对照组相比,UVB照射组(单纯给予UVB照射)小鼠皮肤中的细胞凋亡指数、TNF-α含量及caspase-8水平均显著增高(P0.05);不同浓度甘草等粗提取物处理后可下调TNF-α、caspase-8表达水平及细胞凋亡指数(P0.05),尤以甘草组明显。结论UVB慢性辐射可诱导皮肤光老化,而甘草、红景天和黄芪三种粗提取物可缓解紫外线引起的皮肤慢性光损伤,其作用机制与抑制炎症因子TNF-α释放、caspase-8表达和细胞凋亡有关。     

腹腔置管引流对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的作用及机制研究

目的探讨腹腔置管引流对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的作用及相关机制。方法 30只健康雄性SD大鼠随机分为假手术组(仅行开腹手术)、SAP组(5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射诱导SAP模型)、APD组(SAP模型基础上行APD干预),每组10只。3组大鼠分别于造模后24h取材,光镜观察胰腺及肺组织病理学变化并评分;检测血液及腹水中淀粉酶、TNF-α、IL-1β含量;取肺组织检测其中TNF-α、IL-1β、NF-κB含量;免疫组化及western blotting检测肺组织中HMGB1蛋白表达情况。结果假手术组大鼠无腹水产生,而SAP组有腹水产生;与假手术组相比,SAP组、APD组血清中的淀粉酶、TNF-α、IL-1β含量明显升高(p0.05);两组肺组织中MPO、MDA、TNF-α、IL-1β、NF-κB含量也明显较假手术组升高(p0.05);免疫组化及western blotting也观察到两组肺组织中HMGB1蛋白表达明显高于假手术组(p0.05);镜下见以上两组胰腺及肺组织损伤程度也较假手术组明显(p0.05)。而与SAP组相比,APD治疗组上述指标均明显降低(p0.05)。结论 APD可通过引流出含大量有害物质的腹水,降低SAP大鼠血液中的炎症水平,减少肺组织中炎症介质的表达,从而减轻SAP大鼠肺损伤。     

单纯及丙泊酚联合电休克对抑郁大鼠海马TNF—α表达的影响

目的探讨单纯电休克及丙泊酚联合电休克对抑郁大鼠电休克治疗效果及海马内TNF-α表达的影响。方法50只成年Wistar大鼠随机分为5组（n=10）：正常对照组（C组）、抑郁组（D组）、单纯丙泊酚组（DP组）、单纯电休克组（E组）、丙泊酚联合电休克组（M组）。C组正常饲养，其余采用经典的慢性不可预见性应激法建立抑郁模型。建模成功后，E组直接行电休克治疗，M组腹腔注射丙泊酚90mg／kg，麻醉产生效应后行电休克治疗，每日进行以上处理1次，连续7日。以Open—field法和糖水消耗实验进行行为学评分。实验完成后处死大鼠，用免疫组化染色法检测TNF—α受体蛋白的表达；ELISA法海马TNF-α的含量，RT-PCR法测海马TNF—α mRNA表达。结果E组和M组大鼠的行为学评分高于D组和DP组，且M组高于E组（P〈0．05）；D组和DP组海马内TNF-α含量以及mRNA的表达高于其它各组（P〈0．05），M组海马内TNF—α含量以及mRNA的表达低于E组（P〈0．05），与C组差异无统计学意义（P〉0．05）；D组和DP组海马区TNF-α受体表达量低于C组（P〈0．05），M组的表达量接近于C组，但高于E组（P〈0．05）。结论慢性应激使大鼠海马内TNF—α含量升高及其受体表达下调，从而产生抑郁症。丙泊酚可以改善电休克抑郁症状可能与进一步下调抑郁大鼠海马内TNF—α的含量和上调其受体表达有关。     

重症急性胰腺炎大鼠肠粘膜免疫屏障功能损伤及早期腹腔引流对其影响的实验研究

目的探讨早期腹腔引流对重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）大鼠肠粘膜免疫屏障功能损伤的影响及作用机制。方法将72只Wistar大鼠随机分为3组：SAP组（A组）、SAP引流组（B组）、假手术对照组（C组）。观察术后12、24h大鼠死亡率，各时相点腹水量。分别予术后的第6、12、24h采集血液、腹水、肠液、肠组织、胰腺标本，冻存以备检测。采用全自动生化分析仪检测血清及腹水淀粉酶活性，ELISA法测定血清及腹水IL-6、TNF—a浓度，胰腺组织冰冻切片HE染色观察病理变化，ELISA法检测肠液sIgA水平，肠组织作CIM＋T淋巴细胞免疫组化染色。结果分别于术后6、12、24h，通过各项指标的检测，有以下发现：①术后同时相点A、B两组大鼠血清及腹水淀粉酶、IL-6．TNF-α水平均显著高于C组大鼠水平，且术后同时相点A、B两组大鼠胰腺组织水肿及出血坏死程度均较C组大鼠显著加重。②对肠液sIgA的检测发现，术后各时相点A、B两组大鼠均显著低于C组大鼠水平。且A、B两组大鼠肠组织中CIM＋T淋巴细胞浸润程度也均显著低于C组。③术后同时相点B组大鼠血清及腹水淀粉酶、IL-6、TNBa水平均显著低于A组大鼠水平；B组大鼠胰腺组织水肿及出血坏死程度较A组明显减轻。④术后同时相点B组肠液sIgA水平显著高于A组水平；且B组肠组织中CIM＋T淋巴细胞浸润程度较A组显著增加。结论SAP发病早期，通过腹腔置管引流将富含诸如IL-6、TNF-α等炎性因子的腹水引流出体外，对肠粘膜免疫屏障功能起到显著的保护作用。     

解聚复肾宁对糖尿病肾病大鼠TNF—OL、MCP-1的影响

目的观察解聚复肾宁（Jiejufushenning，JJFSN）对糖尿病（Diabetes mellitus，DM）大鼠肾组织肿瘤坏死因子-α（Tumorneerosisfactor-alpha，TNF-α）、单核细胞趋化蛋白-1（Monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1）和血清TNF-α的影响，探讨其肾保护作用机制。方法腹腔注射链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）建立SD大鼠DM模型，将成模DM大鼠随机分为3组：DM模型组（B组）、JJFSN组（C组）、厄贝沙坦（Irbesartan）组（D组），另设正常对照组（A组）。采用相应干预措施处理12周。常规方法测定12周末各组大鼠空腹血糖（FBG）、血尿素氮（BUN）、血肌酐（Scr）、肾重／体重（KW／BW）、24h尿蛋白（24huFro）；放免法测血清TNF-α含量：免疫组织化学方法测肾组织TNF—Ot、MCP-1的表达；PAS染色评估细胞外基质；电镜观察肾组织超微结构改变。结果与A组相比．B组大鼠FBG、BUN、Scr、KW／BW、24huPro及血清TNF-α升高（P〈0．05），肾组织TNF—Ot、MCP-1表达明显增高（P〈0．05）；肾组织超微结构明显异常；C组和D组上述指标显著改善（P〈0．05），肾组织超微结构异常改善。结论竹FSN能延缓DM大鼠肾损害进程，其机制可能与抑制TNF-α、MCP-1上调有关。     

胃转流术对2型糖尿病大鼠肾脏氧化应激及蛋白激酶C活性的影响

目的观察胃转流术对2型糖尿病大鼠肾脏氧化应激及蛋白激酶C(PKC)活性的影响。方法40只SD大鼠随机分为正常对照组(8只),糖尿病模型组(32只),模型组注射STZ(35 mg/kg),血糖稳定后确定成模30只,再将其分为糖尿病对照组(8只),假手术组(8只),手术组(14只)。术后8周检测各组大鼠空腹血糖、肾重指数(肾重/体重)、尿素氮(BuN)、血肌酐(Cr),测定各组大鼠肾组织总超氧化物歧化酶(TSOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSHPX)活性,脂质过氧化代谢产物丙二醛(MDA)含量及PKC的活性,HE染色观察肾组织病理变化。结果与糖尿病对照组和假手术组相比,手术组能明显降低空腹血糖、改善肾重指数、BUN、Cr等指标(P0.05),同时肾组织抗氧化酶TSOD、GSH-PX活性增强,MDA含量减少,肾脏PKC活性降低(PO.05)。HE染色显示手术组病变也明显轻于糖尿病对照组和假手术组。结论胃转流术可能通过抑制2型糖尿病大鼠肾脏氧化应激及PKC活性增强发挥肾脏保护作用。     

茶多酚对裸鼠喉鳞癌的抑制作用及机制研究

目的观察萘多酚对裸鼠喉鳞癌的抑制作用，并初步探讨其机制。方法将接种Hep22细胞后的裸鼠随机分为4组，其中对照组8只，每天给予生理盐水1ml灌胃；茶多酚高、中、低剂量组各8只，每天分莉给予茶多酚80、160、320mg／kg。20d后处死。分离肿瘤测量其体积，real—time RT—PCR法检测肿癌组织中Src、HK Ⅱ mRNA的表这。己糖激酶活性测定试剂盒测定肿瘤组织中己糖激酶活性。结果茶多酚能硬显降低肿瘤体积，降低肿瘤组织中Src、HK Ⅱ mRNA的表达和己糖激酶活性。结论茶多酚能抑制裸鼠喉鳞癌的生长，其机制可能与抑制肿瘤糖酵解有关。     

内源性硫化氢与皮质发育障碍模型大鼠认知功能损害的相关性研究。

目的探讨皮质发育障碍DCDs（disorders of cortical development）模型鼠的认知功能与H2s的变化关系。方法用1射线照射孕15d Wistar大鼠，制作DCDs模型。采用Morris水迷宫法测试P30（出生后30天）、P60、P90F1代DCDs模型鼠和对照组大鼠的学习能力和空间记忆能力。用敏感硫电极法检测大鼠血液及海马组织中H2s浓度。用亚甲基蓝法测定大鼠海马神经元细胞胱硫醚，B-合酶CBS（cystathionine。beta-synthase）酶活性。结果水迷宫实验：P60、P90模型组大鼠较正常对照组潜伏期明显延长（P〈0．05），且随月龄增加潜伏期越长。P60、P90模型纽大鼠较对照组血液也s浓度分别降低6．5、11．5μmol,／L、海马组织H2s含量分别减少3．2、5．6μLmol／L．mg，海马组织神经元细胞CBS酶活性降低24．94、34．46μmol／L．g．min。P30模型组与对照组的各项变化不明显。结论DCDs模型鼠脑内H，S含量及海马组织神经元细胞CBS酶活性降低，内源性H2s降低与DCDs认知功能损害可能具有相关性，并为治疗皮质发育障碍的认知功能损害可能提供治疗途径。     

氧化酪蛋白对小鼠组织抗氧化能力及血液肽组成的影响

目的研究酪蛋白经过加热氧化和脂质过氧化物MDA氧化后，对小鼠体内氧化还原状态及小鼠血液中肽组成的影响。方法酪蛋白经100℃加热（0、30、60、90min）和丙二醛（MDA）氧化（MDA终浓度0、0．2、20、200mmol／L）处理，测定其羰基、巯基含量及表面疏水性的变化。小鼠分为四组，分别灌胃生理盐水、正常酪蛋白、加热90rain、MDA氧化酪蛋白，测定0、30、60、90、120、160min血液中自由基水平，并采用HPLC-MS分析灌胃后120min小鼠血浆肽组分的变化，测定小鼠的肝脏、空肠、十二指肠组织抗氧化能力指标（总抗氧化能力T—AOC、丙二醛MDA、还原型谷胱甘肽GSH）。结果酪蛋白经过两种氧化处理，羰基含量均随氧化程度呈显著上升，巯基含量呈下降趋势。加热氧化后酪蛋白表面疏水性比正常酪蛋白低，而MDA氧化导致疏水性上升。小鼠血液中自由基最高峰出现在灌胃后160min。灌胃两种方式处理的酪蛋白，血液中自由基的含量均显著高于灌胃正常酪蛋白组（P〈0．05），肝脏、空肠、十二指肠还原型谷胱甘肽（GSH）含量和总抗氧化能力（T-AOC）均低于正常酪蛋白组，丙二醛（MDA）含量显著提高（P〈0．05）。HPLC—MS分析显示，灌胃MDA氧化酪蛋白组血液中肽组成与对照组不同，出现c7H15N4O含羰基类的物质：结论氧化会导致酪蛋白理化性质的改变，摄入氧化酪蛋白引起机体的氧化应激，降低组织抗氧化能力。     

噬菌体D29的免疫原性及安全性评价

目的对噬菌体D29的免疫原性及安全性进行评价。方法将BALB／C小鼠随机分为噬菌体D29滴鼻暴露组（剂量9×10^8PFU）、噬菌体D29皮下注射组（剂量9×10^8PFU），phagebuffer滴鼻组、phagebuffer皮下注射组、生理盐水滴鼻组、生理盐水皮下注射组、空白对照组，每组动物第一周第一天、第三天暴露一次，以后每周第一天暴露一次，共暴露6周。观察暴露期间噬菌体中和抗体的动态变化、暴露6周后血清中IL-2、IL-4、IL-12、IFN-1、TNF-α和NO的含量及CD4／CD8比例变化，小鼠碳粒廓清率变化、在饲养过程中各组动物的进食量以及活动、体重、生存情况，以及暴露结束后解剖取得脏器作病理学比较。结果D29滴鼻暴露组在第7天即产生低效价的中和抗体，第14天抗体效价下降，第28天之后不能检测到中和抗体，D29皮下注射组中和抗体从第7天开始产生，第21天上升，之后趋于稳定，其余组均无中和抗体产生。各组小鼠血清中细胞因子、CIM／CD8比例、碳粒廓清率以及饲养过程中各组动物的进食量以及活动、体重、生存情况均无明显差异。病理学上各实验组脏器除脾脏外均有轻微充血、水肿表现。结论D29具有抗原特性，可刺激机体产生中和抗体，但不会对机体的安全产生威胁。     

参附动员内皮祖细胞改善肝移植大鼠缺血再灌注损伤

目的 观察参附注射液对发生肝移植缺血再灌注损伤(IRI)的大鼠外周血中内源性内皮祖细胞(EPCs)的作用以及此作用对其肝脏功能的影响.方法 100只雌性SD大鼠随机分为3组:原位肝移植(0LT)+参附(SF)组,OLT对照组,假手术组.3组均于术后第1、4、7天取血液标本流式细胞术检测外周血内皮祖细胞数量及生化分析仪检测肝功能,观察胆汁分泌量,并取肝组织标本进行HE染色形态学观察肝脏损伤.结果 OLT+ SF组外周血中的EPCs在术后1天开始增加,第4天达到高峰并持续至第7天;并且在3个时间点上,OLT+ SF组的外周血EPCs数量较其它两组明显增加,具有统计学意义(p ＜0.01);OLT+ SF组在用药后IRI有所改善,较对照组有统计学差异(p＜0.05).结论 参附注射液能显著动员大鼠骨髓中的内源性EPCs进入外周血,修复损伤的肝血窦,改善微循环,进而改善肝移植术后的缺血再灌注损伤.     

国产无机三氧化物聚合物的免疫相容性研究

目的 以细胞因子（肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β）为研究对象,对国产无机三氧化物聚合物（MTA）介导的炎症反应进行相关的免疫学评价.方法 运用双抗夹心ELISA检测新材料国产MTA引起体外小鼠的单核巨噬细胞系RAW264.7细胞TNF-a和IL-1β的变化.结果 未经脂多糖诱导的RAW264.7细胞与阳性材料接触后,TNF-α和IL-1β的表达均高于阴性材料,差异均有显著性意义（P〈0.05）;国产MTA组和进口MTA组TNF-α和lL-1β的表达与阴性材料比较差异无显著性意义（P〉0.05）;经脂多糖诱导的RAW264.7细胞与阳性材料、国产MTA、进口MTA接触后,TNF-a和IL-1β的表达均高于阴性材料,差异均有显著性差异（P〈0.01）.结论 国产MTA具有良好的生物相容性.     

Morphine eye-drops reduce homatropine induced mydriasis in man

Summary In 7 healthy volunteers 4% morphine eye-drops, when administered to one eye, caused a miosis limited to that eye. In 7 other healthy volunteers morphine was administered into one eye after bilateral instillation of 0.5% homatropine opthalmic drops; the eye treated with morphine and homatropine showed a mydriasis less intense than the other eye treated only with homatropine. It is suggested that topical morphine locally affects sympathetic function by inhibiting noradrenaline release into the iris neuromuscular junction.This work was partly supported by the CNR study group Pain Control. The authors wish to thank Dr Tendi of the Pharmacy of St. Maria Nuova Hospital, Florence, for the preparation of the eye-drops.     

成年大鼠脊髓损伤后内源性神经前体细胞的增殖与分化规律的研究

目的观察成年大鼠脊髓损伤后内源性神经前体细胞的增殖与分化,探讨内源性神经前体细胞的自然变化规律。方法制作脊髓压迫损伤模型,Brdu腹腔注射标记神经前体细胞,免疫荧光法(Immunofluoreseence)检测大鼠脊髓Brdu、GFAP、MBP阳性细胞数的变化。结果 1)正常组可观察到少量Brdu阳性细胞,脊髓损伤后Brdu阳性细胞显著增加(p0.05),并在第7天达到最大值,21天时仍高水平表达。2)正常组可见少量Brdu/GFAP和Brdu/MBP阳性细胞,脊髓损伤后Brdu/GFAP,Brdu/MBP双标阳性细胞数显著增加(p0.05)。结论脊髓损伤后神经前体细胞的数量在第7天达到最大值,我们认为,一周内可能是神经前体细胞增殖分化调控的关键时期。此外,新生星形胶质细胞和少突胶质细胞大量增殖,并与神经前体细胞的迁移、后肢功能恢复表现出一定的同步性,提示新生胶质细胞可能参与了脊髓损伤后神经功能的修复作用。     

Bioavailability of progesterone enhanced by intranasal spraying

Summary The bioavailability of progesterone (P) in terms of area under time-concentration curve and maximal concentration in the serum and cerebrospinal fluid was studied in adult ovariectomized rhesus monkeys following the administration of P as a nasal spray, i.v. or i.m. injections, nasal or eye drops. The bioavailability of P in both the body fluids was found to be considerably higher following its being sprayed intranasally.This work was supported by the World Health Organization, Geneva.     

急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠模型的建立

目的探讨建立适合实验研究需要的急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠模型。方法64只雄性sD大鼠，随机分成空气对照组（AC组）和模型组（CO组），每纽32只。采用静态吸入式染毒，选取染毒后3、7、14、28d为时相点，应用Morris水迷宫实验检测平均潜伏期等学习记忆能力，Tunel法检测海马回神经元凋亡。结果CO组大鼠较AC组平均潜伏期延长（F=35．93，P〈0．01），海马回神经元凋亡指数增高（P〈0．01）。结论本实验成功建立了可行性较高的急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠模型，为进一步研究其发病机制和防治方法提供比较好的基础。     

Human adenosine deaminases ADA1 and ADA2 bind to different subsets of immune cells

At sites of inflammation and tumor growth, the local concentration of extracellular adenosine rapidly increases and plays a role in controlling the immune responses of nearby cells. Adenosine deaminases ADA1 and ADA2 (ADAs) decrease the level of adenosine by converting it to inosine, which serves as a negative feedback mechanism. Mutations in the genes encoding ADAs lead to impaired immune function, which suggests a crucial role for ADAs in immune system regulation. It is not clear why humans and other mammals possess two enzymes with adenosine deaminase activity. Here, we found that ADA2 binds to neutrophils, monocytes, NK cells and B cells that do not express CD26, a receptor for ADA1. Moreover, the analysis of CD4+ T-cell subset revealed that ADA2 specifically binds to regulatory T cells expressing CD39 and lacking the receptor for ADA1. Also, it was found that ADA1 binds to CD16? monocytes, while CD16+ monocytes preferably bind ADA2. A study of the blood samples from ADA2-deficient patients showed a dramatic reduction in the number of lymphocyte subsets and an increased concentration of TNF-α in plasma. Our results suggest the existence of a new mechanism, where the activation and survival of immune cells is regulated through the activities of ADA2 or ADA1 anchored to the cell surface.