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相似文献
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1.
A novel, homogeneous and sensitive assay for the detection of single nucleotide polymorphisms (SNPs) by integration of rolling circle amplification (RCA) and cationic conjugated polymer (CCP) has been developed and tested. Mutant DNA serves as the template for specifically circularizing a padlock probe (PLP) with a sequence that is complementary to the mutant DNA. Afterwards, the mutant DNA directly acts as the primer to initiate the RCA reaction in the presence of phi29 DNA polymerase that generates a long, tandem single-strand DNA product. During the RCA reaction, fluorescein-labeled dUTPs are incorporated into the RCA products. When the CCP is introduced, efficient FRET from CCP to fluorescein occurs as a result of the strong electrostatic interactions between the CCP and the DNA produced by RCA. The wild-type DNA contains a single base mismatch with PLP with the result that the PLP is not circularized, RCA is not triggered and inefficient FRET results. By measuring the change of the emission intensities of CCP and fluorescein, it was possible to detect the SNP in a homogeneous manner. The method is sensitive and specific enough to detect 0.1 pmol/L mutant DNA and to determine a mutant allele frequency as low as 2.0%.  相似文献   

2.
The mutation detections of KRAS and BRAF genes are of significant importance to predict the responses to anti-cancer therapy and develop new drugs. In this paper, we developed a multi-step fluorescence resonance energy transfer (FRET) assay for multiplex detection of KRAS and BRAF mutations using cationic conjugated polymers (CCP). The newly established detection system could detect as low as 2% mutant DNAs in DNA admixtures. By triggering the emission intensity change of CCP and the dyes labeled in the DNA, four possible statuses (three mutations and one wildtype) can be differentiated in one extension reaction. The detection efficiency of this new method in clinical molecular diagnosis was validated by determining KRAS and BRAF mutations of 51 formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) ovary tissue samples. Furthermore, the result of the CCP-based multi-step FRET assay can be directly visualized under UV light so that no expensive instruments and technical expertise are needed. Thus, the assay provides a sensitive, reliable, cost-effective and simple method for the detection of disease-related gene mutations.  相似文献   

3.
室内实验结果表明 ,阳离子聚合物与阴离子聚合物 (部分水解聚丙烯酰胺 )发生反应可产生稳定的絮状沉淀 ,完全反应时阳、阴离子聚合物的质量比为 30∶1;当絮状沉淀的浓度较高时 ,它具有很好的携砂能力 ,絮状沉淀可使岩心的渗透率降低 88%以上 ,且具有良好的抗冲刷能力。矿场试验表明 ,采用此种阳离子聚合物对产出液中阴离子聚合物浓度高的油井进行封堵 ,具有明显的增油、降水效果。  相似文献   

4.
聚合物驱后期阳离子聚合物堵聚可行性研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
室内实验结果表明,阳离子聚合物与阴离子聚合物(部分水解聚丙烯酰胺)发生反应可产生稳定的絮状沉淀,完全反应时阳、阴离子聚合物的质量比为30:1;当絮状沉淀的浓度较高时,它具有很好的携砂能力,絮状沉淀可使岩心的渗透率降低88%以上,且具有良好的抗冲刷能力。矿场试验表明,采用此种阳离子聚合物对产出液中阴离子聚合物浓度高的油井进行封堵,具有明显的增油、降水效果。  相似文献   

5.
以红薯淀粉为原料进行化学改性,合成了一种阳离子型高分子絮凝剂F4,并考察了各因素对合成的影响.研究结果表明,接枝共聚的最佳合成条件为:淀粉5g,引发剂0.35g,丙烯酰胺10g,反应温度50℃,反应时间3h.阳离子化条件为:氢氧化钠0.08g,阳离子醚化剂3g,反应温度70℃,反应时间2h.  相似文献   

6.
天然改性阳离子絮凝剂制备及性能研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
介绍了以玉米芯为母体,以阳离子醚化剂为改性剂,合成阳离子型改性讷发子絮凝剂CNPF的方法,并对该絮凝剂的性能进行了研究,通过正交实验选择最佳条件,反应温度50℃、时间3h。配料比:0.03mol阳离子试剂/5g玉米芯粉。同时以高岭土悬浊液为絮凝效果考察体系,探讨了CNPF的絮凝性能。结果表明,CNPF絮凝效果优于6水氯化铝,在实际应用中,对粘土污水体系的处理表明,CNPF具有良好的抗干扰能力。  相似文献   

7.
阳离子聚合物处理油田采油污水研究   总被引:7,自引:2,他引:7  
为了使油田含油污水处理后能达到回用标准,通过阳离子聚合物与聚合铝复配对油田采油污水处理进行了研究.结果表明聚合物分子量为120万,加入浓度为0.5~1.0mg/L时,与聚合铝复配后,对采油污水中的悬浮物、含油量及CODcr的去除率分别达到99.7%,97.7%及92.0%,并使处理后水中悬浮物及含油量分别降低到1.2mg/L及5.0mg/L,达到了油田回用水水质标准.复配体系对含油污水的处理效果受污水pH值及温度的影响,但影响比单独使用聚合铝时小.  相似文献   

8.
为了得到一种新型高效的聚合物太阳能电池材料,通过Stille聚合反应合成了一种以噻唑并噻唑为电子受体单元和硅基联噻吩为电子给体单元的交替共轭聚合物(PTTz-Si)。这种聚合物具有较窄的光学带隙(1.77 eV)、较高的热稳定性以及比较宽泛的紫外可见吸收光谱,其良好的溶解性保证了可以通过溶液加工制备成有机太阳能电池器件,是一种潜在的聚合物太阳能电池活性层供体材料。通过核磁共振氢谱、碳谱、热重分析、紫外可见吸收光谱、凝胶渗透色谱和电化学等测试方法对该聚合物进行了表征,并且将聚合物与PC71 CM共混制备聚合物太阳能电池器件,获取0.76%的光电转化效率。  相似文献   

9.
10.
Redesign of the coenzyme specificity of a dehydrogenase by protein engineering   总被引:61,自引:0,他引:61  
N S Scrutton  A Berry  R N Perham 《Nature》1990,343(6253):38-43
Directed mutagenesis and molecular modelling have been used to identify a set of amino-acid side chains in glutathione reductase that confer specificity for the coenzyme NADP+. Systematic replacement of these amino acids, all of which occur in a 'fingerprint' structural motif in the NADP+-binding domain, leaves the substrate specificity unchanged but converts the enzyme into one displaying a marked preference for the coenzyme NAD+.  相似文献   

11.
中原油田是一个多层系、多油藏类型的复杂断块油田 ,部分区块储层中黏土特别是膨胀性黏土含量高 ,对注入水水质的要求较高 .本文对阳离子聚合物与聚合铝复配处理中原油田采油污水进行了研究 ,结果表明 :当聚合铝浓度为 5 0 mg/L时 ,阳离子聚合物的分子量、加入浓度、污水的 p H值、污水温度等对处理效果影响大 ,当阳离子聚合物的黏均分子量为 1 2 0万、加入浓度 3~ 5 mg/L、污水的 p H值为 6.5~ 8.5、污水温度在 45℃时 ,中原油田采油一厂采油污水中悬浮物、油的含量分别由处理前的 1 65 mg/L,1 1 8mg/L降低到 1 .2 mg/L及 5 .0 mg/L ,滤膜系数达到 35  相似文献   

12.
阴、阳离子聚合物交替注入用于注聚区封窜和调剖   总被引:3,自引:0,他引:3  
胜利孤岛油田注聚区块过早见聚,为封堵聚合物从油井窜流产出和调整注聚剖面,研制出阳离子调剖剂NCP。室内试验结果表明,向用1000mg/L的HPAM驱油后的岩心中注入1.5×10~4~3.0×104mg/L的NCP1.0PV,在70℃恒温24h后的堵油率大于96%,突破压力梯度2.6~3.3MPa/m。注入2.0×10~4mg/L NCP溶液的岩心,连续注入50PV含800mg/LHPAM的地层水,水相渗透率持续下降;在岩心试验中,堵水率随NCP浓度的增大而增大。结果表明:NCP可用于注聚区块调整注聚剖面,在孤岛注聚区进行的5井次封窜试验中,3口井收到良好效果。  相似文献   

13.
14.
运用密度泛函理论(DFT)B3LYP方法,研究了2,5-呋喃乙烯撑齐聚物(PFV)(n=1~x)的结构、能隙与光谱性质.结果表明,随着n值的递增齐聚物的结构没有明显变化,用聚合物的中间链段结构来描述整个高分子聚合物的结构是可行的.在所得基态几何构型基础上,用TD-DFT方法计算得到能隙和吸收光谱的最大波长,同时用线性外推的方法进行研究,即利用计算得到的低聚物能隙、最大吸收波长与聚合度n的线性关系,以低聚物的性质的变化对n-1做图,外推至n-1=0,得到高聚物的性质,并得到了一系列线性关系曲线.  相似文献   

15.
介绍悬浮扩散共聚法制备球对称聚合物GRIN(梯度折射率)微型透镜的过程,对所制样品折射率分布应用剪切干涉法进行了测量,测量精度较高,为进一步制作理想折射率分布的微球透镜提供了实验依据.结果表明,所制透镜已经具有较好的折射率梯度,接近抛物线型分布.对扩散过程作了定性分析,提出了改善悬浮扩散共聚条件的一些建议.  相似文献   

16.
17.
应用色霉素A3(Chromomycin A3,CMA)荧光素显带技术,得到了清晰的文旦柚(Citrus grandis[L.]Osb)染色体构成类型:土佐文旦(Tosa—Buntan Pummelo)为1A+1B+5C+2D+9E;水晶文旦(Sisho-Buntan Pummelo)为3A+3C+3D+9E.对杂交F1代38株文旦柚的染色体组进行了观察,发现了共13种染色体构成类型.荧光素显带技术对染色体构成多样性的高度识别,可成为植物配子体形成过程中的减数分裂、基因重组等机理分析的有效方法.  相似文献   

18.
针对无线传感器网络数据聚合存在的数据时延增加与节省能耗这一矛盾,提出了一种综合考虑节点剩余能量与数据时延、支持QoS的分布式数据聚合策略,各个节点依据其他数据经由该节点转发的概率与能耗情况,自主地决定是否成为聚合节点,仿真结果表明,QoS算法在网络的生命周期,数据时延和抗毁性方面均优于经典的LEACH和PE-GASIS算法。  相似文献   

19.
20.
本文介绍了一种电子显微镜荧光屏的制作方法,实践表明该方法简单有效、切实可行,能彻底解决荧光粉因电子束长时间照射而老化所造成的荧光屏亮度低、反差小的问题.  相似文献   

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