应用ELISA法检测自制LAB kit的性能

标记亲和素-生物素试验盒(LAB kit)是一种灵敏度高、特异性强的新颖试剂,应用于酶联吸附剂测定(ELISA)检测时灵敏度可达到或超过放射免疫测定的水平。本文简要报道自     

脊髓与脑干及丘脑下部的联系——辣根过氧化物酶顺、逆行法研究

近年来用辣根过氧化物酶(HRP)法新发现了一些脊髓与脑之间的联系。我们将HRP注射于猫脊髓中后,也看见了一些以往未被描述或未充分描述的联系。HRP法通常用作逆行标记,也有少量路途较近的顺行研究。我们发现HRP顺行研究也适用于某些脊髓上行系统,而且可作长途追踪。HRP法顺、逆行法的结合特别有利于研究两核团间的往返联系。     

硒(Ⅳ)-碘化物-罗丹明B体系荧光猝灭反应测定痕量硒

我们曾研究硒(Ⅳ)与碘化物和罗丹明B(RhB)的显色反应并用于硒的测定。虽然它是目前光度测定硒最灵敏的方法之一,但对于某些生物或环境样品中痕量硒的测定,灵敏度仍显不足。 进一步研究发现,当I_3~-与罗丹明B形成离子缔合物时,罗丹明B溶液的荧光明显猝灭。在一定的条件下荧光猝灭值与硒(Ⅳ)的浓度成正比。此反应具有极高的灵敏度,测定下限比相应的吸光光度法低两个数量级,可以直接测定μg/L级的硒,方法简便快速,用于水、人发和某些食品中痕量硒(Ⅳ)的测定,得到满意的结果。     

EB病毒诱导DNA酶的检定用于鼻咽癌早期发现的初步研究

通过检查病人血清以达到早期发现癌瘤的目的,是目前肿瘤防治研究中的重要方向之一。由于Epstein-Barr病毒(EBV)经常伴随于鼻咽癌(NPC)中,通过检测血清中抗EBV某些抗体,可以作为NPC早期诊断的重要参考,目前测定抗病毒壳抗原(Virus capsid antigen)的免疫球蛋白A抗体(VCA-IgA)已较广泛地用于NPC的早期发现,然而,酶学测定法用     

酶联免疫吸附试验检测胰岛素的研究

自放射免疫检测法(RIA)用于检测胰岛素以来,胰岛素的实验性研究和临床检测有了很大的进展。但RIA长期大量应用,其放射性同位素不仅对检测者自身具有危害,且对自然环境亦造成污染。70年代初,Engvall建立酶联免疫吸附试验(Enzyme Linked ImmunosorbentAssay,ELISA)用于检测体内微量抗原与抗体,Miedema将ELISA法应用于检测胰岛素。但目前ELISA检测胰岛素的方法,尚存在操作繁琐,流程费时或试剂不易得到等问题。我们以辣根过氧化物酶标记胰岛素抗血清,采用ELISA夹心法,用聚苯乙烯微板的小孔作为载体,进行检测胰岛素的研究,并与RIA法对比,取得较为满意的结果。现报告如下。     

以4-(2-吡啶偶氮)-间苯二酚、过氧化氢分光光度法测定微量的钒(Ⅴ)

以过氧化氢法测定钒是比较普遍的,但灵敏度极低(ε=320-350)。Hartkamp曾用过氧化氢、吡啶-2,6-二羧酸测定钒,灵敏度稍有提高(ε==456)。Martinez等用过氧化氢、EEDTA(或EGTA)测定钒,灵敏度亦很低,故应用于实际测定,这些方法仍有困难。本研究拟借形成混合型络合物的途径,来提高方法的灵敏度及选择性,以便能准确、快速地测定合金及矿石中微量的钒。 Pollard在研究金属离子与4-(2-吡啶偶氮)-间苯二酚(PAR)反应时,曾提及其与钒反应的可能     

蟾蜍视顶盖与峡核之间的相互区域对应投射

本文用辣根过氧化物酶(HRP)法研究了中华大蟾蜍(Bufo bufo gargartizans)视顶盖与峡核之间的神经投射,并对HRP标记顶盖和峡核细胞进行分类。将手术后的蟾蜍固定在立体定位仪里,分别在53只动物顶盖表层和13只的峡核不同位点电泳注入HRP(Sigma Ⅵ),每只动物一个注射点。动物存活2—8天(16—20℃)后,用HRP组织化学法显     

是太阳系的元素丰度反常吗?

1873年高尔基方法的问世标帜着现代神经解剖学的开始,它所显示的中枢树突构筑一直是神经科学的基石,以霍乱毒素结合HRP(CT-HRP)或类霍乱原结合HRP(CB-HRP)逆行标记神经元,发现了多处传统高尔基方法及麦芽凝集素结合HRP(WG-HRP)所不能显示的树突构筑,我们称之为“嫌高尔基树突”(GBD)。目前已发现大鼠的GBD有:     

模拟过氧化物酶催化荧光反应的研究——CV-H_2O_2-Mn~Ⅲ-T(4-TAP)P

随着仿生学和生物无机化学的发展,天然酶的模拟工作越来越受到重视,因为模拟酶不仅成本低,而且稳定性好。日本Yutaka Saito等人曾合成MnTPPS_4络合物,替代过氧化物酶作为催化剂用于酚和胺类化合物的氧化显色反应。对Guilbault等人提出的过氧化物酶催化H_2O_2氧化高香草酸的荧光反应,我们曾从底物角度进行研究。本文依据过氧化物酶的活性中心结构,合成了一种金属卟啉化合物,四(4-三甲铵基苯)卟啉和锰的络合物Mn~Ⅲ-T(4-TAP)P,用于模拟辣根过氧化物酶(HRP),催化H_2O_2氧化佳味醇的氧化偶联反应,     

用AChE和HRP相结合的方法对大白鼠上涎核的定位研究

关于大白鼠上涎核在中枢内的定位,Shute等人(1960)曾用显示乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase AChE)的组织化学方法(以下简称AChE方法)加以研究。他们追踪支配颌下腺和舌下腺的中间神经(nervus intermedius)的纤维走向,认为此核位于面神经膝喙端的外侧和内侧。近年来,又有几位作者用辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase HRP)逆行追踪法(以下简称HRP方法)研究表明:该核位于脑桥尾端至延髓前端网状结构的外侧,和Shute等人的结果不一致。为了更进一步澄清这问题,本工作将AChE方法和HRP方法结合起来,对大白鼠上涎核神经元的形态特征和该核在中枢内的定位作进一步观察。     

双峰双波长分光光度法测定水中的铅

目前我国环境地表水和污水中铅的测定方法,常用的分光光度法主要以二硫棕萃取法为主,该法选择性不高,灵敏度低,使用剧毒氰化物作掩蔽剂,且操作繁琐。文章在铅与二甲酚橙在溶液形成紫1∶1的红色配合物而建立的光度法基础上进行改进,研究了一种双峰双波长测定铅的新方法,与单波长光度法相比其灵敏度显著增加。该法已用于水样中铅含量的直接测定,结果令人满意。     

微孔板化学发光免疫分析法检测人血清中三碘甲状腺原氨酸

建立了一种定量人血清中三碘甲状腺原氨酸(T₃)的化学发光免疫分析方法, 使用辣根过氧化物酶(HRP)标记T₃抗原, HRP催化鲁米诺-过氧化氢化学发光为检测体系. 对几种影响因素, 如包被抗体、酶标物的滴度进行选择, 对温育及检测时间等进行优化. 进行了方法学评价: 灵敏度为0.07 ng/mL; 批内和批间变异均小于10%; 回收率在80%~90%之间; 与结构相似物T₄及rT₃均无明显交叉. 使用本方法与现有的发光试剂盒进行比对, 相关性良好, 相关系数为0.9547.     

大鼠脾淋巴细胞金属硫蛋白基因的诱导表达及其与核骨架的关系

金属硫蛋白(metallothionein,MT)是一类低分子量(约6.5kD)富含半胱氨酸的金属结合蛋白。虽然现已发现MT广泛存在于哺乳动物多种组织中,但目前多采用组织匀浆提取MT后借助有关生化手段进行检测。潘爱华和陈吉龙对MT在大鼠几种组织细胞中的确切定位进行了研究。Onosaka等测定表明人脾脏中含有MT,对于MT在脾中的确切定位仍不清楚。此外,引人注目的是MT基因的诱导性,即在重金属或糖皮质激素等因素的诱导     

化学发光法测定超氧化物歧化酶的动力学研究

超氧化物自由基(■)可自动歧化为O_2和H_2O_2,但在超氧化物歧化酶(SOD)的催化下,其反应速度可增加4～5个数量级。由于O(?)很不稳定,在SOD的动力学研究中,常采用脉冲射解等直接法,但后者需要昂贵的仪器设备,故不适合于一般应用。很多间接法尚不能取代直接法,应用于动力学研究。化学发光法灵敏度虽高,专一性虽强,但和很多间接法一样,也     

电化学免疫测定法进展

在人类与疾病作斗争的漫长过程中,随着医学、生物学与化学等相关学科的发展,免疫学已成为医学科学的一个重要分支,在医学理论和临床医学中都显示出重要的作用。近十几年来,免疫化学和免疫生物化学发展异常迅速。建立在抗体-抗原特异复合作用和生物化学基础上的免疫测定法(immunoassay)也有了长足的进步。放射免疫法、荧光免疫法及酶联免疫吸附法在免疫化学研究及医学检验中的应用日益受到重视。但上述方法或因精度及灵敏度不符合要求,或因操作步骤复杂及设备昂贵而未能被普遍采用。因而     

聚甲基丙烯酸甲酯单层LB膜微结构的原子力显微镜观测

聚甲基丙烯酸甲酯(polymethy(methacrylate),PMMA)作为电子束刻蚀中抗蚀层材料,由于其灵敏度低而分辨率高在亚微米以至纳米刻蚀中获得了大量应用.但目前通常所用旋涂、喷涂等方法得到的抗蚀层在数十纳米厚度下存在均匀性差、多孔洞等缺陷,为此,Pease等人提出采用Langmuir-blodgett(LB)技术制备的抗蚀层可有效地解决这些问题.然而,使     

79Se的加速器质谱方法测定研究

加速器质谱方法广泛用于测定~(10)Be,~(14)C,~(26)Al,~(36)Cl,~(41)Ca和~(129)I等长寿命同位素,应用在地学、环境科学、考古学和生物医学等领域.近年来由于~(79)Se在生物医学和环境科学中的潜在应用,利用加速器质谱方法测定~(79)Se受到关注,而首先注意到的是~(79)Se半衰期的不确定,过去文献中发表的值范围为10~3～10~6a.Se是人体中的重要微量元素之一,当含量过高被看作有毒性,而过低时,又同一些疾病,例如我国东北地区的克山病和大骨病相联系.为研究Se在生物体中的动力学过程,生物化学和硒的化合物的新陈代谢,对利用~(79)Se作为同位素示踪剂十分感兴趣.此外,~(79)Se是核废物中的裂变产物之一,它对环境的影响也正在研究.加速器质谱法被建议用于测定~(79)Se,但由于同量异位素~(79)Br的干扰,测定~(79)Se有着相当大的困难.目前加速器质谱学的同量异位素鉴别除利用一些同位素,如~(14)N,~(26)Mg,~(36)Ar,~(129)Xe负离子的不稳定或不形成的特性外,主要是依靠能量损失率法,但这种方法要求粒子的能量足够高,对于原子序数z≤20,要求能量达到1～2MeV/每核子,而对于z>30,则要求达到2 MeV/每核子以上,即要求将粒子加速到150MeV,这对现有大多数加速器质谱计是达不到的.本工作为了测定~(79)Se的半衰期,首次利用加速     

一种高分子闪烁体的初步研究

利用闪烁体设计的闪烁计数器和闪烁能谱仪用处广泛,因此,对闪烁体的研究颇为重要。 目前所使用的闪烁体基本上是无机和有机化合物。无机闪烁体有碘化钠(铊)晶体、硫化锌(银)等;有机闪烁体有蒽晶体、联三苯、噁唑环类等。即使目前广泛使用的塑料闪烁体,它的发光物质仍是有机化合物,高分子化合物仅起到基质的作用。作为高分手闪烁体至今未见文     

霉乱毒素(CT)等与辣根过氧化物酶(HRP)之结合体标记神经元的灵敏性及时程特征

七十年代出现的HRP轴浆运输标记法对神经解剖学作出了重要贡献。但神经元对“单纯HRP”(FHRP)只是作非特异性的吞饮,胞浆溶酶体随即将其分解,因而大大限制了其逆行、顺行传送标记的灵敏性。应用细胞膜上各种受体对某些植物凝集素或细菌毒素有特异性结合的原理,我们以六种植物凝集素和二种细菌毒素分别同HRP相结合,来提     

金属离子对嵌有H~+-ATP酶脂酶体的流动性及酶活性的影响

前曾报道,猪心线粒体H~+-ATP酶用胆酸盐透析法嵌入大豆磷脂脂质体形成脂酶体——L·(H~+-ATP酶)时,透析介质中含有lmMMg~(2+)能降低L·(H~+-ATP酶)的流动性,提高重建H~+-ATP酶的活性。圆二色性光谱测定也表明,L·(H~+-ATP酶)_(+Mg~(2+))较L·(H~+-ATP酶)_(-Mg~(2+))的α-螺旋含量约高26％,因而推测Mg~(2+)的作用很可能是通过影响L·(H~-ATP