PEG-磷酸盐双水相体系纯化Cu.Zn-SOD研究

利用聚乙二醇（PEG）与磷酸盐的合理配比组成的双水相体系能够使猪血超氧化物歧化酶（SOD）粗酶得到进一步纯化,研究结果表明,6％PEG-6000与24％磷酸盐（pH7,0）组成的双水相体系一次成相萃取,使猪血SOD粗酶的纯度提高3-5倍,活力回收70～95％,而且发现SOD在PEG／磷酸盐双水相体系中的分配行为有一定规律,使用双水相处理粗酶能有效、快速、大量使样品达到一定纯度．     

亲水有机相/含盐水体系萃取L-赖氨酸

以乙醇、磷酸氢二钾和水形成亲水有机相／含盐水体系．用该体系萃取分离L-赖氨酸,实验考察其可能性和影响因素．结果表明,赖氨酸在该体系的分配系数K,随体系成相磷酸二氢钾浓度的增加而减小,随体系pH值的增大而增大,而添加NaCl带来的影响却很小．该体系在ωk2HPO4=0．25,ωc2H5OH=0．20和pH=13时,赖氨酸的分配系数K可达12．8．这为赖氨酸的分离和精制提供了一种新可能。     

玉米根细胞正面向外和内翻外质膜囊泡的分离

利用水双相分配分离法从玉米根细胞提取原生质膜囊泡。其质膜成分特异的K~+,Mg~(2+)—ATP酶活性比膜粗提液高1.67倍。其他细胞器标记酶活性在质膜组分中很低或没有。特异染色电镜形态学定量统计表明质膜组分中90％以上是质膜囊泡。去污剂刺激ATP酶活性实验证明,约92％囊泡是正面向外的。应用此法也证明NAD(P)H—氧化酶可能是跨膜存在的,其催化Fe~(3+)还原的位点可能在膜的内侧。应用高盐冻—融法并结合水双相分配分离法处理正面向外囊泡,可获得内翻外质膜囊泡,实验证明它不仅纯度高而且封闭。     

水平并联管系统中两相流流量分配特性的可视性研究

在空气－水试验台上，对分配集箱入口装设加速管和不装设加速管的水平Ｕ型和Ｚ型集箱系统的两相流流量的分配特性进行了可视性研究．研究发现，水平并联管系统中的两相流流量分配与分配集箱内的流动状况有关；在分配集箱入口装设加速管后，两相流量分配特性有很大改善．     

岩浆演化过程中稀土元素分配及模拟计算——以某地英闪质火成岩体为例

本文根据稀土元素组份在固液两相体系中的分配规律,应用定量模式模拟稀土元素在岩浆体系中的分配行为,以相似性系数最大和方差最小为准则,利用计算机求解岩浆演化过程的不同参数;并以河北迁安地区英闪质侵入岩体为例进行模拟计算,其结果表明,此方法对揭示岩浆形成和演化具有意义。     

两相被动补偿脉冲发电机的电流脉冲波形调节

基于两相被动补偿脉冲发电机计及转速变化时的电枢电流耦合电路仿真模型,提出了通过改变两相正交电枢绕组间的匝数分配以调节电流脉冲波形的方法,对驱动常规电热化学炮的脉冲电流波形进行了仿真．结果表明,与两相等匝正交电枢绕组被动补偿脉冲发电机相比,输出脉冲电流波形具有更大的灵活性,适合作为电热化学炮的脉冲电源．     

用液—固萃取体系从啤酒酵母粗提液中分离经葡糖— …

在一定条件下,二温８０的磷酸盐水溶液可分成聚合物固相和盐水相。酶、蛋白质等生物活性物质可在两相间进行分配。实验结果表明,吐温８０浓度和溶液ｐＨ的变化,以及提高盐浓度均会改变生物酶及蛋白质在两相中的分配。选择合适的条件,酶和蛋白质可获得分离,酶活力也得到纯化。研究了吐温８０浓度、盐浓度和溶液ｐＨ对啤酒酵母粗提液中葡糖－６－磷酸脱氢酶分配的影响。结果表明,选择吐温８０浓度１５％,总盐浓度３．０ｇ（Ｋ２     

高中实验化学中硫酸亚铁铵制备的最佳条件研究

探究了新课改高中实验化学中硫酸亚铁铵制备过程中的试剂用量（硫酸和硫酸铵）对产品产量和纯度的影响。实验结果表明：制备硫酸亚铁铵的原料Fe和H2SO4的物质的量比控制在0．6-0．8的范围内生成的产品的产率和纯度都较高;原料（NH4）2SO4与Fe的物质的量比控制在1．1-0．9之间其产品产量和纯度较高。综合考虑产量和纯度,其最佳试剂量为：n（Fe）／n（H2SO4）在0．7左右,n[（NH）4SO4]／n（Fe）在1.0左右,在此条件下,铁的转化率达到97．3％,产品中硫酸亚铁铵的纯度为98．3％。     

β-巯基乙醇与PVP在红干椒DNA提取中的比较研究

红干椒叶片中富含的酚类物质较多，为提取适于红干椒RAPD分析的高质量DNA，通过在CTAB提取缓冲液中分别添加β-巯基乙醇和PVP抗氧化剂，研究β-巯基乙醇和PVP对红干椒叶片DNA提取质量的影响．结果证明，在CTAB提取液中添加适量的β-巯基乙醇所获DNA纯度较高，A260／A280比值在1．800附近，电泳谱带清晰，无明显拖尾现象，辣椒叶片DNA平均产量为505．83ng·μl^-1，DNA的质量和纯度满足于RAPD技术的要求．     

Pb_2SnO_4的新型合成方法

首次分别在ＳｎＣｌ４－Ｐｂ（ＮＯ３）２－ＮａＯＨ－Ｈ２Ｏ和ＰｂＡｃ２－Ｎａ２ＳｎＯ３－ＮａＯＨ－Ｈ２Ｏ两个水热体系中一步合成了四方锡酸铅（Ｐｂ２ＳｎＯ４）晶体,条件温和,方法简单,易控,节能,ＸＲＤ和ＳＥＭ结果表明产物为单晶,相纯度高且形貌完美．     

甘草水通道蛋白基因（GuPIP1）RNAi双元表达载体的构建及鉴定

植物水通道蛋白（Aquaporins,AQPs）是细胞膜上选择性高效转运水分子的特异蛋白孔道．本文根据植物中hpRNA（hairpinRNA）的原理,以甘草质膜水通道蛋白基因GuPIP1为靶基因,在GuPIP1-cDNA序列中选择378bp作为构建RNAi的序列,经三次亚克隆,最后形成含GuPIP1-hpRNAi表达盒的双元表达载体,并转入农杆菌EHA105．     

衰老大鼠学习行为与海马突触相关蛋白表达的研究

研究衰老大鼠的学习行为与海马内突触相关蛋白的表达．运用Y-迷宫方法对幼年对照组（断乳期）和老年期（22月龄）雄性Sprague—Dawley大鼠进行Y-迷宫空间学习记忆行为训练,之后利用免疫组化和Western blot方法检测2组大鼠海马内突触素（synaptophysin,Syn）、生长相关蛋白（GAP-43）的表达情况．研究结果：（1）2组相比,老年组的学习能力较强,幼年对照组记忆能力较强（P〈0．05）;（2）生长相关蛋白GAP-43在老年组海马内的表达显著高于幼年对照组;而突触素的表达低于幼年对照组（P〈0．01）．提示,GAP-43和突触素可能参与大鼠空间分辨学习记忆的过程,老年大鼠的中枢神经系统保持着潜在的神经元退化修复的功能．     

15-KETE对大鼠肺动脉平滑肌细胞上ERK1／2活性的影响

目的从细胞分子水平上研究15-酮基二十碳四烯酸（15-ketoeicosatetretraenoicacid,15-KETE）对大鼠肺动脉平滑肌细胞上ERKl／2的活性的影响。方法通过酶法分离、培养SD大鼠肺动脉平滑肌细胞（pulmonaryarterialsmoothcells,PASMCs）,使用Westernblot技术观察15-KETE对大鼠PASMCs上ERKl／2活性的影响。结果1）10～mol／L15-KETE作用从0．5h到24h与对照组（未加15-KETE）比较,对ERKl／2总量没有明显的影响。2）与对照组比较,15-KETE处理0．5、1．0、2．0、4．0、8．0h明显增强P—ERKl／2（P〈0．05）。3）与对照组比较,10、10^-7和10～mol／L15-KETE明显增强p-ERKl／2（P〈0．05）,随15-KETE浓度增大,p-ERKl／2增多。4）与15-KETE作用比较,ERKI／2抑制剂PD9805920μmol／L、50txmol／L和U01260．1txmol／L、1btmol／L均能抑制15-KETE对ERKl／2的活化（P〈0．05）,并且随着抑制剂浓度增大,抑制作用加强。结论15-KETE对大鼠肺动脉血管平滑肌细胞上的ERKl／2表达没有明显的影响,但能激活肺动脉血管平滑肌细胞ERKI／2．使其磷酸化,并呈时间一剂量依赖关系。ERKl／2通路的特异性抑制剂PD98059、U0126能抑制15-KETE对ERKl／2的磷酸化。     

人红细胞膜固定相在抗人胸腺细胞免疫球蛋白生产中的应用

为了建立一种兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白生产中抗红细胞杂抗体的去除方法,收集人红细胞,裂解收集红细胞膜,以硅胶为载体,将人红细胞膜固定在其表面制备成红细胞膜固定相,用人红细胞膜固定相吸附兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白中抗红细胞杂抗体并测定其使用效率。结果表明,用人红细胞膜固定相吸附杂抗体,兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白总收率从2979mg／L提高至3607mg／L,进行t检验,P〈0．01,具显著性差异,并且人红细胞膜固定相重复使用15次保持81．8％的活性,具有良好的应用前景。     

产气井内气液两相流流量测量方法

针对大庆油田气井内广泛存在的气液两相流流量测量问题,提出了伞集流式涡轮流量计与电导传感器组合的气液两相流流量测量方法,并采集了104组不同流动工况下气液两相流的涡轮和电导波动信号．采用从电导波动信号中提取的吸引子形态特征量对伞集流后测量通道内的气液两相流流型进行辨识,取得了较好的流型分类效果．在总流量为0．1～2．5m^3／h、含水率为0．04～0．97范围内,基于气液两相流涡轮波动信号建立了总流量测量模型,预测总流量绝对平均相对误差为7．9％．从电导传感器测取的波动信号提取了与相含率有关的时频域特征量,通过支持向量机软测量模型实现了含水率预测,预测含水率绝对平均误差为0．038．研究结果表明,采用伞集流涡轮流量计与电导传感器组合可以较好地测量气液两相流流量和相含率．     

乙腈-NaCl-H2O双水相萃取ICP-AES测定食盐中的铜和铅

研究了乙腈-NaCl-H2O双水相体系的分相条件及在吡咯烷二硫代氨基甲酸铵(APDC)做络合剂时对铜和铅的萃取行为,并结合电感耦合等离子体原子发射光谱仪(ICP-AES)建立了一种测定食盐中铜和铅的方法.该方法在萃取Cu和Pb的同时去除了大量的NaCl基体,从而在ICP-AES测定食盐中痕量Cu、Pb时,去除了高盐的基体干扰.实验中铜和铅的平均回收率分别可以达到106.0%和96.2%,RSD为0.76%和0.83%,计算得出检出限分别为5.0×10-4mg.kg-1和2.3×10-2mg.kg-1,结果令人满意.该方法为高盐样品中金属离子的检测提供了一种新思路.     

复方中草药添加剂对银香鸡生长性能及免疫功能的影响

选用黄芪、党参、当归、枸杞子、刺五加、山楂和甘草7种补益类中草药作饲料添加剂,添加到银香雏鸡日粮中进行饲养试验,以研究复方中草药添加剂对银香鸡生长性能和免疫机能的影响。试验各组基础日粮相同,试验组添加1%中草药,抗生素对照组添加50mg/kg杆菌肽梓,空白对照组只是基础日粮。试验测定试验鸡体重、增重及免疫器官相对重,于3周龄时接种新城疫疫苗检测血清抗新城疫抗体效价评价中草药添加剂的免疫促进作用。结果表明,6周龄试验组鸡体重和增重与抗生素对照组体重和增重相比差异不显著(P0.05),与空白对照组体重和增重相比差异显著(P0.05),复方中草药添加剂与抗生素具有同样的促生长作用;试验组脾脏和法氏囊相对重,血清抗新城疫抗体效价都显著高于对照组,复方中草药饲料添加剂对银香鸡有免疫促进作用。     

毛葱的镉吸收积累及亚细胞分布特征

采用营养液培养法、亚细胞组分差速分离技术和电感耦合等离子体发射光谱技术(ICP-AES),研究不同浓度Cd2+(1、10、100μmol/L)胁迫下,毛葱幼苗不同部位Cd、Fe、Mn、Cu、Zn等金属元素吸收积累的特点,以及根和叶中Cd的亚细胞分布状况.结果表明:(1)随着营养液中Cd2+浓度的增加,毛葱根、茎、叶各器官中Cd的含量均显著增加,Cd主要集中在根部,向地上部分的运输量很少;(2)Cd的吸收积累改变了根、茎、叶中Fe、Mn、Cu、Zn等矿质元素的含量;(3)叶和根各亚细胞组分中Cd的含量为:细胞壁组分细胞质可溶性组分细胞核、叶绿体组分线粒体组分;(4)随着营养液中Cd2+浓度的增加,细胞壁和细胞质组分中Cd增加的幅度远远大于线粒体、细胞核和叶绿体组分,Cd在细胞壁和细胞质组分中的分配比例呈上升趋势,在线粒体、细胞核及叶绿体中的比例呈下降趋势.这说明植物吸收的Cd主要积累在根部,细胞水平上,多数的Cd被细胞壁沉淀螯合和液泡区室化,避免了Cd对新陈代谢旺盛的亚细胞组分的影响.     

pBK-CMV⊿-EGFP-SNAT2质粒载体构建及其表达鉴定

SNAT2是SLC38基因家族编码的Na＋偶联中性氨基酸转运蛋白中属于systemA的成员之一．它在谷氨酸一谷氨酰胺循环、肝脏糖质新生等生物通路中发挥重要作用．增强型绿色荧光蛋白EGFP的连接对于SNAT2在细胞表达中的定位以及检测都有很大的帮助．采用PCR扩增和酶切技术将EGFP连接到质粒pBK-CMV△-SNAT2中SNAT2的N端．通过酶切后琼脂糖凝胶电泳和测序验证得到pBK-CMV△-EGFP—SNAT2质粒载体,将构建好的质粒瞬时转染进人胚肾细胞（HEK293cells）用Westernblot和激光共聚焦电子显微镜检测EGFP-SNAT2的表达与亚细胞定位．结果表明：EGFP．SNAT2在细胞中正确表达并定位于细胞膜上．pBK．CMV么．EGFP．SNAT2质粒载体的构建对于进一步研究SNAT2的结构和功能具有重要意义．     

密云水库沉积物中重金属元素分布及形态研究

主要研究了北京市密云水库沉积物中重金属的总量以及形态分布特征,采用风险评价准则法(RAC)和Tucker3模型探讨沉积物中重金属的潜在危害性.结果表明,各重金属元素的平均含量都超过北京市土壤背景值,重金属元素有一定的富集.Cu有机结合态约占总量的3%～68%;Mn可交换态、碳酸盐结合态约占总量的1%～18%、7%～31%;Pb、Zn的铁锰氧化物结合态分别占总量的12%～53%、4%～27%;其它重金属均以铁锰氧化物结合态和残渣态为主,平均含量占总量的80%以上.根据RAC法得出,Mn(除采样点18)处于中等风险甚至高风险等级;Pb、Zn、Cu属从低风险到中等风险级;Ni、V、Cr、Ti的潜在生态风险较低.该结论将为北京市密云水库保护、人体健康安全保护措施的制定提供科学依据.