小菜蛾Plutella xylostella羧酸酯酶、酰胺酶及乙酰胆碱酯酶的研究

研究结果表明,小菜蛾(Plutella xylostella)乙酰胆碱酶、酰胺酶的最适pH值分别为8.0和8.5。pH值对闳酸酯酶活力影响较小,酰胺酶和羧酸酯酶反应速度在反应开始60钟内,仍在线性范围,乙酰胆碱酯酶反应速度在反应开始的8分钟内呈线性关系。羧酸酯酶、酰胺酶和乙酰胆碱酯酶的Vmax分别为551.81(nmol/mg,mln)、5.25×10~(-4)(μmol/mg.min)和20.36(nmol/mg.min);km分别为5.52×10~(-5)(mol)、1.18×10~(-3)(mol)和8.33×10~(-3)(mol)。     

小菜蛾对几种药剂的敏感性测定

该试验测定结果表明小菜蛾对氧化乐果的敏感性显著降低，降低约20倍，CL50为1445mg/L，说明对氧化乐果已产生了抗性，而小菜蛾对功夫菊敏感度只降低2－3倍，其LC50为4．29mg/L，说明对功夫菊酯刚开始形成抗性。     

中华稻蝗山西晋源种群乙酰胆碱酯酶生化特性研究

对中华稻蝗山西晋源种群五龄若虫和成虫进行了马拉硫磷敏感性的生物测定，同时对若虫和成虫的乙酰胆碱酯酶（ACHE）特性进行了比较研究，生物测定结果表明，晋源种群若虫的LD50值（4．94μg／g虫重）是成虫（2．44μg/g虫重）的2．02倍；有机磷抑制剂对该种群若虫和成虫的AChE的体外抑制研究表明，晋源成虫AChE对氧化毒死蜱、对氧磷、甲基内吸磷的敏感性比晋源若虫分别高1．39、1．34和1．24倍．乙酰胆碱酯酶动力学研究结果表明，若虫动力学参数Km值和Vmax值均较成虫为高；用乙酰硫代胆碱（ATC）做底物测定AChE活性，若虫AChE活性是成虫的1．22倍．中华稻蝗晋源种群若虫对有机磷抑制剂敏感性下降可能与其AChE活性的增高有关，而成虫与若虫之间AChE活性的差异可能与不同阶段虫体对马拉硫磷选择压力的差异有关。     

乙酰胆碱酯酶膜的酶学性质及其对有机磷农药的检测效果

测定自行制备的乙酰胆碱酯酶(AChE)酶液和壳聚糖-AChE酶膜的酶学性质,并以壳聚糖-AChE酶膜分别检测乐果、甲胺磷、敌百虫、敌敌畏、甲基对硫磷5种有机磷农药,探讨采取酶膜进行快速检测有机磷农药残留的可行性.结果显示:壳聚糖-AChE酶膜的KappM为2.8×10-4mol/L,最适pH值为8.0,在pH值为8.0～8.5时活力稳定;最适反应温度为45℃左右,在15～60℃时较为稳定;半衰期达12d,固定化酶膜的实际应用性能较游离酶有较大改善.壳聚糖-AChE酶膜对不同类型的有机磷农药的敏感性差异很大,对甲基对硫磷最为敏感,其pI50为5.57,对其它4种农药pI50为4.0左右;以酶活力抑制率16%为农药检出标准,甲基对硫磷的检出限为0.4mmg/L,其他4种检出限为3～22mg/L,只有甲基对硫磷达到检测要求.     

乙酰胆碱酯酶壳聚糖膜的制备研究

以新鲜母鸡血为材料,30%～70%(V/V)乙醇分步沉淀制备粗酶制剂,再经DEAE-Cellulose与Sephadex G-75 柱层析,部分纯化鸡红细胞乙酰胆碱酯酶(AChE),再以壳聚糖制备成膜作为载体,采用吸附-交联法固定AChE制备壳聚糖酶膜,分别考察制备壳聚糖酶膜的壳聚糖浓度(0、0.05、0.1、0.15、0.2g/ml),壳聚糖酶膜的吸附时间(2、4、6、8、10、12h)和吸附温度(0、4、25、30、37℃),以及戊二醛质量浓度(0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%),戊二醛交联时间(40、80、120、160、1200min),戊二醛交联温度(0、4、25、37℃)和给酶量(0～2000U/ml)对壳聚糖酶膜固定化效果的影响.结果显示,鸡红细胞AChE粗酶制剂的部分纯化倍数为12倍时,活力回收34.1%.优化的固定化条件是以0.1g/ml壳聚糖溶液制备载体膜,采用950 U/ml的酶液(蛋白质含量为 0.43 mg/ml),在4℃下吸附10 h,再以质量浓度为0.6%的戊二醛溶液4℃下交联2h.此条件下制备的酶膜活力达11.5 U/cm2,活力回收达 30%.     

凝胶法固定乙酰胆碱酯酶的研究

以海藻酸钠为载体包埋固定乙酰胆碱酯酶(AChE),考察了影响酶固定化的重要因素,获得了最佳固定化条件。实验结果表明,将1U乙酰胆碱酯酶,2μLφ(戊二醛)为5%的戊二醛,1μL10g/L的牛血清白蛋白(BSA),与30g/L的海藻酸钠配成300μL的酶溶液,滴入20g/L的氯化钙溶液中,3℃下固定8h,制备的凝胶酶珠机械强度高,活力重现性好。在20g/L的氯化钙溶液中3℃下保存40d,活力基本不变,相对标准偏差为5.53%～6.82%。     

农药靶标乙酰胆碱酯酶的分离纯化及性质研究

采用了Sephadex G-25层析,DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析和Sephacryl S-200凝胶过滤层析,对家蚕头部粗酶匀浆液中的乙酰胆碱酯酶进行纯化,得到的样品经聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）和SDS-PAGE检测均为一条带,用SDS-PAGE法测得其分子量为77.8 kDa.酶的最适反应温度为37 ℃,最适pH为7.5,对底物碘化硫代乙酰胆碱(ATChI)的Km值为0.392 mmol/L,最适底物浓度为1.6 mmol/L,在1.6 mmol/L底物浓度以上观察     

吡虫啉对小菜蛾阿维菌素药剂敏感性影响的研究

取食农药吡虫啉后，小菜蛾对阿维菌素的敏感性会随着取食量差异而受到影响。1．8％阿维菌素对小菜蛾的LC50浓度稀释倍数（Y1）与20％吡虫啉浓度稀释倍数（X）之间存在显著的线性相关关系，函数式为：Y1=14205—1248．8ln（X）；而20％吡虫啉处理过的小菜蛾羧酸酯酶比活力（Y2）与20％吡虫啉浓度稀释倍数（X）之间的线性相关关系函数式为：Y2=-0．0804＋0．0196ln（x）。     

蚯蚓乙酰胆碱酯酶的分离与固定化试验研究

从蚯蚓中提取乙酰胆碱脂酶,通过硫酸铵盐析,离子交换层析等方法获得了较纯的胆碱酯酶,并对其部分性质进行测定.分别采用鸡蛋膜固定化法,活化载体-共价结合法和戊二醛交联法进行酶的固定.结果表明:蚯蚓体内乙酰胆碱酯酶含量较低,且纯化过程中损失较大,结果欠佳;活化载体-共价结合法固定得到的乙酰胆碱酯酶酶膜活性高,酶不易损失,重现性好.为建立快速的痕量有机磷类的酶法分析方法奠定了基础.     

小菜蛾对毒死蜱的抗性与饲养温度关系的研究(Ⅰ.不同饲养温度下的小菜蛾对毒死蜱敏感性的变化)

不同饲养温度下的小菜蛾 3龄幼虫对毒死蜱的敏感性发生了变化。在 10 - 30℃范围内 ,低温饲养的小菜蛾比高温饲养的小菜蛾更为敏感。但是变温条件下饲养的小菜蛾 3龄幼虫经 5℃处理温度后 ,对毒死蜱的敏感性减弱 ,甚至较 35℃恒温下饲养的小菜蛾的敏感性更低。     

饲养温度对小菜蛾(Plutella xylostella)AchE和CarE活力的影响

在湿度定义为干、湿球温度差为3℃、光照强度10000—12000lx、光照周期14L：10D条件下，探索饲养温度（X：24—36℃）之变化对小菜蛾（Plutella xylostella）4龄幼虫乙酰胆碱酯酶（Ache）和羧酸酯酶（CarE）活力（Y）的影响效应。实验结果表明，活力指数随着饲养温度的升高而降低，两者之间存在显著的线性相关关系：温度与乙酰胆碱酯酶（AchE）活力两者间的相关关系函数式为Y=0．3327—0．0068X；与羧酸酯酶（CarE）活力的为Y=3．1278—0．0780X。     

小菜蛾抗药性研究进展

小菜蛾作为各种十字花科蔬菜的重要害虫，对多种有机氯、有机磷、氨基甲酸酯；拟除虫菊酯、苯甲酰脲类昆虫生长调节剂、农用抗生素甚至植物源杀虫剂都产生了不同程度的抗药性。本文就小菜蛾的抗药性的形成与发展、杀虫剂之间的交互抗性、抗性的生理生化机制以及分子、遗传机制等方面研究进展进行了论述。     

杀虫剂对小菜蛾种群的控制作用

通过室内饲养与田间系统调查，应用生命表方法研究了５ 种杀虫剂对小菜蛾种群的控制作用，结果表明：对小菜蛾种群控制作用效果最好的杀虫剂是１ ．８ ％ 集琦虫螨克，其干扰作用控制指数为０．１５４；其次为：菜蛾敌粉剂、１ ％ 农哈哈、２．５％ 功夫和４５ ％ 马拉硫磷，其干扰作用控制指数分别为０ ．１９５ 、０ ．２０７ 、０ ．３０２ 和０．３５９ ．     

小菜蛾对定虫隆的抗性选育和增效剂的作用

用定虫隆对小菜蛾进行抗性选育,结果表明:F1~5仍属敏感状态,F6的敏感性已下降,F7~10达到低水平抗性,F11~13达中等水平抗性。从F14开始停止汰选,无毒饲养到F20,具有明显的抗性衰退现象。以对定虫隆具有不同抗性水平的小菜蛾种群测定3种增效剂对定虫隆的增效作用,结果表明:对F0代,TPP对定虫隆是负增效作用或几乎没有增效作用,SV 1和PBO对定虫隆均有一定的增效作用;对F13代和F20代,3种增效剂均有增效作用,但以SV 1和PBO的增效作用更明显,最高增效倍数分别为24.26和13.79;增效剂的比例不同,增效的幅度也不同,质量比为5∶1的混配增效作用比3∶1的更明显,增效倍数随小菜蛾对定虫隆抗性水平的提高而增加。     

天葵块根提取物对菜青虫、小菜蛾生长发育的影响

采用浸渍叶碟法研究天葵块根提取物对菜青虫、小菜蛾生长发育的影响.结果表明,天葵块根提取物对菜青虫、小菜蛾具有明显的生长发育抑制作用,800mg/L对菜青虫、小菜蛾的生长发育抑制率分别为67.18%,68.31%.该提取物对菜青虫、小菜蛾生长发育抑制IC_(50)分别为389mg/L,251mg/L,对试虫的体重增加也有显著影响,处理组的平均体重增加值显著低于对照.     

天葵几种粗提物对菜青虫、小菜蛾的拒食活性筛选

本文研究报道了天葵几种粗提物对菜青虫、小菜蛾的拒食活性筛选。经石油醚、氯仿、丙酮粗提物的拒食活性比较,结果表明石油醚粗提物的拒食效果较好,石油醚粗提物经进一步分离得油状和结晶粗提物,二者经拒食活性比较,结果表明石油醚油状粗提物的活性较强。     

改进CTAB法快速大量提取小菜蛾幼虫基因组DNA

报道了一种为大量快速提取小菜蛾幼虫基因组DNA而改进的CTAB(溴代十六烷基三甲胺)法。研究结果表明,该方法比较简单、经济、有效,提取的基因组DNA完全能够满足PCR等分子生物学的研究分析。     

天葵石油醚油状粗提物对菜青虫、小菜蛾的拒食活性研究

研究报道了石油醚油状粗提物对菜青虫、小菜蛾的拒食作用。结果表明石油醚油状粗提物具有明显的拒食活性,对菜青虫、小菜蛾幼虫的选择性拒食作用中浓度AFC50分别为1.51mg/mL、1.82mg/mL;非选择性拒食作用中浓度AFC50分别为1.94mg/mL、4.78mg/mL。8mg/mL处理后24h对试虫的选择性拒食率分别为89.17%、82.41%;非选择性拒食率分别为75.68%、67.05%。     

Synthesis and assessment of attractiveness and mating disruption efficacy of sex pheromone microcapsules for the diamondback moth,Plutella xylostella （L.）

Microcapsules of sex pheromone of the diamondback moth （DBM）, Plutella xylostella （Lepidoptera： Plutellidae） were synthesized through complex coacervation using gelatin and gum arabic as wall-forming materials. The encapsulated pheromone released from these microcapsules into the air was monitored over six weeks in the field. Results of a field trial show that the attractiveness of microcapsules was superior to that of rubber septa loaded with the same amount of pheromone. The mating disruption efficiency of the pheromone treatment was estimated through comparing numbers of moths captured in pheromone-baited traps placed in pheromone treatment fields and pesticide treatment fields. The estimated mating disruption efficiency of the pheromone treatments ranged from 76.94% to 98.67% during the season. This study shows that pheromone microcapsules might provide a new method for P. xylostella control.