猪卵母细胞生长成熟过程中脂质成份的研究

本实验应用Ｃａｔａｌａｎ及Ｌｉｌｌｉｅ氏油红Ｏ染色法和Ｂａｋｅｒ氏酸性氧化苏木精染色法，对猪卵母细胞生长成熟过程中脂质成份的改变情况进行了染色研究，把生长卵泡按其直径：０．８～２．４ｍｍ（Ｓ组）、２．５～４ｍｍ（Ｍ组）、＞４ｍｍ（Ｌ组）分为三组，分别取其中的卵母细胞进行染色观察．另外，还作了卵巢冰冻切片的染色观察．结果表明，在卵泡腔形成之前的猪卵母细胞中就含有大量的脂滴，在卵泡形成时，卵母细胞内的脂滴有所增加．脂滴中含有中性脂肪和磷脂．     

小鼠腔前卵泡卵母细胞的体外培养、体外成熟和体外受精研究

小鼠腔前卵泡在体外生长过程中，于培养液中添加血清，以及ＦＳＨ和胰岛素均对小鼠腔前卵泡的体外生长、体外成熟、体外受精起促进作用，其中以胰岛素的效果最为显著，腔前卵泡的体外成熟率和体外受精率可达６９．４％和８０．６％，但是体外受精后的体外发育率低于添加ＦＳＨ的试验组，表明ＦＳＨ有益于卵母细胞生长过程中细胞质的成熟。单层培养的卵巢颗粒细胞对腔前卵泡的体外生长也具有促进作用。将体外受精后发育至２—细胞的胚胎移植入受体鼠，胚胎可以正常着床发育。同时，卵母细胞的核仁和线粒体在培养过程中也发生相应的变化。     

小鼠腔前卵泡卵母细胞的体外培养、体外成熟和体外受精研究

小鼠腔前卵泡在体外生长过程中，于培养液中添加血清，以及ＦＳＨ和胰岛素均对小鼠腔前卵泡的体外生长，体外成熟，体外受精起促进作用，其中以胰岛素的效果最为显著，腔前卵泡的体外成熟率和体外受精率可达６９．４％和８０．６％，但是体外受精后的体外发育率低于加ＦＳＨ的试验组，表明ＦＳＨ有益于卵母细胞生长过程中细胞质的成熟，单层培养的卵巢颗粒细胞对腔前卵泡的体外生长也具有促进作用，将体外受精后发育至２－细胞的胚胎     

绵羊小腔卵泡卵母细胞的分离及相关实验

用绵羊小腔卵泡及小腔卵泡卵母细胞进行了一系列实验,获得小腔卵泡及小腔卵泡卵母细胞生发泡的有效分离方法.结果显示,常规的卵母细胞脱水收缩方法、离心方法、其它卵母细胞的电融合方法均不适用于小腔卵泡卵母细胞.     

猪卵母细胞体外成熟的研究

从屠宰场收集卵巢，用注射器从卵泡中吸出卵丘－卵母细胞复合体，对猪卵母细胞体外成熟的条件进行研究，根据卵母细胞体外成熟时的核成熟率、胞质成熟及体外受精时精子的穿卵速度，合适的体外成熟培养时间为４２～４５ｈ．卵母细胞周围卵丘细胞的多少及其排列紧密状态与卵母细胞的体外成熟率密切相关。卵泡大小与卵母细胞的体外成熟率有关，大卵泡卵优于小卵泡卵。ＰＭＳＧ促进猪卵母细胞体外成熟。     

"两步法"体外培养山羊卵母细胞的初步研究

体外成熟培养的卵母细胞经本外受精后，囊胚发育率远低于体内成熟卵母细胞，原因之一是由于体外成熟卵母细胞的不充分获能造成的，有假说认为：卵母细胞在体外培养过程中，如果延长GV期，可促进卵母细胞进一步获能，从而提高发育潜能。本文以山羊卵子为研究对象，探讨了山羊卵泡各种成分以及异种家畜卵泡液对山羊卵母细胞核成熟抑制以及抑制解除后减数分裂的影响，结果显示，山羊50％Q卵泡液、100％卵泡液、半卵泡、打孔整体卵泡以及完整卵泡对山羊卵母细胞的核成熟抑制率分别为：0.00%、9.38%、60.47％、78.26%和70.09%，随后，对经山羊半卵泡、打孔整体卵泡、完整卵泡抑制培养后的卵子进行恢复培养发现，卵子核成熟率分别为：64.29%、3.49%和4.13%，山卵母细胞与半卵泡共培养24h后进行0h、12h、20h、24h和30h的恢复培养，核成率分别为：0.00%、20.00%、61.90%、64.29%和43.75%，表明山羊半卵泡可以有效抑制山羊卵母细胞使之处于GV期，并且这种抑制作用可以恢复，恢复培养时间以20h和24h较为适宜，初步研究异种家畜卵泡液对山羊卵母细胞核成熟抑制的影响发现，50％牛卵泡液、1005牛卵泡液、50％绵羊卵泡液、100％绵羊卵泡液对山羊卵母细胞核成熟抑制率分别为3.7%、21.88%、10.00%、58.82%，表明，100％绵羊卵泡液对山羊卵母细胞核成熟抑制效果较好。     

骨形态发生蛋白7在兔卵巢中的表达分析

为探讨BMP7蛋白在卵泡发育、黄体化和排卵过程中的作用,本研究采用免疫组织化学方法检测了BMP7在兔卵巢中的表达定位情况.结果显示, BMP7蛋白在兔卵巢原始卵泡和初级卵泡中未检测到表达;在次级卵泡卵母细胞及有腔卵泡的各种细胞中都有表达,但只在部分内膜细胞中表达;在间质细胞、黄体及表面上皮中也有表达.由此表明,BMP7没有参与兔原始卵泡的激活,而在初级/次级卵泡转化以及其后的卵泡成熟过程中发挥了作用;BMP7不仅是卵泡内膜细胞分泌因子,而且也是卵母细胞和颗粒细胞分泌因子.对BMP7的表达来说卵泡内膜细胞存在功能性差异.BMP7可能参与了兔黄体、排卵等活动的调节.     

川金丝猴的野外人工投食招引的方法

川金丝猴是一种树栖动物,机智敏捷,栖身于高山森林中,野外观赏和研究极为不便.为了能够野外近距离观赏和研究金丝猴,周至保护区与西北大学生命科学院合作,在野外招引川金丝猴取得成功.介绍了玉皇庙贡泥沟野外人工投食招引川金丝猴的方法,以便为今后研究和观赏川金丝猴提供帮助.     

动物卵母细胞透明带与受精的关系

阐述对哺乳动物卵母细胞透明带(ZP)在卵母细胞受精过程中的作用,指出卵母细胞ZP厚度、弹性、显微结构及理化结构是影响卵子受精过程的重要因素。     

动物卵母细胞透明带与受精的关系

阐述对哺乳动物卵母细胞透明带（ZP）在卵母细胞受精过程中的作用,指出卵母细胞ZP厚度、弹性、显微结构及理化结构是影响卵子受精过程的重要因素。     

Sources of cumulus expansion enabling factor (CEEF) in porcine follicles

It was shown that expansion of porcine cumulus did not depend on oocyte-secreted factor(s), and it is therefore presumed that porcine CEEF may not be produced exclusively by the oocyte. In this experiment, we used mouse oocytectomized complexes (OOX), which were incapable of CEEF production, to assess the secretion of CEEF by evacuated zona, oocytes of different quality and somatic cells in the porcine follicles. The results showed that: (ⅰ) Evacuated zonae from both porcine and mouse oocytes did not produce CEEF. (ⅱ) Porcine oocytes of A, B and C types from 3—6 mm follicles were not significantly different in both production and activity of CEEF. (ⅲ) Both porcine OOX from 3—6 mm follicles and granulose cells from < 1 mm follicles secreted CEEF in a large quantity, independent of gonadotropins; mural granulose cells from 3—6 mm follicles, however, produced neglectable amount of CEEF. (ⅳ) The follicular fluid from 3—6 mm porcine follicles contained CEEF activity that was concentration-dependent, and thus it enabled cumulus expansion in 60% mouse OOX when used at 10% of concentration, but the expansion rate of mouse OOX decreased to 9% when the concentration was increased to 50%. (ⅴ) Mouse OOX cultured in porcine CEEF-containing M199 expanded only in the presence of gonadotropins, suggesting that the activity of porcine CEEF is hormone-dependent.     

抗氧化剂对小鼠腔前卵泡及其卵母细胞体外发育的影响研究

通过使用改良的TCM199无血清培养系统,在96孔细胞培养板中,每孔放入一个腔前卵泡等条件下,探索添加物抗氧化剂维生素C对小鼠腔前卵泡卵母细胞体外生长发育的影响,旨在摸索一套适合小鼠腔前卵泡体外生长发育的培养体系.结果表明:随着浓度的增加,卵泡和卵母细胞的直径都不同程度地有所增长,其中50μg/m L浓度组在卵泡培养相同时间下,卵泡和卵母细胞的增长值相对于其他浓度组略大些,但各浓度组之间无论是卵泡直径增长值还是卵母细胞直径增长值都不存在显著性差异(P0.05).培养到第6天时,50和100μg/m L浓度组卵泡存活率最高,为59.5%,且50μg/m L浓度组第一极体排出率最高,为2.38%,但发生生发泡破裂率次于150μg/m L浓度组.可得结论:在改良的TCM199无血清培养系统中,添加50μg/m L维生素C有利于腔前卵泡卵母细胞的生长,而添加150μg/m L维生素C有利于生发泡破裂.     

塔形马蹄螺雌性生殖系统的显微结构研究

塔形马蹄螺为雌雄异体，其雌性生殖系统主要由卵巢和输卵管组成，没有受精囊、交合囊和子宫，也没有其他的附属腺体．卵巢小管内存在不同发育时期的卵原细胞、初级卵母细胞、次级卵母细胞、卵黄合成期卵母细胞和成熟卵母细胞．输卵管壁向管腔凸出8～9个皱褶，柱状上皮细胞游离缘具细长纤毛；卵巢的发育具季节性．     

Fe-C二元合金凝固过程强制对流作用下柱状晶生长行为的数值模拟

文章在前期建立的微观元胞自动机模型的基础上,耦合动量传输模型、质量传输模型和热量传输模型,建立了考虑流体流动的宏微观多尺度二维枝晶生长数学模型CA-FVM。并采用CA-FVM模型研究了强制对流作用下Fe-0.82C二元合金凝固过程枝晶生长规律。数值模拟表明:强制对流明显地改变了枝晶生长规律,靠近强制对流入口处枝晶生长受抑制作用较明显,枝晶生长较慢,远离强制对流入口处枝晶受抑制作用较弱,枝晶生长较快。同时,随着强制对流强度的增加,枝晶生长受熔体流动的影响更加明显,加剧了枝晶的非对称生长。     

罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)卵子发生的细胞化学研究

本研究应用细胞化学方法研究了罗氏沼虾卵子发生过程中主要生物大分子的变化。从卵原细胞到卵母细胞的发育过程中，核酸逐渐分散，蛋白质大量沉积。尽管卵原细胞和卵黄发生前的卵母细胞中，PAS和苏丹黑反应为阴性，但随着卵母细胞被滤泡细胞包围，这两种反应阳性物质在卵母细胞质中大量出现，似乎表明滤泡细胞可以向卵母细胞提供糖类和脂类或能构成糖类、脂类的物质。成熟卵子内含有大量蛋白质、糖类和脂类，为此后的胚胎发育作好了准备。     

促性腺激素对小鼠腔前卵泡及其卵母细胞体外发育的影响研究

通过使用改良的TCM199无血清培养系统,在96孔细胞培养板中,每孔放入一个腔前卵泡等条件下,探索促性腺激素(FSH、LH)对小鼠腔前卵泡卵母细胞体外生长发育的影响,旨在摸索一套适合小鼠腔前卵泡体外生长发育的培养体系.结果表明:随着浓度的增加,卵泡和卵母细胞的直径都不同程度的有所增长,在卵泡培养的同期相比,卵泡增长值最大组为FSH400+LH200组,而卵母细胞增长值最大组却是FSH400组.从添加物上看,各个实验组与对照组之间,卵泡直径和卵母细胞直径增长值都存在显著性差异(P0.05).随着培养时间的延长,FSH400+LH200组卵泡存活率、成腔率表现为最高,分别为68.6%,47%.从卵泡发生生发泡破裂率和第一极体排出率来看,FSH400+LH200组发生生发泡破裂率高于其他组,为17.6%,但第一极体排出率却低于FSH400组.因此,改良的TCM199无血清基础培养液中联合添加400mIU/mL FSH和200mIU/ML LH效果优于单独添加组的效果.     

Follicles were reconstituted from dissociated mouse fetal ovarian cellsin vitro

Early folliculogenesis involved in the interaction of germ cells and somatic cells is a complicated physiological event. Female germ cells are committed to differentiate into oocytes and finish complete development in the functional units of follicles. Thus there will be great significance in basal research and practices to evaluate the possibility of ovarian cells to reconstitute into follicles in vitro. In the present research, 12-16 dpc (days post coitum) mouse fetal ovarian cells were respectively isolated using collagenase digestion and cultured in droplets in vitro. The results revealed that the fetal ovarian cells of 12-16 dpc appeared to form multiple cell aggregates and tissue-like pieces in vitro. However, 12-13 dpc ovarian cells failed to form the follicles. 14-15 dpc ovarian cells were competent to form a few follicle-like complexes. Furthermore many small typical follicles were reconstituted from 16 dpc ovarian cells in vitro. The results showed for the first time that mouse embryonic ovarian cells were able to form the follicles in vitro. It was a gradual progression for the female germ cells to achieve the ability to induce somatic cells differentiation and reconstitu-tion into follicles, which may directly lead to the success in reorganization and transplantation of genetically modified ovary in vitro.     

白棘三列海胆生殖系统的组织学研究

从组织学方面研究了白棘三列海胆生殖系统的构造及其性腺发育分期．结果表明,白棘三列海胆的生殖腺为5列,由系膜悬挂于各生殖腔内．卵巢为滤泡型,在滤泡的边缘为卵原细胞和卵黄形成前期卵母细胞,而在滤泡的内部为卵黄形成初期卵母细胞、卵黄形成后期卵母细胞和成熟卵细胞,当卵母细胞内的卵黄完成积累后,经两次成熟分裂,分裂为成熟卵子．精巢也为滤泡型,精原细胞由滤泡壁原始的生殖细胞产生,进而依次发育为初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞和精子．白棘三列海胆生殖腺发育周期可分为：恢复期、生长期、成熟前期和排放后期,通过解剖观察及组织切片显示,全年中除5月份之外,其余各月份均可进行白棘三列海胆的人工繁殖．     

相场法研究初始微结构对晶粒长大的影响

【目的】研究不同初始微结构对晶粒长大过程及生长动力学的影响。【方法】采用相场法(Phase Field)模拟二维多晶材料中正常晶粒长大及初态分别为柱状和梯度微结构的晶粒长大过程。【结果】正常晶粒长大的相对晶粒尺寸分布具有时间不变性的特点;柱状微结构的长宽比和梯度微结构的梯度指数均直接影响晶粒长大动力学,这两种初始微结构在演化过程中均向均匀等轴微结构转变。【结论】晶粒长大是大晶粒不断吞噬相邻小晶粒的过程;晶界曲率对晶粒长大过程有显著影响,曲率越大,晶粒长大越快。     

相场法模拟第二相颗粒对柱状晶定向生长的影响

[目的]第二相颗粒的存在能影响晶粒的长大,提高材料的力学性能,因而我们用计算机模拟了含第二相颗粒的镍基合金材料在再结晶后的定向退火过程中的柱状晶生长。[方法]在相场法的基础上引入一个温度控制晶界运动的二维平面退火模型,使用该模型对含第二相颗粒的样品进行定向退火处理,观察退火过程中组织形貌的变化,并从第二相颗粒的含量和位置两个方面来讨论退火过程中第二相颗粒对柱状晶组织生长的影响,通过对柱状晶长宽比的统计来反应这些变化。[结果]定向退火处理可产生柱状晶结构;弥散分布的第二相颗粒的存在不利于柱状晶生长,并且含量越高柱状晶越粗,长宽比越小。[结论]第二相颗粒位置可以改变柱状晶晶界的形成方向,间距可以影响长宽比的大小,颗粒间的横向间距和纵向间距都存在一个临界值使柱状晶的长宽比最大。