植物内生放线菌及其次级代谢产物的研究进展

植物内生放线菌是一种特殊的微生物类群,广泛存在于自然界.其次级代谢产物具有丰富的药用价值和多种生物学功能,如抑菌、抗疟疾、抗癌,能保护和促进植物生长等.文章从植物内生放线菌次级代谢产物的功能及不同培养条件对大规模生产的影响进行综述,以期为植物内生放线菌的进一步研究提供参考.     

植物内生细菌研究及其应用

综述了植物内生细菌的研究现状(即植物内生细菌的生态学和植物病理学2个方面的内容),植物内生细菌的生物学作用及其作用机制,并对植物内生细菌研究中存在的问题进行了探讨,对其应用前景进行了展望.     

植物内生菌药用研究进展

植物内生菌能产生或生物转化出丰富的药理活性物质,因而成为新研究热点.本文综述了植物内生菌的次生代谢产物的药理活性,以及植物内生菌的生物转化研究.     

刺五加内生放线菌的分离与多样性研究

从采集自5个不同地点的刺五加全株植物,采用8种分离培养基,从植株不同部位分离,经BOX-PCR排重后,共得到内生放线菌265株.从不同培养基分离出的放线菌数目有较大差异.LNMS培养基分离菌株最多,60株.海藻糖-无机盐培养基分离最少,17株.从刺五加植株根及根茎分离到的放线菌数量最多,占菌株总数的77%,叶中分离的最少,为6%.从吉林柳河和吉林梅河口植株内分离的菌株较多.利用16SrRNA基因序列分析鉴定,菌株分属于7个亚目,9个科,9个属.     

川楝内生放线菌多样性及群落结构研究

为深入挖掘川楝药材中的微生物资源,研究分析了川渝地区川楝内生放线菌的多样性和群落结构.运用PCR-DGGE技术对重庆万州、四川资阳、四川遂宁三个地区采集的川楝样品进行分析.DGGE图谱显示不同地区相同部位的样品以及相同地区的不同部位之间川楝内生放线菌都存在多样性差异,这种差异来自于地域环境和自身代谢水平的不同.不同部位总体上呈现树皮的多样性最丰富,而果实的多样性最差.对DGGE条带进行回收测序,共获得24条序列,归于11个属,链霉菌属(Streptomyces)为优势菌属占25%,其余的川楝内生放线菌归于为芽球菌属(Blastococcus)、气微菌属(Aeromicrobium)、中村氏菌属(Nakamurella)、分枝杆菌属(Mycobacterium)、棒杆菌属(Corynebacterium)、红球菌属(Rhodococcus)、冷杆菌属(Cryobacterium)、微杆菌属(Microbacterium)、诺卡氏菌属(Nocardioides)、利夫森氏菌属(Leifsonia)等稀有放线菌属,占总数的75%.结果表明分布于不同地域的川楝各组织内生放线菌多样性及群落结构存在差异,蕴藏着丰富的放线菌资源.     

植物内生菌中生物碱成分研究进展

植物内生菌代谢产物具有丰富的化学结构多样性和广泛的生物活性,是极具潜力的药物研发资源.生物碱类化合物是植物内生菌代谢产物的重要活性成分之一.近几年从植物内生菌中发现了许多生物碱类成分,按照结构类型综述了2008—2014年间已报道的植物内生菌生物碱的来源、结构特点及生物活性的研究概况,并对植物内生菌生物碱的作用进行了展望.     

抗癌药用植物内生真菌的潜在应用价值

综述了国内外从一些抗癌药用植物分离的内生真菌以及其中个别菌株产生与宿主相同或相似生理活性成分的研究进展,这些研究对缓解药物资源供应和开辟新的天然药源渠道做了很有意义的工作,并对药用植物内生真菌的潜在应用价值做了初步探讨。     

猫儿屎内生真菌DS58次生代谢产物的研究

首次对秦岭植物猫儿屎茎部分离到的内生真菌DS58的次生代谢产物的化学成分进行研究,经ITS序列分析,鉴定该菌株为曲霉属真菌。采用大米培养基对该菌株进行固体发酵,利用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、重结晶等方法分离纯化得到了8个化合物,经波谱解析,分别鉴定为:(1)β-谷甾醇;(2)5α,8α-环二氧麦角甾-6,22-二烯-3β-醇;(3)5-羟基-2(3H)-苯并呋喃酮;(4)2,5-二羟基苯乙酸乙酯;(5)2,5-二羟基苯乙酸甲酯;(6)琥珀酸;(7)2,5-二羟基苯乙酸和(8)cannabifolactone A。化合物(3),(4),(8)均首次从真菌的发酵物中分离得到。     

青风藤内生真菌 QT-NJ-10化学成分研究*1

目的：研究青风藤（Caulis sinomenii）内生真菌 QT-NJ-10的化学成分。方法以青风藤（Caulis sinomenii）作为宿主植物,分离得到青风藤的内生真菌。通过培养基优化,最终以其中一株内生真菌 QT-NJ-10为供试菌株,经过大批发酵,得到乙酸乙酯相粗提物。通过多种现代色谱手段对粗提物进行单体化合物的分离,单体化合物再利用核磁共振波谱手段（1 H-NMR,13 C-NMR,HSQC,COSY和 HMBC 等）鉴定其结构。结果通过分离、纯化、培养基优化,对其中之一 QT-NJ-10菌株再进行大批发酵,提取、分离,多种分析方法表征结果显示,所得化合物为 eremofortine C-1。结论对于以青风藤（Caulis sinomenii）作为宿主植物,分离纯化得到青风藤的内生真菌的其它成分以及 eremofortine C-1的生物活性,均有待进一步深入研究。     

猫儿屎内生真菌DL06菌株的鉴定及次生代谢产物的研究

对猫儿屎内生真菌DL06菌株进行鉴定,并对其次生代谢产物进行研究,采用形态学观察以及ITS序列鉴定菌株DL06为产黄青霉(Penicillium chrysogenum)。应用多种层析手段对其发酵产物进行分离纯化得到了8个化合物,结合理化性质和波谱分析确定为β-谷甾醇(1)、6,8-二羟基-3-甲基异香豆素(2)、单甲基硫赭曲菌素(3)、大黄素-8-甲醚(4)、2-呋喃甲酸(5)、5-羟甲基呋喃-3-羧酸(6)、6-柠檬酸甲酯(7)和丁二酸(8),化合物(2)、(3)、(6)和(7)均为首次从产黄青霉中分离得到。利用最小抑菌浓度法(MIC)对化合物的活性进行检测,抗菌活性表明化合物(3)具有较强的抑菌作用。     

水稻内生放线菌降解酶活性的分析

分析了水稻内生放线菌纤维素酶、木聚糖酶、果胶酶三种酶活性，结果表明：52％的菌株具有纤维素酶活性，35％的菌株具有木聚糖酶活性，61％的菌株具有果胶酶活性．     

南海红树林内生真菌1893代谢产物研究

对采自香港的红树林内生真菌（1893号）的代谢产物进行了研究。共分离得到10个化合物，其中5-对羟基苯乙基-2，4-咪唑烷二酮和尿囊素是首次从海洋真菌中分离得到，它们的结构通过IR，FABMS，NMR及2D-NMR得到确定。     

药用植物虎杖内生放线菌的分离及抑菌活性的研究

采用平板涂布法从药用植物虎杖(Polygonurn cuspidatum)中分离出内生放线菌41株,以大肠杆菌(Escherichia coli)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、沙门氏菌(Salmonella typhl)、白色念珠菌(Monilia albican)为靶标菌,采用滤纸片扩散法研究了虎杖内生放线菌发酵液的抑菌活性。结果显示,共有13株内生放线菌对5种靶标菌表现了不同程度的抑菌活性,占分离总数的31.7%。有5株内生放线菌表现出较明显的抑菌活性,特别是PEA004和PEA013菌株对枯草芽孢杆菌的抑菌圈分别达17 mm,15 mm,并且对其它几种靶标菌也表现出不同程度的抑菌活性。     

唐古特大黄内生放线菌分离鉴定及生防作用研究

以唐古特大黄为材料,采用匀浆涂布法进行内生放线菌的分离,并运用平板对峙法和生长速率法筛选内生放线菌的抑菌活性;皿内抑菌结果表明,菌株4-21对稻瘟病菌抑制率高达84.12%.通过形态学观察、生理生化特性检测和16SrDNA序列分析将菌株4-21鉴定为Streptomyces albidoflavus.通过盆栽试验证明,菌株4-21对水稻稻瘟病具有良好的防治效果,其相对防治效果为52.73%.结果表明,内生放线菌4-21在水稻稻瘟病的生物防治中具有潜在的应用价值.     

百合内生放线菌的抗菌实验及其生理生化的相关研究

对百合中分离得到的一株放线菌进行传代培养,得到生长良好及性状稳定的实验菌株,然后测定其生理生化特性以及对几种不同病原菌的抑菌活性.该实验菌株最适生长温度为23℃,最适生长pH值为9,产淀粉酶和过氧化氢酶,对绿脓杆菌和肺炎双球菌等具有抑制作用.     

兰州百合植物内生及根际土放线菌最适分离培养基的筛选研究

以兰州百合的鳞茎、根及根际土为实验材料,对其植物内生和根际土放线菌在不同的培养基上进行分离培养.根据不同培养基中所得放线菌菌落数量与种类,应用统计学方法,来选择出最适植物内生以及根际土放线菌生长的最适培养基.方法:对兰州百合鳞茎及根部表面消毒处理后,采用组织悬液法将原液涂布于添加抑菌剂的腐殖酸培养基、寡营养培养基、改良的高氏Ⅰ号等10种不同的培养基上.对根际土壤采用120℃预处理1 h,然后将处理后的根际土样作10-1、10-2、10-3梯度稀释并分别涂布于添加抑菌剂的SCA培养基、HVA培养基、葡萄糖—天冬氨酸琼脂培养基等7种不同的培养基上.置于23℃恒温培养箱中培养30 d,统计每个培养基上放线菌菌落数量及种类.结果:不同培养基分离兰州百合植物内生及根际土放线菌,其数量和种类有很大差异.其中,最适于百合鳞茎、根部内生及根际土放线菌生长的培养基分别为IMA-2琼脂培养基(共109株)、腐殖酸培养基(共662株)和改良高氏Ⅰ号培养基(共112株).     

南海红树林内生真菌Gx-3a代谢产物研究

采用反复硅胶柱色谱法和Sephadex LH-20凝胶色谱法分离纯化南海红树林内生真菌Gx-3a的代谢产物,并通过理化常数测定和光谱分析鉴定其化学结构.结果从南海红树林内生真菌Gx-3a的菌体中分离得到4个代谢产物:ditryptophenaline(1),3-hydroxy-4-(2,6,6-trimethyl-tetrahydro-2 H-pyran-2-yl)benzoic acid (2),(E)-4,5-dihydroxy-3-(prop-1-enyl) cyclopent-2-enone(3),3,6-di-sec-butyl-1,4-dihy Droxypiperazine-2,5-dione(4),化合物1对口腔癌细胞KB,KBv200的抗肿瘤活性值分别为8.0和12.0 μmol/ml.4个化合物均首次从南海红树林内生真菌Gx-3a中分离得到.     

南海红树内生真菌#HA-094代谢产物的研究

对中国南海红树水黄皮根内真菌#HA-094的代谢产物的化学成分进行了研究,从中分离得到了7个化合物,dihydroterrein(Ⅰ)、p-hydroxylbenzylalohol(Ⅱ)、对甲氧基笨甲醇(Ⅲ)、三十一烷烯酸(Ⅳ)、(22E,24R)-麦角甾-5,7,22-三烯-3β-醇(Ⅴ)、5α-8α-表二氧-(22E,24R)-24-麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(Ⅵ)、(22E,24R)-24-甲基麦角甾-7,22-三烯-3β-5α-6α-三醇(Ⅶ),利用波谱分析方法,对这7个化合物进行了解析.化合物Ⅰ系首次从该菌属中分离得到.     

刺松藻内生真菌长枝木霉的化学成分研究

对烟台近岸的绿藻刺松藻来源的一株内生真菌长枝木霉的次生代谢产物进行了探索.通过硅胶柱层析、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱层析、制备薄层层析和高效液相色谱等色谱分离手段,以及超导核磁共振等波谱鉴定技术,从该菌的马铃薯-葡萄糖和菊芋-葡萄糖液体培养基发酵产物中继续分离并鉴定了5个化合物,包括5α,8α-环氧麦角甾-6,22-二烯-3β-醇（1）;麦角-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇（2）;β-谷甾醇（3）;5-羟基-3-甲基戊-2-烯酸（4）和角鲨烯（5）.化合物4和5均为首次从木霉中分离得到.抑菌活性测试结果表明化合物1～5对细菌和真菌无明显抑制作用.     

植物黄花夹竹桃内生真菌多样性研究

从植物黄花夹竹桃(Thevetiaperuviana)根、茎、叶、果中分别分离获得内生真菌17,28,42和14株,共计101株.以形态为主分类鉴定到属,分属2纲,5目,6科,24属.研究表明各部位的内生真菌类群差别很大.