链球菌制剂预防性治疗实验动物糖尿病机理研究

为了探讨链球菌制剂预防性治疗糖尿病的机理,以纯系的自发性糖尿病NOD小鼠和链脲霉素诱导糖尿病鼠为动物模型,从5周～20周皮下注射链球菌制剂0.1 mg/只,对照组注射等量生理盐水,观察其发病率.至40周时链球菌制剂组均未发病,而生理盐水组发病率为70%.取胰腺组织作病理切片,Fas、FasL染色及胰岛β细胞染色.未发病鼠无Fas表达,但有FasL的表达;已发病鼠有Fas的表达;经链球菌制剂免疫后小鼠有FasL表达.相同的结果也出现在以链脲霉素(STZ)诱导的迟发型糖尿病模型鼠中.链球菌制剂可能通过改变Fas L/Fas系统在胰腺组织的表达,来预防性治疗糖尿病,发挥免疫调节作用.     

A群链球菌制剂的制备工艺

采用改良后的无血培养基,将筛选选育后得到的A群链球菌进行制剂的制备研究,以发酵后菌悬液的OD值为指标,通过正交试验分析对其进行条件优化。得到的制备工艺为：在37℃、摇床转速140r／min下,装瓶量150mL、pH值7．5、酵母粉用量0．5％、胰蛋白胨用量1．5％、牛肉膏用量0．4％、葡萄糖用量0．5％。实验表明,菌体在改良后的培养基上生长良好,形态特征符合A群链球菌的形态特征。     

结晶紫对于链球菌培养的影响

影响链球菌生长的因素很多，我们就血平板中是否加入结晶紫链球菌在其培养基上生长状况做了比较实验。结果表明，在萌落形态，阳性数以及链球菌的鉴别方面，加入结晶紫的血平板明显优于未加结晶紫的血平板。     

白花丹参对糖尿病大鼠胰岛B细胞凋亡影响的研究

白花丹参是一种珍稀的中药材, 含有多种微量元素, 具有极高的药用价值. 本文针对白花丹参进行了多项实验, 采用MTT法检测白花丹参浸出液对INS-1细胞的凋亡的抑制作用, 并且建立糖尿病大鼠模型研究白花丹参对血糖和胰岛素释放的影响, 取实验大鼠的胰岛做HE染色和免疫组化染色, 观察白花丹参抑制胰岛B细胞凋亡的效果和胰岛组织中抑制凋亡的Bcl-2蛋白和促进凋亡的Bax蛋白的分布. 实验结果证明, 白花丹参能促进Bcl-2蛋白的产生, 削弱Bax蛋白促进凋亡的能力, 抑制了胰岛B细胞的凋亡, 从而使胰岛素的释放增加, 最终达到控制血糖的目的. 本文的研究对开发治疗糖尿病的辅助药物具有一定意义.     

神经网络与遗传算法对A群链球菌发酵培养基的优化

利用神经网络对培养基组分：胰蛋白胨、牛肉膏、葡萄糖、酵母粉的浓度和起始pH值进行建模,并用遗传算法对其优化。结果表明,经过神经网络和遗传算法优化过的培养基使A群链球菌的生物量提高了18％。     

FTO过表达对小鼠胰岛β细胞功能的影响以及全基因组表达谱变化研究

为了研究肥胖基因FTO过表达对小鼠胰岛β细胞功能的影响以及基因表达谱的变化,构建小鼠FTO基因过表达慢病毒载体,包装慢病毒颗粒并感染小鼠胰岛MIN6细胞.利用QPCR和WesternBlot技术检测FTO基因在MIN6细胞中过表达情况,并检测葡萄糖刺激检测胰岛素的释放情况,进一步利用小鼠全基因芯片检测FTO过表达对小鼠胰岛MIN6细胞表达谱的影响.结果表明：慢病毒载体成功介导了FTO在MIN6细胞中过表达,FTO过表达可以显著抑制MIN6细胞的胰岛素释放.表达芯片的结果显示FTO改变MIN6细胞表达谱,发现多达922个的差异基因.FTO过表达改变了小鼠胰岛细胞的表达谱,差异基因通过一些重要信号通路影响小鼠胰岛β细胞的生物学功能.     

山药多糖对体外培养大鼠胰岛细胞活性及胰岛素分泌的影响

为评价山药多糖对胰岛细胞功能的影响,以不同质量浓度葡萄糖刺激胰岛素释放,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测胰岛β细胞活性,同时以反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测胰岛细胞的抗凋亡基因bcl-2的表达,研究山药多糖与大鼠胰岛细胞共培养对胰岛细胞活性与胰岛素分泌水平的影响,并对其影响机制进行探讨.结果发现,1600 mg/L组胰岛细胞活性稍有下降,但是与对照组没有显著差异(p0.05);其余各组随培养液中山药多糖质量浓度的增加,胰岛细胞活性增加.低糖或高糖质量浓度环境中实验组与对照组的胰岛素分泌没有显著差异(p0.05),RT-PCR发现实验组的bcl-2表达显著高于对照组(p0.05).800 mg/L山药多糖明显提高胰岛细胞的存活率,改善胰岛功能.     

IL-24联合大蒜素体外抗肺癌细胞生长的实验研究

目的探讨抑癌基因IL-24联合大蒜素对肺癌A549细胞凋亡的影响,并初步探讨其作用机制.方法提取前期构建的p DC316-h IL-24-EGFP质粒,转染肺癌A549细胞,分为A组(空白对照组)、B组(单独大蒜素组(40μL/m L))、C组(脂质体+IL-24组)、D组(大蒜素(40μL/m L)+脂质体+IL-24).荧光显微镜下观察质粒的转染情况;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot法检测p DC316-h IL-24-EGFP、大蒜素和联合用药作用A5 4 9细胞4 8 h后IL-24,Bax,Bcl-2和Caspase-3蛋白表达水平.结果大蒜素(40μL/m L)和p DC316-h IL-24-EGFP单用48 h对A549细胞均有明显抑制作用;大蒜素(40μL/m L)联合p DC3 1 6-h IL-24-EGFP比单用p DC3 1 6-h IL-24-EGFP作用更强(P0.05);大蒜素(40μL/m L)、p DC316-h IL-24-EGFP和两药联用48 h后,A549细胞凋亡率分别为32.7%,39.4%和68.8%;大蒜素(40μL/m L)和/或IL-24作用于A549细胞48 h后,Bax/Bcl-2的比值及Caspase-3表达均上调,联合用药组效果尤其明显.结论p DC316-h IL-24-EGFP联合大蒜素可协同抑制人肺癌A549细胞生长,机制可能是通过调节基因Bax/Bcl-2的表达比率,并上调Caspase-3的表达,进而诱导A549细胞的凋亡.     

四种中药制剂对人大肠癌Moser细胞增殖与凋亡的影响

研究大肠癌Moser细胞和乳腺癌MCF7细胞对市售4种中药制剂（斑蟊酸钠、苦参素、华蟾素和川穹素）的敏感性，以及川穹素影响大肠癌细胞增殖的可能机理。采用MTT法测定药物对细胞增殖的抑制率和药物间的协同抑制作用；酶联免疫法检测 CEA表达水平；流式细胞法测定细胞周期。4种中药对乳腺癌MCF7细胞的增殖均有不同程度的抑制作用，但只有川穹素可明显抑制大肠癌Moser细胞的增殖；川穹素与5种化疗药物联合对Moser细胞有协同作用；对Moser细胞表达CEA没有影响；可诱导Moser细胞凋亡。斑蝥酸钠、苦参素和华蟾素对不同肿瘤细胞的抑制效果差异很大；川穹素不仅有抑制肿瘤细胞增殖的作用，还与化疗药物有协同效果；川穹素抑制Moser细胞增殖的机理似与转化生长因子信号传导途径无关。     

硒化麒麟菜多糖对宫颈癌细胞株生长和淍亡的影响

目的：探讨硒化麒麟菜多糖在体外对宫颈癌Hela细胞株生长和凋亡的作用及机制。方法：以宫颈癌Hela细胞株为研究对象,用MTT法检测硒化麒麟菜多糖对肿瘤细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞周期、细胞调亡以及凋亡基因Fas的表达情况,以顺铂为对照组,比较硒化麒麟菜多糖与顺铂的疗效。结果：硒化麒麟菜多糖可阻滞宫颈癌Hela细胞的生长使之停留在S和G2-M期,从而抑制了肿瘤细胞的增殖,同时通过促进Fas表达,诱导Hela细胞凋亡。结论：硒化麒麟菜多糖通过阻滞肿瘤细胞的生长及诱导细胞凋亡等机制,对宫颈癌细胞的增殖有一定的抑制作用。