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小鼠、大鼠、豚鼠和地鼠经滴鼻和腹腔接种淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒(LCMV),一月后测抗体效价。发现小鼠经滴鼻和腹腔接种LCMV均有高效价抗体产生(1:10240);大鼠经滴鼻和腹腔接种均无明显可测抗体;豚鼠腹腔接种LCMV易至发病,幸存者(2/5)产生高效价抗体;地鼠经滴鼻和腹腔接种LCMV均易致发病和死亡。 相似文献
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目的对实验室留存的大鼠血清样本进行淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)抗体检测,调查LCMV在我国实验大鼠中的感染情况。方法依据现行国家标准中规定的免疫荧光试验(IFA)方法对我实验室保存的172份大鼠血清样本(包括48份无级别、100份清洁级和24份SPF级大鼠血清样本)进行LCMV抗体检测。结果无级别大鼠血清样本(n=48)15份阳性,阳性率为33.25%,强阳性样本滴度可达1∶1280;SPF级及清洁级大鼠血清样本全部阴性。结论大鼠可以感染LCMV,实验动物等级标准应增加对大鼠LCMV的检测。 相似文献
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套式PCR检测斑节对虾白斑症病毒(WSSV) 总被引:7,自引:0,他引:7
解剖患白斑症斑节对虾的鳃组织,制备成不同释放倍数的模板,对其进行白斑症病毒(WSSV)的PCR扩增,结果显示所建立的套式PCR的灵敏度大约为一步PCR的10^4倍;对感染病毒后不同时期的斑节对虾进行PCR检测,发现感染早期经一步PCR检测为WSSV阴性的样品,套式PCR的检测结果为阳性;对发病虾塘中的几种甲壳类动物进行PCR检测,发现经一步PCR检测为阴性的长臂虾、秉氏厚蟹和褶痕相手蟹等宿主,套式PCR的检测结果为阳性。表明所建立的WSSV套式PCR检测法较普通的一步PCR有更大的应用价值和意义。 相似文献
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半套式PCR技术在植物基因克隆中的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
杨明挚 《云南大学学报(自然科学版)》1998,20(5):377-379
常规PCR方法在分离克隆已知序列的基因中发挥着重要的作用,但要求目的基因片段与引物间的同源性几乎是100%,一旦引物序列与目的基因间存在有差异,便往往会导致扩增的特异性不强,扩增效率不高,给克隆带来很大的困难.在常规PCR基础上,若所分离的基因在不同植物间存在保守序列,依据这一序列再合成一对引物,进行半套式PCR则能大大提高扩增的特异性及扩增效率.对于较长的基因片段而言还能同时完成亚克隆.本文依据南瓜GPAT(甘油-3-磷酸酰基转移酶)基因cDNA序列及比较拟南芥菜、豌豆间在该基因内的保守区段序列合成相应引物来分离克隆黑子南瓜及西瓜GPAT基因的cDNA片段为例来说明半套式PCR技术在植物基因克隆中的应用 相似文献
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用PCR的方法,扩增了伪狂犬病病毒gp50基因的一段较为保守区。检测了不同PRV毒株感染的BHK细胞以及接种的家兔,并对PCR检测的灵敏性作了初步研究。结果表明,PCR法扩增gp50基因具有较高特异怀和灵敏性,是检测PRV的有效方法。 相似文献
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小鼠是 2种细小病毒MPV和MVM的终宿生。它们均可感染淋巴细胞 ,抑制体内肿瘤形成 ,污染细胞培养。由于细小病毒感染会干扰研究结果 ,因此确定小鼠感染MPV还是MVM是很重要的。本研究的目的是建立检测排泄物中病毒的PCR方法 ,在血清抗体产生之前能够活体检测出MVM和MPV。排泄物中DNA的提取最好用商品化的过柱方法 ,通过增加洗涤步骤帮助去除排泄物中的抑制物。为了提高敏感性 ,比较了4 5个循环扩增排泄物PCR和只有 35个循环的组织PCR。通过检测 37只来自同一群自然感染MVM和MPV成年Sencar小鼠的粪… 相似文献
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PCR检测试剂诊断对虾白点病毒 总被引:3,自引:0,他引:3
对虾白点病(whitespotdisease,WSSV)目前急需准确、快速的病毒诊断技术.PCR诊断方法是目前已知的最佳选择.但PCR技术在使用上存在着某些问题,例如专一性、灵敏度、假阳性、假阴性及定量等,是选择PCR做为病毒诊断试剂时,必须慎重考虑的问题.市面上已有商品化的虾白点病毒诊断试剂供养殖者选用.IQ2000系统采用已经过证实的白点病毒核酸序列作为PCR的反映标的,具专一性强、灵敏度高、可同时进行定性及定量检测、包含了内控制组及阳性标准品、可有效地排除假阴性及假阳性的问题等特点,无论在学术研究及实际养殖上都可证明其功效.以IQ2000为基础所发展出来的虾白点病毒安全指标,可提供养殖户作为虾白点病毒防治的参考依据. 相似文献
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利用PCR技术直接检测乳粉中的肺炎克雷伯氏菌,无需增菌.通过滤膜法成功地从人工污染肺炎克雷伯氏菌的乳粉中提取了肺炎克雷伯氏菌的DNA.以肺炎克雷伯氏菌的间区序列(ITS)为靶基因,经过PCR扩增得到158 bp的产物,经过DNA测序证实该产物为目的扩增产物.该方法灵敏度高,乳粉中检测的灵敏度为10CFU/mL,可在6 h内完成对乳品中肺炎克雷伯氏菌的检测,比目前普遍采用的先增菌再进行PCR检测的方法缩短了12-24 h. 相似文献
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应用聚合酶链式反应检测犬细小病毒 总被引:6,自引:0,他引:6
将具有犬细小病毒病典型症状的病犬肠溶物经SDS-酚裂解法提取总DNA,并以此DNA为模板,通过人工合成的两条20mer引物进行PCR扩增,该对引物扩增的片段为犬细小病毒结构蛋白VP2基因中间1/3区段,PCR产物经琼脂糖凝胶电泳,试验结果表明:用PCR扩增检测犬细小病毒具有良好的特异性,应用该方法检测的27份病犬肠溶物样品块获得了预计长度的DNA片段(531bp),而健康犬的肠溶物样品PCR结果为 相似文献
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直接法提 取血清DNA后套式聚合酶链反应扩增乙肝病毒DNA 总被引:2,自引:0,他引:2
卢红艳 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》1998,19(2):42-45
为进一步提高HBVDNA检测水平,改良了直接法提取血清DNA技术,并用套式聚合酶链反应扩增HBVDNA。即以裂解液直接提取血清HBVDNA,用内外两对引物分别进行连续两次扩增。 相似文献
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应用聚合酶链反应(PCR)技术对244例呼吸疾病患者临床标本进行结核菌DNA检测,并同时与涂片抗酸染色结果进行比较。结果显示:112例结核标本涂片和PCR检测阳性率分别为16.1%和52.7%,两者差别有显著性(P<0.01)。94例涂阴结核标本PCR阳性达45.7%。结果表明应用PCR技术检测结核杆菌DNA具有快速敏感、特异性较高等优点,尤其对涂阴病人具有较大诊断价值 相似文献
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易序权 《佛山科学技术学院学报(自然科学版)》1996,(Z1)
聚合酶链反应(PCR)技术,现已在医学工程、疾病诊断、遗传工程、考古学及法医学等领域得到广泛应用,由于该技术具有灵敏、特异、产量高、速操作简便和容易自动化等突出优点,因此,也被应用于食品检验.本文就PCR技术的原理及在食品卫生检验中的应用作一综述. 相似文献