维生素对微生物絮凝剂REA-11合成的影响

考察了生物素、维生素B1、维生素B12等维生素对谷氨酸棒杆菌生长及生物絮凝剂合成的影响.结果表明,培养基中添加生物素对菌体的生长无明显影响,0.2 mg/L的生物素对絮凝剂的合成有一定的促进作用;维生素B1对菌体的生长有轻微的促进作用,但对絮凝剂的合成无明显影响;维生素B12对菌体的生长有一定的促进作用,0.1 mg/L的维生素B12对絮凝剂的合成有轻微的促进作用,随着维生素B12浓度的增加开始对絮凝剂的合成产生抑制作用.     

S-腺苷蛋氨酸和苏氨酸对红霉素发酵产量及组分的影响

研究了在红霉素发酵培养基中添加不同的氨基酸和不同的氨基酸组合对红霉素发酵产量及组分的影响.经3 L自动发酵罐培养考查表明,添加0.4 g/L的S-腺苷蛋氨酸和0.3 g/L的苏氨酸,使红霉素的发酵单位和红霉素A含量分别提高了8.3%和13.1%,红霉素B和红霉素C的含量分别降低了49.5%和40.2%,产品质量完全符合2010版中国药典的要求.     

基本培养基中芳香族氨基酸和维生素对D-核糖生产的影响

考察了芳香族氨基酸和维生素对转酮醇酶缺失的枯草芽孢杆菌生长以及D-核糖生产的影响.实验结果表明:L-酪氨酸、L-色氨酸、L-苯丙氨酸、生物素、烟酸、吡哆醛的添加能改善菌体生长,提高D-核糖产量,特别是烟酸作用尤其明显.在单因素实验基础上,采用响应面分析方法对培养基中的维生素添加量进行了优化,确定最佳培养基组成.在此优化培养基中D-核糖质量浓度达到(23.4±0.39)g/L,与预测结果一致,是不添加维生素时核糖产量的2.31倍,D-核糖对葡萄糖的得率达到0.353 mol/mol.     

氨基酸及金属离子对林肯霉素发酵的影响

通过改变基础发酵培养基中的金属离子和氨基酸种类及浓度,研究其对林肯链霉菌的菌体浓度及发酵液生物效价的影响.单因素实验结果表明,在基础发酵培养基中添加0.02g/L氯化锰、0.02g/L钼酸钠、0.15g/L硫酸镁和0.30g/L硫酸锌,调节初始pH为7.0,按6.7%的接种量接种,于30℃,220rpm的恒温振荡培养箱中培养48h后,再依次添加0.06%谷氨酸、0.10%酪氨酸、0.15%多巴和0.06%甲硫氨酸,再于30℃,220rpm的恒温振荡培养箱中培养5d.菌体浓度可达91%(16 000μg/mL),林肯霉素发酵液生物效价为4 200U/mL.     

氨基酸对芽孢杆菌ATCC21616产腺苷的影响

研究了腺苷合成途径中不同前体氨基酸对芽孢杆菌ATCC21616产腺苷的影响。其中谷氨酸对腺苷合成的促进作用最大,能提高产苷30%以上。谷氨酰胺、丝氨酸、苏氨酸和甲硫氨酸也能促进腺苷合成,分别提高16%,14%,10%和6%。进一步研究添加谷氨酸后发酵液中NH4 浓度、有机酸浓度和胞内NAD 浓度的变化,发现添加谷氨酸能提供稳定的NH4 供应,并提供重要的代谢中间物α-酮戊二酸。同时,发酵液中乙酸和丙酮酸的浓度比对照低,胞内NAD 浓度较高,糖酵解生成的丙酮酸能顺利地进入TCA循环,从而能为菌体和腺苷合成提供充足的能量和前体,促进腺苷的合成。     

优化甲硫氨酸补料策略提高重组毕赤酵母G12-CBS合成S-腺苷甲硫氨酸

重组毕赤酵母G12-CBS经代谢工程改造,可高效表达重组S-腺苷甲硫氨酸(SAM)合成酶,并弱化了SAM转化途径的关键酶β-胱硫醚合成酶,是一株优良的SAM高产菌。为了利用G12-CBS高效合成SAM,需对前体(甲硫氨酸)的补料策略进行优化。首先在摇瓶中考察了不同甲硫氨酸(L-Methionine,L-Met)添加量对于G12-CBS的影响,发现每24hL-Met补加量超过3mg/mL时,会影响重组菌生长和SAM合成。在15L发酵罐中优化L-Met的补料速率,当外源补料速率为0.4g/(L·h)时SAM产量最高,分别比补料速率为0.2g/(L·h)和0.6g/(L·h)时提高22.2%和31.8%,达到13.01g/L,比出发菌最高产量提高54%。代谢物及酶活测定的结果表明,较低的L-Met补料速率(0.2g/(L·h))导致前体供应不足而影响SAM合成,过高的补料速率(0.6g/(L·h))可能会抑制三羧酸循环,并且影响氮源的摄取和利用,从而导致菌体生长和产物合成受到抑制。     

无机盐MgCl2和微量金属离子Zn2+对克拉维酸产量的影响

对本实验室UV诱变获得的棒状链霉菌Streptomyces clavuligerus B71-14在优化培养基配方的基础上,考察不同微量金属离子对克拉维酸发酵产量的影响,确定Zn2 对其发酵产量有比较明显的促进作用.进一步考察不同添加浓度MgCl2和Zn2 对克拉维酸合成趋势的影响,确定在本实验发酵培养基中MgCl2和Zn2 的最佳添加量分别为1.5 g/L和0.05 g/L最佳添加浓度,并在最适添加浓度下考察其对发酵代谢过程参数的影响,其最高产量与不添加相比分别提高了45.76%和63.10%.     

一株新型花生四烯酸生产菌株高山被孢霉LU166的形态调控及维生素培养优化

以本课题组自主分离并鉴定的一株花生四烯酸(arachidonic acid,ARA)生产菌株,即高山被孢霉(Mortierella alpina)LU166为研究对象,首先利用凹槽摇瓶培养,较为稳定地将菌体形态控制为刺突状小球,这一形态比絮状和大球状更有利于油脂和ARA的积累.在此基础上优化了4种B族维生素(VB_1、VB_(12)、生物素和泛酸钙)的添加量,并复合添加优化后的维生素浓度,最终获得的菌体生物量、油脂和ARA产量分别达到24.74,12.66和6.46g/L,相比对照组分别提高了10%,30%和16%.     

枯草芽孢杆菌利用脂肪酸酯和氨基酸合成脂肽

利用脂肪酸酯为碳源培养枯草芽孢杆菌(B.subtilis)ATCC 6633合成脂肽的研究结果表明:6种食用油脂为碳源培养B.subtilis ATCC 6633均可合成脂肽.以食用油脂主要成分三油酸甘油酯为碳源时,谷氨酸作用下脂肽产量可从95mg·L-1提高到183.5mg·L-1.采用稳定性同位素技术发现菌体主要利用三油酸甘油酯水解产物甘油进行菌体和脂肽合成,谷氨酸的添加提高了脂肪酸酯利用率,促进碳源流向脂肽合成,谷氨酸则流向菌体合成,从而使生物量和脂肽产量提高.     

大熊猫饲粮氨基酸平衡的度量

采用氨基酸比值系数评分（SRC）法，对亚成体大熊猫两种配方饲粮的氨基酸营养价值进行了评价。结果发现：两种配方饲粮的SRC得分分别为84．60和84．38，均能满足大熊猫对饲粮蛋白的需求，另外，找出了两种配方饲粮的第一限制性氨基酸（苏氨酸）和第二限制性氨基酸（缬氨酸），并计算出了各自的强化添加量；A、B配方的苏氨酸强化添加量分别为49．16、47．78mg/(g pr)；缬氨酸强化添加量分别为65．37、64．44mg/（g pr)。最后，探讨了进一步平衡饲粮氨基酸的3种方案。