水稻细胞质雄性不育系小孢子发育过程中的同工酶分析

以新选育出的籼型水稻细胞质雄性不育系马协Ａ有其相应保持系马协Ｂ为材料,分别取不育系和保持系处于花粉母细胞形成期、减数分裂４分体时期、单核期、２核期、３核期的花药进行过氧化物酶同工酶、细胞色素氧化酶同工酶电泳分析及酶活性测定分析。不育系与相应保持系比较发现,不育系过氧化物酶同工酶电泳酶谱带型丰富,酶活性较高;细胞色素氧化酶同工酶电泳酶电泳酶谱带型较小,酶活性较低。这现象是从单核期花药开始表现,并随发     

小麦不同细胞质雄性不育系过氧化物酶同工酶的比较研究

采用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳,对小麦几种细胞质雄性不育系及同核保持系的萌动胚、单核早期花药、二核——三核期花药的过氧化物酶同工酶酶谱进行分析,结果表明:不育系与保持系之间的酶谱差异以萌动胚最小,二核——三核期花药最大,同时,不同细胞质类型及同一细胞质类型的不育系间,酶谱也存在一定差异.     

珍汕97不育系和保持系水稻花粉发育过程中RNA含量变化的研究

采用组织化学方法，对珍汕９７水稻不育系及保持系的花粉发育过程进行分析，结果表明从幼小的单孢花粉到单核边位出现中央大液泡时期不育系花粉细胞ＲＮＡ含量与保持系无显著差异，单核末期不育系开始败育，双核期ＲＮＡ含量与保持系双核期花粉细胞相比有显著下降，说明ＲＮＡ含量下降是珍汕９７不育系花粉败育的一个重要性生理特征，不育系花粉在单核末期以前发育是正常的。     

水稻孢子体,配子体雄性不育系小孢子败育时期花药线粒体蛋…

利用ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳分析了水稻孢子体雄性不育系珍汕９７Ａ，保持系珍汕９７Ｂ，ＦⅠ代汕优６３和配子体雄性不育系丛广４１Ａ，保持系丛广４１Ｂ，Ｆ１代广优青在小孢子败育时期的花药线粒体蛋白质，结果表明，在这两种类型的组合中，不育系同保持系，Ｆ１代的带型差异很大。，保持系的带型和Ｆ１代的带型差异较小。其中，汕优６３比珍汕９７Ｂ多１条分子量为３１０００的多肽带，广优青比丛广４１Ｂ多１条分子量为４３     

水稻细胞质雄性不育的分子机制研究：不育系,保持系苗期基因表达差 …

应用ｍＲＮＡ差异显示技术研究珍汕９７,马协和丛广４１等３套水稻细胞质不育系及保持系在二叶苗期基因表达情况,发现这３套材料的不育系和保持系在苗期都存在基因表达的差异,且基因表达的差异情况各有特点。     

马协杂交稻不育系和保持系花粉发育的细胞学比较

对湖北马协型杂交稻不育系Ａ和保持系Ｂ从花粉母细胞至花粉发育过程各时期进行了细胞学的比较观察。醋酸洋红染色结果表明马协Ａ和马协Ｂ都能顺利地通过花粉母细胞减数分裂的各个时期。采用改进的快速银染法对花粉粒发育的细胞学观察,表明马协Ａ的败育主要发生在二核期末至三核期初之间,先是营养核解体,生殖核后解体。说明马协Ａ是一种新型的细胞质雄性不育系,对快速银染法的优越性和马协Ａ的败育途径进行了讨论。     

普通小麦T型、E型细胞质不育系和太谷核不育系小孢子发育细胞形态学的比较观察

通过对小麦E型不育系和太谷核不育系花粉发育过程的观察,与过去对T型小麦不育系的观察加以比较,发现三种不育类型的小麦花粉败育过程大体相似,但三种不育类型也存在差异。用细胞化学方法对E型不育系及其保持系花粉细胞的细胞色素氧化酶的分布和活性进行了初步观察,结果发现不育系比保持系酶活性低,酶颗粒少。用I—IK对E型不育系及其保持系花粉进行染色,发现保持系花粉染成深蓝色,淀粉颗粒多,不育系花粉呈棕红色,几乎无淀粉颗粒。     

酵母二型性菌体的蛋白质电泳分析

用不连续ＰＡＧＥ对酵母二型性菌体培养过程中可溶性蛋白质进行电泳分析，发现有５条谱带只在菌丝体形态中显出，单细胞形态中未见显出；还有６条在ｙｃｅｌｉａｌ中蛋白质谱带粗，染色深，在Ｙｅａｓｔ中蛋白谱带细，染色浅。这些差异带分别出现在（ＭＨ４）２ＳＯ４沉淀的０％￣５０％或５０％￣７５％级分中。     

水稻孢子体雄性不育系小孢子发育过程中的蛋白质分析

以孢子体雄性不育系马协Ａ，马协Ｂ，马协６３和珍汕９７Ａ，珍汕９７Ｂ，汕优６３９Ｆ１）为材料，对小孢子发育的共粉母细胞时期四分体时期，单核期，二核期，三核期的花药蛋白质ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析。结果表明；在马协型细胞质雄性不育系中，有１２种多肽的表达具有时序特征，其中９种多肽可能与马协Ａ雄性不育有关；在野败型型细胞质雄性不育系中，有１０种多肽的表达具有时序特征，其中６种多肽可能与珍汕９７Ａ雄性不育有关。     

甘蓝型油菜雄性不育材料S90—8—7的获得及细胞学研究

从甘蓝型油菜与诸葛菜属间杂种后代中获得一个芥酸含量低、亚油酸含量较高的雄性不育材料S90— 8—7.细胞学研究表明 ,S90— 8—7的染色体数为 2n =38,其花药发育受阻于四分体至单核花粉期 ,属单核败育型 .小孢子发育到单核期后 ,不再向前发育成为二核期和三核期花粉 ,而是逐渐退化以至解体 .在减数分裂后期Ⅰ /末期Ⅰ一些细胞出现落后染色体或染色体桥 .不育系绒毡层延迟退化 ,一直到单核小孢子晚期才迅速解体 .初步认为S90— 8— 7可能是一个细胞核雄性不育材料 ,其不育性至少受一对隐性基因控制 .     

中国马褂木生活精细胞的分离及观察

成熟的中国马褂木花粉为二细胞型花粉。水合后，花粉内的生殖细胞分裂成一对精细胞。花粉培养液为１０％蔗糖的ＢＫ。培养环境为２４℃～２６℃，培养时间为６～８ｈ。本次研究应用荧光染色与冬青油透明技术观察了花粉中的营养核和生殖细胞，及后来的两精细胞。用同样的方法，也观察了精细胞在花粉管中的运动。成对的精细胞可以从花粉管中释放出来。用ＦＤＡ检测表明这些精细胞仍具有活力。     

水稻“三系”花药培养比较研究

对滇型水稻不育系、保持系和恢复系作了花药培养,所用材料是花粉处在单核中、晚期的花药,最后均获得了花粉植株。三个系的愈伤组织诱导率和绿苗分化率基本接近,其总趋势也与常规花培一致,但略低于常规杂种F_1和F_2的频率。1980年四个不育系愈伤组织诱导率平均为1.85％,绿苗分化率平均为21.5％;保持系的相应值为1.01％和23.8％。1981年三个不育系愈伤组织诱导率平均为3.26％,绿苗分化率平均为28.5％;三个保持系的相应值为2.38％和24.4％;三个恢复系的相应值为1.58％和27.6％;而六个常规F_1和F_2的平均相应值为3.95％和28.8％。     

普通小麦热激处理后育性变化和A、T型CMS品系不育机理的初探

用普通小麦的不育系和保持系为材料,经高温处理以后,提取其线粒体多肽和可溶性蛋白做SDS-PAGE分析,发现不育系与保持系在热激后其线粒体多肽的电泳图谱均有相互趋同的现象.育性不稳定的A型繁91小麦雄性不育系在热激后有明显的可育度提高现象.育性稳定的T型细胞质雄性不育(CytoplasmicMaleSterility,CMS)品系及其保持系经短时间热激后没有明显育性变化.由未经热激处理的对照电泳分析可见,A型不育系、T型CMS品系花粉发育到单核期向双核期转变时,其线粒体多肽较其相应保持系明显减少,表明到此时期不育系细胞的线粒体结构与功能已明显丧失.     

普通小麦热激处理后育性变化和A、T型CMS品系不育机理的初探

用普通小麦的不育系和保持系为材料,经高温处理以后,提取其线粒体多肽和可溶性蛋白做SDS-PAGE分析,发现不育系与保持系在热激后其线粒体多肽的电泳图谱均有相互趋同的现象.育性不稳定的A型繁91小麦雄性不育系在热激后有明显的可育度提高现象.育性稳定的T型细胞质雄性不育(Cytoplasmic MaleSterility,CMS)品系及其保持系经短时间热激后没有明显育性变化.由未经热激处理的对照电泳分析可见,A型不育系、T型CMS品系花粉发育到单核期向双核期转变时,其线粒体多肽较其相应保持系明显减少,表明到此时期不育系细胞的线粒体结构与功能已明显丧失.     

K型和冈型水稻线粒体DNA的AFLP分析

用264个随机引物(E11,M24)对K型和冈型水稻(Oryza sativa L.)的不育系、保持系和F1代线粒体DNA进行AFLP分析,共筛选到了37对扩增效果较好的引物,显示出9条可能与K型水稻雄性不育相关的差异带,3条可能与冈型水稻雄性不育相关的差异带.其中引物组合E10M8(EcoR Ⅰ-ATA×Mse Ⅰ-AGC)扩增后,K型和冈型水稻不育系、F1代几乎在750 bp左右的位置都同时表现出了差异条带而在保持系相应位置表现为缺失,它与"缺陷型不育"假设一致.由此证明了K型和冈型水稻不育系线粒体DNA的特异性及其与雄性不育的相关性,为回收克隆等后续工作奠定了基础.     

萝卜叶绿体类囊体膜蛋白质与雄性不育

采用双向电泳技术比较了萝卜7416A、64A 两个不育系及其保持系三个不同发育时期(幼苗期,肉质根膨大期和开花期)的叶绿体类囊体膜蛋白的差异。结果表明:(1)不育系与保持系在单向 SDS—PAGE 中,多肽带数目相同,仅个别条带染色深浅有别;而双向电脉中则可见有明显差异。(2)双向电泳图谱上,两个不育系与相应保持系在三个发育时期中,其2(?)～32kd 处均出现明显差异;(3)在幼苗期和肉质根膨大期的差异表现在分子量较大的28～67kd 之间的多肽,其 pI 太多在6～7之间;而在开花期则多在分子量较小的22～32kd 的多肽上表现差异,pI 在5～6之间。讨论了上述差异与雄性不育的关系。     

诸葛菜花粉不同发育时期特异性蛋白多肽研究

对诸葛菜(Orychophagmus violaceus)花粉不同发育时期蛋白多肽进行双向电泳，结果发现花粉发育的3个时期出现蛋白多肽点的数量为：单核期121个，二核期192个，三核期275个,3个时期共有(指等电点和分子量相同)的蛋白多肽点有100个．各时期特有的蛋白多肽点分别为：单核期9个，二核期15个，三核期110个。三核期蛋白多肽点数量和特有蛋白多肽点数量的大量增加，说明诸葛菜花粉发育晚期蛋白表达异常活跃，为受精提供了物质上的准备，同时还发现不同发育时期的花粉，其相应蛋白多肽的含量有增有减。     

高粱花药内游离脯氨酸、总氨基酸含量与育性的关系

测定结果,在减数分裂期三系花药内游离脯氨酸含量都很少,相差无几,而到了单核期三系花药内游离脯氨酸含量差异较大,其含量保持系是不育系的13.5倍,恢复系是不育系的11倍。从减数分裂期进展到单核期花药内游离脯氨酸的含量,不育系减少了50％,而保持系和恢复系分别增加了12.5倍和6.33倍,此表明花药内脯氨酸是在减数分裂之后从四分体期开始随着花粉粒的充实、长大而迅速增加积累的。脯氨酸能为花粉的萌发和花粉管伸长提供氮源和能源,在花粉萌发过程中脯氨酸被直接用于蛋白质合成,而且脯氨酸很容易转化为同族的其它氨基酸,氨基酸又是合成蛋白质的原料。所以缺少脯氨酸必引起蛋白质合成受阻,从而进一步影响花粉粒的成长发育等生理活动,并影响其育性。因此,我们认为,高粱花药败育是在减数分裂后花粉形成过程中发生异常而形成了干瘪无花粉粒的花药导致败育的。不育系中的脯氨酸含量的减少也是在此时期发生的,并且花药的败育和脯氨酸含量的减少是同步进行的。因此,脯氨酸的含量与花药的败育有着密切的关系。     

萝卜雄性不育系花药发育的细胞形态学研究

选用５种萝卜雄性不育系为材料，以相应保持系作对照，进行细胞形态学研究。结果表明，萝卜雄性不育系小孢子败育有两种方式：１．４７５Ａ花药发育受阻于孢原细胞分化期之前，不产生孢原细菌，也不分化形成花粉囊，接近开花期时花药已畸形。２．２６２Ａ、北京白Ａ、春红Ａ、１３４Ａ花药发育受阻于单核花粉期。     

羊草(Leymus chinensis(Trin)Kitag.)的小孢子发生和雄配子体形成

本文研究了羊草小孢子发育和雄配子体形成,主要结论如下:(1)小孢子母细胞减数分裂过程中的胞质分裂为连续型。四分孢子为平面型,单核小孢子第一次有丝分裂形成生殖细胞和营养细胞,它们之间有明显的细胞壁,对PAS染色和苯胺兰染色诱导荧光均呈负反应,成熟花粉粒为三细胞,细胞内贮藏丰富淀粉粒,(2)药璧发育为单子叶型,绒毡层细胞属分泌型,母细胞减数分裂时绒毡层细胞具一或二核,在单核小孢子早期,绒毡层细胞有向花药腔肥大增生和绒毡层细胞互相融合形成变形绒毡层的现象。