植物内源激素对原生质体培养的影响

以烟草试管苗叶，美味猕猴桃，毛花猕猴桃子叶愈伤组织以及玉米叶片为材料，进行了内源激素水平的测定和原生质体培养的研究。结果表明，高水平内源玉米素核苷含量和高ＺＲ与吲唑乙酸质量比有利于原生质体再生细胞的分裂；高水平内源脱落酸对再生细胞分裂有抑制作用，内源ＩＡＡ，ＺＲ和ＡＢＡ含量对原生质体培养的影响在不同种之间存在差异。     

黑脉羊肚菌培养条件选择及原生质体的制备

探讨了黑脉羊肚菌的培养条件和原生质体的制备.结果表明,洋葱液体培养基适合黑脉羊肚菌生长.培养3d的黑脉羊肚菌菌丝体在30℃下,用4%溶壁酶酶解2 5h,原生质体数目为2 53×106个/mL.     

绣球菌原生质体制备及再生条件的初步研究

为进一步改善绣球菌栽培特性、提高栽培产量,对绣球菌原生质体制备与再生条件进行了初步探索.以绣球菌原生质体再生量为指标,对等渗剂、酶反应温度、pH和反应时间等影响因素进行了优化.结果表明,采用2%的溶壁酶溶解绣球菌菌丝细胞壁,制备原生质体的最佳条件是,以0.6 mol/L蔗糖为等渗剂,在30℃、pH值6.0环境下反应3 h.在此条件下,原生质体的再生量为11 850个/mL.     

烟草K326叶肉原生质体培养再生植株及影响因素的研究

以烟草K326无菌苗为材料,成功地将烟草叶肉原生质体培养出再生植株.并同时就烟草叶肉原生质体的酶解条件、培养方法及培养基中的激素组成等因素对植株再生的影响进行了研究和探索.     

不同条件对产黄青霉菌原生质体制备率与再生率的影响

本文研究了不同菌龄、预处理时间、酶解时间、酶浓度等对产黄青霉菌原生质体制备率与再生率的影响,确定了有利制备率与再生率提高的最佳条件。     

四季樱草叶片原生质体植株再生的研究

以四季樱草叶片为材料进行原生质体培养。使其形成再生植株．结果发现，不同的植物生长调节剂对原生质体培养和植株再生有很大的关系，其中B5培养基附加KT0．5(mg／L) 2．4-D2 甘露醇0．65有利于细胞旺盛分裂，MS培养基附加ZT3 6BA0．5有利于芽的分化．     

平菇原生质体制备、再生及灭活研究

紫孢侧耳、糙皮侧耳和佛罗里达侧耳的原生质体制备与再生的最佳条件为：用１％溶壁酶＋０．５％蜗牛酶的混合酶液酶解培养３～４天的菌丝体，１．５小时后，原生质体产量均可达１０￣（１０）个／Ｌ；三种侧耳的最佳再生培养基分别为ＳＭ、ＭＰ和ＲＰ，再生率分别为０．６１％、０．６７％和０．７６％。随着紫外线对原生质体处理时间的加长，再生率逐渐下降，当处理４ｍｉｎ时，再生率接近零。     

植物原生质体分离和培养中几个问题的探讨

以植物根、茎、叶、叶柄作为原生质体的分离材料，经过分离收集在一定条件下才能培养获得完整的原生质体，原生质体培养基的渗透压应与酶液的渗透压相等．     

刀豆(Canavallia ensiformis)叶肉原生质体培养与植株再生

用刀豆原生质体为材料,从培养分化开始,经过无菌苗的培养、酶解、原生质体分离、原生质体培养及愈伤组织培养五个阶段,长成完整植株,整个周期为217d。本文对整个培养过程中的条件作了详细探索和讨论。     

两种小麦的原生质体培养再生植株

报道两种基因型小麦昌乐5号和山农587胚性悬浮细胞系的建立和原生质体再生植株。小麦昌乐5号和山农587的胚性愈伤组织继代一年以后形成部分颗粒状和粉粒状结构,可用于悬浮培养。当分散好、生长快的胚性悬浮细胞系形成后,即可作为原生质体培养的材料。较长时间的悬浮培养容易使材料的胚性丧失,昌乐5号的胚性悬浮细胞系20天左右建成,其原生质体再生植株的频率为14/10~5(再生植株数/植板的原生质体数);而山农587的悬浮培养物需5个月以后才能用于原生质体培养,其原生质体再生植株的频率仅为4/10~6。     

应用滋养和包埋技术进行籼稻原生质体培养和植株再生

从几个籼稻品种不同发育阶段的幼穗分离出密度平均为２２×１０５个／ｍＬ～４６×１０５个／ｍＬ的原生质体。将这些原生质体包埋在藻酸钠颗粒里并分别在粳稻愈伤组织滋养下培养和没有愈伤组织滋养。在这两种培养条件下原生质体稳定,分裂频率分别达到４８４％和３８８％,群体存活率达到５３％和４７％,愈伤组织绿苗分化率达到７１６％和６２３％。这两种方法优于常用的琼脂糖包埋法和琼脂糖颗粒法。     

L-甲硫氨酸产生菌M0658原生质体形成及其再生条件的研究

以产L-甲硫氨酸芽孢杆菌M0658为出发菌株,考察了各种因素对原生质体形成和再生的影响．在原生质体形成和再生的最佳条件下,M0658原生质体形成率和再生率分别达到96．4％和75．3％,并在光学显微镜下观察了原生质体和原菌的形态差别．     

一株耐盐性酵母的原生质体化及再生条件的优化研究

对一株耐盐性酵母Zygosaccharomyces rouxii的原生质体化及再生条件进行了实验研究.结果表明:用0.5 mg/mL(10 unit/mL)细胞壁溶解酶zymolyase20T在1.0~1.5 mol/L山梨糖醇渗透压调节剂的浓度范围内,原生质体化率可达99%以上,再生率在2%~11%之间,而且用磷酸钾缓冲液比用Tris-HCl缓冲液再生率高.在山梨糖醇浓度1.5 mol/L,zymolyase20T浓度0.5 mg/mL,磷酸钾缓冲液0.1 mol/L(pH6.0)时,30℃、60 min,再生率达30%以上.     

不同物理条件对南方紫花苜蓿原生质体游离的影响

以选育的XN-1型紫花苜蓿种子发育5~7天的无菌苗叶片为材料,研究了不同的材料预处理技术、渗透压稳定剂、质膜稳定剂等因子对其原生质体游离的影响,结果表明:以在CPW13g/L液中预质壁分离1h最为有效,可明显提高原生质体的完整性,完整产率达到14.02×106个/g;渗透压稳定剂以0.6mol/L葡萄糖最好;质膜稳定剂以0.1%2-(N-吗啉)-乙烷磺酸(MES)最好.     

链霉菌702原生质体的制备和再生条件研究

为了确定链霉菌702菌株原生质体制备和再生较优组合条件,以链霉菌702菌株为试验材料,试验设计以单因素和多因素多水平的正交试验。在单因素试验结果中探索该菌的对数生长期为35 h~50 h,在菌丝体培养基中添加1.0%甘氨酸有利于该菌原生质体制备和再生;正交试验分别以影响该菌原生质体制备和再生的菌丝体培养时间、溶菌酶使用浓度、酶解温度和酶解时间的四因素三水平的L9(34)正交试验,试验表明:链霉菌702菌株原生质制备和再生较优组合为A2B2C3D1,即菌丝体培养时间为43 h,溶菌酶浓度为2.0 mg/mL,酶解温度为37℃,酶解时间60 m in,原生质体的制备率和再生率分别达到96.5%和27.8%。本试验为该菌进一步进行原生质体诱变打下良好的基础。     

影响小麦原生质体培养因素的研究

小麦胚性愈伤组织酶解５小时后，原生质体产率可达６．３×１０６ｇ．ｆｗ－１，酶种类和浓度对小麦原生质体的产率有影响小麦原生质体对不同浓度渗透剂的适应范围较广，在添加０．３ｍｏｌ·Ｌ－１０．７ｍｏｌ·Ｌ－１甘露醇、山梨醇的培养基上，存活率超过５０％所试培养基中，ＫＭ８Ｐ效果最好，实验表明可能与含丰富的附加成分有关除高浓度精胺外，小麦原生质体的存活率随腐胺、精胺浓度的增加而上升，但对原生质体的分裂频率影响不大在上述最佳条件下，小麦原生质体在培养３５天后出现第一次分裂，２０天后统计分裂频率为２５．６％，３个月后植板率为２８％，并形成较多的愈伤组织