接种密度对Vero细胞在微载体表面生长的影响

研究了接种密度对Ｖｅｒｏ细胞在微载体表面生长行为的影响,发现培养过程中所获得的细胞最高密度随接种密度的增加而有所提高,当细胞的表面接种密度高于１．０×１０＾５ｃｅｌｌｓ／ｍｇＭＣ时,因贴壁后细胞扩展受到限制而不利于进入对数生长期。就整个Ｖｅｒｏ细胞培养过程,适宜的表面接种密度为３×１０＾－４－７×１０＾４ｃｅｌｌｓ／ｍｇＭＣ,此时可以获得较高的比生长速率和细胞增殖倍数。     

Vero细胞的微载体培养——放大过程中的接种工艺

概述了用微载体系统培养贴壁细胞放大过程中的接种方法,研究了球转球的工艺条件,并建立了球转球的动力学模型。用此方法成功地在国产５０Ｌ生物反应器中培养Ｖｅｒｏ细胞,细胞密度达１．１×１０＾７ｃｅｌｌｓ／ｍＬ。     

磺胺嘧啶的极谱伏安行为研究

通过对磺胺嘧啶在多种底液中的极谱伏安行为研究，发现磺胺嘧定在ＢＲ缓冲溶液（ｐＨ４．２）和ＨＡｃ－ＮａＡｃ缓冲液（ｐＨ４．３２）中产生良好的还原峰，峰电位分别为－０．７６Ｖ和－０．７９Ｖ（ｖｓ．ＳＣＥ），在这两种底液中，峰电流或其导数峰高与磺胺嘧啶浓度在５×１０＾－７～４×１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ和５×１０＾－６～３×１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ范围内呈良好的线性关系，检测限为８×１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ，可望用于     

限制性核酸内切酶PstⅠ星号活力的研究

研究了温度、酶浓度、反应时间、几种有机溶剂等因素对ＰｓｔⅠ星号活力的影响,并在有利于星号活力的反应条件下测定了星号活力及原活力的Ｋｍ分别为１．４６×１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ和１．０２×１０＾－８ｍｏｌ／Ｌ,Ｖｍａｘ分别为２．８６×１０＾－１８ｍｏｌ／ｓ和３．０６×１０＾－１５ｍｏｌ／ｓ。     

光亮裸甲藻的生长特征研究

在实验室条件下获得光亮裸甲藻的最大生长率Ｋｍａｘ为１．８４（第２天），指数生长时期的Ｋ值为０．９（第６天），第９天后，当细胞密度达３．６×１０＾３ｃｅｌｌｓ／ｍｌ时，Ｋ趋近于０。在Ｆ－Ｆ４培养液中，这种甲藻的细胞密度和生长率差别不大，Ｆ／８－Ｆ／６４培养液中藻细胞密度和生长率在第４或第５天后明显下降，这显然与培养液中的营养盐馈乏有关。     

在表面活性剂存在下泰尔登的电分析化学特征研究

在ＰＨ７．００缓冲溶液中，当有０．００２０％ＯＰ在在时，泰尔登在－１．９５Ｖ产生一灵敏极谱波，利用此波可测定痕量泰尔登，检测下限为５．４×１０＾－９ｍｏｌ／Ｌ。用恒电位库仑法，计量库仑法和循环伏安法测得反应电子数为２，吸附量为１．１７×１０＾－１０ｍｏｌ／ｃｍ＾２，扩散系数为４．３×１０＾－５ｃｍ＾２／ｓ。     

粘虫PuA7S细胞的悬浮培养病毒增殖及其细胞克隆

粘虫ＰｕＡ７Ｓ细胞能在ＴＮＭＦＨ培养基和Ｅｘ－Ｃｅｌｌ４０５，Ｅｘ－Ｃｅｌｌ４００两种无血清培养基中实现高密度悬浮培养。在１００ｒ／ｍｉｎ搅拌条件下，ＰｕＡ７Ｓ细胞上述培养其中的最大生长密度分别为１．６５＊１０＾６细胞／ｍＬ，３．５０＊１０＾５细胞／ｍＬ和２．０２＊１０＾６细胞／ｍＬ，群体倍增时间分别为４８ｈ，４５ｈ和４２ｈ，ＡｃＭＶＰＶ能够在ＰｕＡ７Ｓ细胞悬浮系统高水平增殖，在３种培养基培养细胞     

利用选择性重原子增强的固体表面发光技术同时测定痕？…

利用ＳｒＣｌ２和Ｐｂ（Ａｃ）２作为选择性重原子微扰剂，分别诱导出吡哌酸的固体表面延迟荧光和氟哌酸的室温磷光，不经分离直接测定混合样品中的两种药物获得成功。在ｐＨ约１１的条件下测定吡哌酸的线性范围为５×１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ￣３×１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ，测定氟哌酸的线性范围为３×１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ￣３×１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ。     

影响Px细胞微载体培养因素的研究

研究了细胞生长过程中微载体的种类、浓度及细胞接种量对培养Ｐｘ细胞的影响。以ＧＴ－３为微载体，当细胞接种量为２．０×１０＾５细胞／ｍＬ，微载体浓度为２．０ｍｇ／ｍＬ，温度为２８℃时，第６天细胞密度可达１．０×１０＾６细胞／ｍＬ，为接种量的５倍，细胞生长旺盛，形态正常。     

和厚朴酚的吸附伏安法研究

和厚朴酚在０．１ｍｏｌ·Ｌ＾－ＮＨ３－ＮＨ４Ｃｌ底液中,出现一灵敏吸附伏安还原峰,Ｅｐ＝－０．２３Ｖ（ｖｓ．Ａｇ／ＡｇＣｌ）。当富集时间为３ｍｉｎ时,峰电流与和厚朴酚浓度在１．０×１０＾－８￣１．０×１０＾－７ｍｏｌ·Ｌ＾－１范围内呈线性关系,检测限为３．０×１０＾－９ｍｏｌ·Ｌ＾－１,可用于中药厚朴的测定。     

大孔明胶微载体的制备

以明胶为原料，用悬浮成球、甲苯制孔的方法制备大孔明胶微载体。考察了表面活性剂及其配比、油水比、明胶浓度、制备方式和表面修饰等对载体性能的影响。优化了制备大孔明胶微载体的条件，制得了直径为１００－３００μｍ，孔径为１０－３０μｍ的大孔明胶微载体。     

生物反应罐Vero细胞微载体灌流培养

用7L生物反应罐,3g/L Cytoedx 1,φ＝50％溶解氧,40－50r/min搅拌速度进行细胞培养,培养48h开始灌流。连续动态测定葡萄糖含量、渗透压变化及pH值,同时观察细胞形态、增殖情况。连续3批7L规模灌流培养表明,细胞贴附率高,增殖速度快,细胞形态良好,细胞群体倍增数达4．7。结果表明生物反应罐灌流培养法是一种快速、规模化制备细胞的有效方法。     

用于培养动物细胞微载体的制备

合成了两种用于动物细胞培养的微载体:葡聚糖和明胶微载体。报道了合成方法。将产物初步用于Vero细胞培养,得到了满意的结果。细胞在微载体上的附着生长良好,和目前广泛使用的Cytodex 1微载体效果相仿。当DEAE-Sephadex 1.5微载体浓度为2mg/ml时,在1.5L Celligen细胞培养器中培养120小时,细胞浓度可达1.2×10~6细胞/毫升,为接种浓度的5倍,达到了文献中报道的水平。     

生物反应器微载体系统大规模培养草鱼细胞及病毒

采用微载体GT-2在细胞培养生物反应器中悬浮培养草鱼细胞和草鱼出血病病毒。合适的工艺条件为:温度26℃,pH6.8～7.2(生长期),7.2～7.4(接毒后),搅拌转速40 r/min,溶氧(DO)40%空气饱和度。GT-2是一种较适合于草鱼细胞贴壁生长的微载体。细胞密度可达7.4×10~6 Cells/mL,病毒滴度可达8.00。     

Static three-dimensional culture of human hepatocarcinoma cell with microcarriers

Traditional monolayer culture is still the common method used in hepatocarcinoma cell culturein vitro. For lack of the structure similar to thatin vivo, it is disadvantageous in the research of the relation between structure and function. We established a three-dimensional (3-D) culture model of human hepatocarcinoma cell (BEL-7402)in vitro by using microcarrier cytodex-3 in static condition. The results of SEM, TEM, enzyme activity and flow cytometry indicated that the cells were polygonal-shaped and arranged in multilayers. Intercellular space was 0.5–2.0 μm wide where lots of microvilli could be seen. Adjacent cells were connected with desmosomes and localized membrane projects. More than 90% of the cells were viable and maintained the consumption of glucose and the expression of EGF receptor. The intracellular ALT, AST and LDH-L activities were higher in 3-D culture than those of monolayer culture. Compared with monolayer culture, this 3-D culture with the structure similar to trabecular hepatocarcinomain vivo is much more suitable for the research of the interactions of cell-cell and cell-microenvironment, and might be useful in the investigation of the mechanisms of invasion, metastasis, and multicellular drug resistance of tumor cells.     

Porous Chitosan Microcarriers for Large Scale Cultivation of Cells for Tissue Engineering： Fabrication and Evaluation

Introduction Regeneration of injured tissue on a man-made template has been used since the earlier 1980s[1]. Afterward, it was accepted as a tissue engineering technology[2,3]. Nowadays many kinds of damaged or dysfunctional tissues/organs such as bones, …     

Increased production of recombinant prourokinase with porous microcarrier cell culture by periodic pressure oscillation in a stirred tank reactor

0 IntroductionIn microbiological fermentation and plant cell cul-ture ,there are manyexamples of applying“periodic oper-ation”to enhance productivity[1-3],although the mecha-nismof this effect remains obscure .In animal cell cul-ture ,applying intermittent hydrostatic pressure could in-crease cell proliferation[4-6]orincrease enzyme activity[7].Process parameters such as temperature , pressure , pH,light intensity and nutrients concentration may be chosentointroduce physical stimuli .Cytopo…     

微载体培养Vero细胞工艺条件初探

本文研究了细胞生长过程中微载体的种类,浓度及细胞的接种量、溶解氧水平对培养Vero细胞的影响。在pH为7.0～7.4,液解氧水平为30%～50%空气饱和浓度,搅拌速度为25～35r/min,温度为37℃时,在1.5升Celligen~(TM)系统中,连续培养7天,可使细胞浓度达到2.5×10~6 Cells/ml,为接种量的12倍,细胞生长旺盛,形态正常。