松叶牡丹离体快速繁殖及瓶苗微型化培育技术研究

应用植物离体快繁技术对松叶牡丹瓶苗微型化培育技术的研究,结果表明:松叶牡丹的种子用0.1%的氯化汞灭菌5min效果最理想,成活率达到73.3%;最佳的增殖培养基配方:MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+IBA 0.05mg·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂9g·L~(-1);对松叶牡丹的壮苗情况来看,PP333的最佳质量浓度为0.5mg·L~(-1),芽苗在的培养基为MS+NAA 0.25mg·L~(-1)+PP3330.5mg·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+琼脂9g·L~(-1),植株矮壮,茎粗,叶片厚,茎叶红,根系发,有利瓶苗的花芽分化.     

白花丹参试管苗玻璃化现象的影响因素研究

为探讨不同培养条件对白花丹参组培苗玻璃化的影响,以白花丹参不育变异品种的幼嫩茎段为外植体,以MS为基本培养基,研究了KT/NAA比例、活性炭添加及琼脂浓度对防治白花丹参组培苗玻璃化现象的作用。结果表明,当KT浓度为1.5 mg·L^-1、NAA浓度为0.5 mg·L^-1、培养基中添加0.3%活性炭、琼脂浓度为0.8%时,白花丹参组培苗增殖系数较高,玻璃化率低,炼苗成功率最高。因此, MS+KT 1.5 mg·L^-1 +NAA 0. 5 mg·L^-1+琼脂0.8%+活性炭0.3%的培养基可以有效防治白花丹参组织培养中的玻璃化现象。     

大叶常绿杜鹃叶片离体培养及不定芽再生

以大叶常绿杜鹃无菌苗的嫩叶为试验起始材料,研究了其离体培养和不定芽再生的过程。结果表明:培养基为MS+ZT(1.0 mg/L)+ NAA(0.1 mg/L)时,大叶常绿杜鹃叶片可直接诱导再生不定芽,诱导率达70%; 也可以通过愈伤组织途径间接诱导出不定芽,愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D(2.0 mg/L)+KT(0.2 mg/L),增殖最佳培养基为MS+ZT(0.5 mg/L)+IBA(0.1 mg/L),愈伤组织分化的最佳培养基为MS+ZT(0.04 mg/L)+NAA(0.01 mg/L); 分化率最高为70%,分化苗数为6～10株; 生根培养基为MS+NAA(0.2 mg/L)+IBA(0.4 mg/L)时,生根率可达90%。腐殖土、黄沙、珍珠岩配比为4:1:1的混合基质较适合常绿杜鹃试管苗的炼苗移栽,成活率为90%。     

两种东方系百合组织培养快繁技术

以东方系百合索邦和西伯利亚的种球鳞片为外植体,以MS为基本培养基,添加NAA、6-BA、TDZ、KT、IBA、2,4-D等不同植物生长调节剂,筛选鳞片愈伤组织诱导、增殖、分化及再生苗生根的最佳培养基,为百合种质保存、组培快繁及脱毒奠定基础.结果表明,索邦百合在MS+IBA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织诱导效果最好,在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织增殖最好,在MS+NAA 0.3 mg/L+TDZ 0.1 mg/L+KT 0.2 mg/L培养基中分化最好;西伯利亚百合在MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L培养基中愈伤组织的诱导和增殖最好,在MS+IBA 1.0 mg/L+KT 0.5 mg/L培养基中分化效果最好.二者均在1/2 MS+NAA 0.1 mg/L+IBA 0.01 mg/L培养基中生根最好.     

苦苣菜下胚轴愈伤组织分化及试管苗培养研究

为保护苦苣菜野生资源,以苦苣菜下胚轴为材料,进行了愈伤组织诱导培养、分化培养、生根培养和试管苗移栽及定植的研究,结果表明:MS+琼脂4.8 g·L-1+蔗糖42 g·L-1+KT 0.4 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+2,4-D2.0 mg·L-1是愈伤组织诱导生长的适宜培养基;1/2 MS+琼脂4.5 g·L-1+蔗糖35 g·L-1+ZT 0.8 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1是愈伤组织块分化培养的适宜培养基;1/4 MS+IAA 0.6 mg·L-1+琼脂4.3 g·L-1+蔗糖15g·L-1是生长芽试管苗培养的适宜培养基;温室内试管苗移栽成活率为91.7%;试管苗在山林旁定植成活率为97.1%,定植试管苗的植物学性状与实生苗基本一致.     

红头兰(Tuberolabium quisumbingii)胚培养和快速繁殖

以红头兰的胚为材料,研究了红头兰的胚培养和快速繁殖技术.结果表明:培养基中无机盐的浓度和激素影响胚的萌发,在1/4MS培养基加入0.5mg/L的KT效果最佳;培养基中加入椰子水、土豆提取物、蛋白胨和活性炭均有利于胚的萌发;在继代培养中,适宜的培养基为1/3MS+6-BA2mg/L+NAA0.01mg/L+椰子水10%+蛋白胨2g/L+活性炭2g/L+蔗糖20g/L+琼脂7g/L;分化和壮苗培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L+IBA0.5mg/L+蔗糖20.0g/L+AC2.0g/L+蛋白胨2.0g/L+琼脂7g/L。     

射干幼茎愈伤组织及试管苗培养的研究

为保护野生资源,以射干幼茎为材料,应用植物组织培养技术,进行了愈伤组织培养、愈伤组织分化培养、试管苗培养和试管苗的移栽与定植的研究。结果显示,幼茎段培养愈伤组织的适宜培养基是MS+琼脂5.3 g·L-1+蔗糖38 g·L-1+2,4-D2.2 mg·L-1+6-BA 0.8 mg·L-1;愈伤组织分化无根苗培养的适宜培养基是1/2MS+琼脂5.3 g·L-1+蔗糖42 g·L-1+NAA0.05 mg·L-1+6-BA 1.4 mg·L-1;试管苗培养的适宜培养基是1/4MS+蔗糖10 g·L-1+琼脂5.3 g·L-1+IBA0.05 mg·L-1+IAA0.25 mg·L-1;试管苗移栽成活率为90.3%;定植成活率为96.0%。定植试管苗翌年正常开花结果,野生的射干的植物性状保持不变。     

香薷组织培养及快速繁殖的研究

以香薷的嫩茎段为材料,对生长点生长,生长芽分化,试管苗生根、移栽和移植进行了研究,成功地建立起香薷快速繁殖技术。试验结果表明：1/3MS+KT 0.1 mg·L^-1+IAA 0.1 mg·L^-1是生长点生长培养的理想培养基;MS+6-BA 0.6 mg·L^-1 +NAA 0.1 mg·L^-1是生长芽分化培养的理想培养基;White+IBA 0.1 mg·L^-1+IAA 0.3 mg·L^-1培养基是生长分化芽生根培养、试管苗生根继代培养和快速繁殖的理想培养基。     

中华芦荟成熟叶组织培养的研究

以中华芦荟成熟叶为外植体,接种于9组不同2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和6-苄基腺嘌呤(6-BA)浓度配比的脱分化培养基中,诱导外植体的脱分化形成愈伤组织。研究表明,中华芦荟叶愈伤组织的最佳培养基为MS+0.5mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+1.0g/L活性炭;诱导不定芽的适宜培养基为MS+1mg/L(2,4-D)+3mg/L(6-BA)+30g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.7g/L活性炭;及诱导生根的适宜培养基为1/2MS+0.2mg/Lα-萘乙酸(NAA)+20g/L蔗糖+10g/L琼脂+0.5g/L活性炭,生根率达100%.     

耐盐碱刺槐离体再生快繁体系的建立与优化

为提高耐盐碱刺槐的快繁效率,满足沿海及滨海盐碱地区绿化要求,以耐盐碱刺槐无性系"W009"和"W038"为试材,研究不同条件对耐盐碱刺槐试管苗分化和生根的影响.结果表明:两刺槐茎尖初代接种不定芽萌发率均好于茎段,"W009"离体茎尖不定芽萌发的最适培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.05mg·L~(-1),茎段不定芽萌发的最适培养基为MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1);而适合"W038"离体茎尖和茎段不定芽萌发的最适培养基则为MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1);适合"W009"不定芽增殖的培养基为MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.05mg·L~(-1),"W038"不定芽增殖的培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1);"W009"最适生根培养基为:1/2 MS+0.1 mg·L~(-1) IBA+0.2mg·L~(-1) NAA+1.0g·L~(-1)活性炭;"W038"最适生根培养基为:1/2 MS+0.3 mg·L~(-1) IBA+0.2 mg·L~(-1) NAA+1.0g·L~(-1)活性炭.     

水晶掌组织培养与快速繁殖

以多肉植物水晶掌叶片为外植体,采用MS基本培养基,附加不同的植物生长调节剂组合,研究了水晶掌愈伤组织的器官发生和植株的再生技术.实验结果表明:A1(MS+BA 3.0+NAA 0.3+3%蔗糖+0.7%琼脂)配方最为适合愈伤组织的诱导;B4(MS+BA 4.0+NAA 0.2+3%蔗糖+0.7%琼脂)配方最为适合愈伤组织的增殖;C1(MS+BA 3.0+NAA 0.2+3%蔗糖+0.7%琼脂)最为适合愈伤组织分化,芽分化较快,苗健壮,并且有丛生芽;促进生根的最佳配方为D4(1/2 MS+IBA 1.0+3%蔗糖+0.7%琼脂);组培苗经炼苗后,移栽成活率在95%以上,以此建立水晶掌试管苗无性繁殖体系.     

中国七叶树悬浮培养体细胞球形胚的增殖与发育研究

以中国七叶树(Aesculus chinensis Bunge)的胚性愈伤组织为材料,进行悬浮培养诱导体胚增殖和发育研究。在MS+2,4D(3 mg/L)+NAA(1 mg/L)+KNO3(1.9 mg/L)+蔗糖(30 g/L)的液体培养基中可获得同步化程度较高的球形胚;采用MS+2,4D(2 mg/L)+KT(0.2 mg/L)+蔗糖(40 g/L)和MS+2,4D(3 mg/L)+BA(0.5 mg/L)+蔗糖(40 g/L),两种培养基均可使体细胞胚保持在球形胚阶段;而MS+TDZ(0.02 mg/L)+蔗糖(30 g/L)可有效解除对球形胚发育的阻遏,促使子叶胚的形成;建立了球形胚增殖和分化的两个悬浮培养体系,同时跟踪观测了液体培养基的pH变化,球形胚增殖方式和球形胚启动和发育动态,以及悬浮培养过程中体胚的形态结构变化。     

山银花的组培快繁和种质离体保存研究

以山银花(Lonicera confusaDC.)嫩茎段为外植体,研究不同培养基(MS、1/2MS、1/3MS、N68、White)和植物生长调节剂(6-BA、IBA、NAA、2,4-D、BR)对其诱导、分化和增殖的影响,建立山银花的快速繁殖再生体系,并探讨在温度15～20℃条件下,不同保存培养基(MS、1/2MS、1/4MS)对种质离体保存的影响。结果表明:山银花嫩茎段分化能力较强,在培养基MS 6-BA0.5mg·L-1 IBA0.1mg·L-1上培养7d腋芽开始萌发,15d时的诱导率达到90%;以N68为基本培养基,附加6-BA0.4mg·L-1和IBA0.4mg·L-1能较好地促进芽的伸长和增殖,避免叶片发黄脱落,每30d的增殖倍数为5.0倍;生根培养基以1/2MS IBA0.2mg·L-1最好,培养30d时生根率达95%;以单株芽段为离体保存材料,在1/2MS 蔗糖20g.L-1培养基上培养30d后无菌条件下加入0.5mg·L-1硝普钠溶液,继代间隔期可以延长至180d。     

蜻蜓凤梨快速繁殖的研究

通过对蜻蜓凤梨快速繁殖进行研究,结果表明:用蜻蜓凤梨试管苗茎的中部进行诱导侧芽效果比较好,培养基为MS 6-BA3.0mg/L IBA0.3mg/L 蔗糖30g/L 琼脂7g/L;增殖阶段适宜培养基为MS 6-BA3.0mg/L IBA0.3mg/L 蔗糖30g/L 琼脂7g/L或MS 6-BA4.0mg/L IBA1.0mg/L NAA1.0mg/L 蔗糖30g/L 琼脂7g/L;生根阶段适宜培养基为1/2MS NAA0.5mg/L 活性碳0.1%.蜻蜓凤梨组培苗容易移栽成活,移栽成活率可达95%以上.     

杜仲组织离体培养研究

以杜仲(EncommiaulmoidesOliver)当年生枝条的叶片、带芽茎段为外植体,基本培养基为MS,附加不同浓度的BA、KT和NAA.最佳芽诱导培养基为:MS KT1 0mg/L NAA0 1～0 5mg/L;MS BA2 0mg/L NAA0 1～0 5mg/L,最佳芽丛增殖培养基为:MS KT2 0mg/L NAA0 1～0 2mg/L;MS BA1 0～2 0mg/L NAA0 1～0 2mg/L;MS KT2 0mg/L IBA0 1～0 2mg/L;MS BA1 0～2 0mg/L IBA0 1～0 2mg/L,单芽增殖培养基:MS KT1 0mg/L NAA0 1mg/L,生根培养基:13MS KT0 1mg/L NAA0 5mg/L.     

碳源对不同产地香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响

【目的】 探究渗透调节物质种类及其不同浓度对香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响,为提高香樟体胚诱导率、优化体细胞胚胎发生体系奠定理论基础。【方法】 以7月初在湖南省郴州、长沙、娄底及怀化市采集的香樟(Cinnamomum camphora L.)的未成熟合子胚为试验材料,分析不同碳源种类、浓度及组合方式对香樟体胚诱导、芽萌发、生根等方面的影响。【结果】 适合香樟的体胚诱导培养基为MS+1.0 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)+0.3 mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+1.0 mg/L 链霉素+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L水解酪蛋白;增殖培养基为MS+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L 水解酪蛋白;芽萌发培养基为MS+0.1 mg/L 苯基噻二唑基脲(TDZ)+0.5 mg/L 萘乙酸(NAA)+0.1 mg/L 吲哚丁酸(IBA)+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂;生根培养基为MS+1.0 mg/L IBA+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂。【结论】 经过改良,添加15 g/L蔗糖和30 g/L山梨醇的组合碳源,香樟体胚的诱导率明显提高;添加15 g/L蔗糖和15 g/L山梨醇的组合碳源处理的新植株生根条数多、主根明显,生长状况更优。     

叠鞘石斛组织培养及植株再生体系优化

以叠鞘石斛成熟种子为材料，使用IBA、6-BA和NAA共3种生长调节剂与香蕉泥和椰子汁有机物等组合，采用3因素3水平正交设计及单因素设计进行组织培养研究.结果显示，最佳叠鞘石斛原球茎培养基为MS+50 g/L椰子汁+30 g/L蔗糖+6 g/L琼脂，40 d增殖系数为6.75,分化率为84.38%;最佳叠鞘石斛壮苗生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L IBA+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+30 g/L蔗糖+6 g/L琼脂.通过该技术，可以在较短时间获得大批量优质叠鞘石斛种苗，为大规模叠鞘石斛药材生产提供基础.     

山茱萸组培快繁研究

本文旨在研究山茱萸叶片组织培养技术,建立山茱萸优良株系快速繁殖体系。选择山茱萸优良母株的不同生育时期的叶片,通过设计不同生长调节剂组合的MS培养基,对山茱萸进行快速繁殖研究。结果显示山茱萸叶片组织培养的最佳激素组合是:1/2MS+6-BA(1mg·L-1)+NAA(1 mg·L-1)+蔗糖(30 g·L-1)+琼脂(5 g·L-1)。以叶片嫩芽为外植体进行组织培养的繁殖系数最高。结论是通过组织培养技术能提高山茱萸繁殖系数,缩短繁殖周期。     

沙枣叶片愈伤组织诱导研究初报

以沙枣叶片作为外植体,以MS为基本培养基,用两种不同浓度激素的组合,筛选5组培养基进行继代愈伤组织及增殖诱导.结果表明,沙枣叶片诱导愈伤组织的最佳培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 1 mg/L kT1 mg/L 2,4-D 2 mL 25 g蔗糖 6 g琼脂(pH=5.5),诱导率达86.67%;以MS 6-BA 0.5 mg/L NAA0.5 mg/L kT1 mg/L 2,4-D 2 mL 25 g蔗糖 6 g琼脂(pH=5.5)作为愈伤组织增殖培养较理想.     

雪落樱再生体系的建立

以雪落樱(Cerasus xueluoensis)叶片为外植体,研究灭菌方式、不同激素配比组合及含糖量等因素对叶片再生的影响。结果表明,以春季充分展开的嫩叶为外植体,用0.1%Hg Cl2灭菌7 min效果较理想。筛选出MS为最适的基本培养基,并在培养基中添加20 mg/L Vc溶液,能有效缓解愈伤组织继代过程中的褐变状况;愈伤组织增殖以MS+6-BA(1.0 mg/L)+NAA(0.5 mg/L)+Vc(20 mg/L)为宜,增殖快速且生长良好;在MS+6-BA(2.0mg/L)+NAA(0.1 mg/L)+TDZ(2.0 mg/L)+Vc(20 mg/L)培养基中愈伤组织分化最理想,不定芽生长健壮;将分化健壮的不定芽接种到3/4MS+NAA(0.1 mg/L)+蔗糖(15 g/L)的培养基中生根,27 d后生根率达100%。