小麦根际拮抗性产芽孢细菌的鉴定

本文报导了３种从小麦根际分离的拮抗性产芽孢细菌，分别是枯草芽孢杆菌，蜡状芽孢杆菌和短小芽孢杆菌，它们都对小麦全病菌和棉花枯萎病菌具有明显的拮抗作用。     

短小芽孢杆菌Y106对棉花黄萎病的防治作用

短小芽孢杆菌Y106(Bacillus pumilus Y106)是从土壤中筛选分离得到的一株对黄萎病菌具有拮抗作用的细菌菌株.平板对峙实验结果显示,Y106和黄萎病菌共同培养至10d时,处理组的黄萎病菌菌落直径为3.82cm,比对照组减小了38.7%,说明Y106菌株对棉花黄萎病菌有较强的拮抗作用;在液体PDA中共同培养Y106菌和带有绿色荧光蛋白基因标记的棉花黄萎病菌Vd-gfp77,随着Y106菌浓度增加,Vd-gfp77菌液在发射光波长为530nm处的荧光吸收值从217.43下降至97.49,说明黄萎病菌液浓度减小,黄萎病菌的生长受到抑制.土壤中拮抗实验结果显示,对照组长出菌落数目约为79个,处理组长出菌落数目随着Y106浓度的增加而减少至44个,比对照组菌落数目减少44.3%,表明在土壤中Y106菌株对棉花黄萎病菌的增殖有抑制作用.进一步的实验表明,Y106菌株可使盆栽棉花黄萎病发病率从76.47%下降至52.94%.因此,短小芽孢杆菌Y106对棉花黄萎病菌有较强的抑制作用,可用于棉花黄萎病的生物防治.     

棉花黄萎病拮抗内生菌的筛选鉴定及抗菌物质研究

从棉株中分离筛选到一株对棉花黄萎病菌具有较强拮抗作用的内生细菌BSD-2.通过形态特征、生理生化特性以及16S rDNA碱基序列测定和同源性分析,鉴定其为枯草芽孢杆菌.平板对峙试验表明,BSD-2对多种植物病原真菌有抑制作用.BSD-2培养液以50 %硫酸铵沉淀所得的拮抗物粗提液,具有良好的热稳定性和酸碱稳定性,对胰蛋白酶、蛋白酶K和胃蛋白酶均不敏感,对氯仿敏感,能够有效抑制黄萎病菌孢子萌发.     

大丽轮枝菌拮抗芽孢菌株的分离、鉴定及两株菌抑菌特性研究

从新疆和硕连作棉田根际土壤中分离到146株芽孢细菌.29株对大丽轮枝菌(Verticillium dahliae Kleb)具有拮抗作用的菌株中有9株拮抗性极强.经鉴定,9株拮抗性极强的菌株中有2株属短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus),7株与枯草芽孢杆菌(B.subtilis)相近.抑菌特性实验表明:J-02和J-15的抑菌高峰分别出现在衰亡期和稳定期,对pH的耐受范围分别为5~9和7~9;J-02的热稳定性较好,J-15对温度较敏感,但100℃处理后仍有抑菌活性;J-02能够抑制大丽轮枝菌芽管伸长形成菌丝,J-15可导致大丽轮枝菌菌丝畸形,失去产孢能力.盆栽实验表明,J-02和J-15这2株拮抗菌对棉花黄萎病有明显防治作用.综合结果表明J-02和J-15均有作为棉花黄萎病生防菌的潜能.     

一株拮抗细菌所产抑菌物质的特性分析及初步鉴定

为考察一株拮抗细菌所产拮抗物质的性能及初步判断拮抗物质的类型,通过测定抑菌圈大小、硫酸铵分级沉淀、低温乙醇沉淀及茚三酮反应、双羧脲反应、莫氏实验及糖还原实验对拮抗物质特性及类型进行分析判断.结果表明,该拮抗细菌所产拮抗物质具有较好的广谱抗菌性,对炭疽杆菌、大肠杆菌、地衣芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌等细菌有较强的抑菌作用.经一系列化学反应检测,初步推断该菌株所产拮抗物质为一种糖蛋白质类物质.利用该菌株所产抑菌物质的广谱性和稳定性,进行植物病虫害防治将具有诱人的开发应用前景.     

土木香内生细菌的分离鉴定及抑菌活性检测

利用组织分离法从用药植物土木香根、茎和叶中分离得到内生细菌32株.采用纸片法对菌株进行了抑菌活性研究,并运用生理生化与分子生物学方法进行种类鉴定.抑菌试验结果表明,10株内生菌发酵液对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌以及禽多杀性巴氏杆菌均有不同程度的抑菌活性.鉴定结果表明,菌株YIR-5,YIR-7,YIR-8,YIR-9为假单胞菌属菌种,菌株YIR-3,YIR-6为沙雷氏菌,菌株YIR-4,YIS-1,YIS-2分别为水生拉恩氏菌、薄壁芽孢杆菌和蜡样芽孢杆菌,而菌株YIL-3归属于芽孢杆菌属.土木香内生细菌组成丰富,莫海威芽孢杆菌（Bacillus mojavensis）YIS-1对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和禽多杀性巴氏杆菌的抑菌活性最强.     

枯草芽孢杆菌TY7210菌株的ERIC-PCR快速鉴别

以ER IC核心序列为引物,以2株枯草芽孢杆菌基因组DNA为模板,采用PCR对T aq DNA聚合酶用量、PCR退火温度及模板DNA浓度进行优化,建立了快速鉴别芽孢杆菌的ER IC-PCR方法,并对5株芽孢杆菌进行了分析.结果表明枯草芽孢杆菌TY 7210菌株与其他芽孢杆菌菌株具有不同的指纹图谱,尤其不同于枯草芽孢杆菌(ATCC 1.1849),为芽孢杆菌的快速鉴别奠定了基础.     

西瓜根际土壤解磷芽孢杆菌的筛选及其解磷特性研究

解磷细菌能分解土壤中难溶的磷,可有效减少土壤磷的固定和缓解磷肥在土壤中利用率低的问题,因此为了获得有较强解磷性能的细菌,本研究通过平板溶磷圈法和钼锑抗比色法筛选出了一株具有较强解磷性能的细菌.通过对该菌株形态特征的观察和对其生理生化特征的分析以及对其16SrDNA基因序列的比对,确定该菌为枯草芽孢杆菌,并将其命名为GS...     

一株产细菌素物质芽孢杆菌的筛选和鉴定

从石油污染的土壤中筛选出一株能产生细菌素类物质的芽孢杆菌,命名为SLY—3。该菌株分泌的活性物质抑菌活性好,对细菌主要是革兰氏阳性菌、霉菌都有抑制作用。从表型、生理生化反应及16S rDNA序列比对方面进行分析,最终确定菌株SLY—3为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。培养基初始pH为7.0,28℃振荡培养24 h后,发酵产物抑菌活性最高。     

苏云金芽孢杆菌aiiA基因在枯草芽孢杆菌中的表达

根据NCBI上已公布的枯草芽孢杆菌BS168菌株的β-1,4-glucanase(eglS)基因以及苏云金芽孢杆菌的aiiA基因序列,设计引物并扩增得到eglS基因的启动子、信号肽序列和aiiA基因.构建重组表达载体Ps4-eaiiA,转化枯草芽孢杆菌BS168,得到枯草芽孢杆菌工程菌BS168/Ps4-eaiiA.该工程菌诱导发酵后经SDS-PAGE和Western blotting分析表明:aiiA基因实现了在枯草芽孢杆菌中的表达.对胡萝卜软腐欧文氏菌进行马铃薯的抗病性实验,结果表明aiiA基因在枯草芽孢杆菌中表达的AiiA蛋白对胡萝卜欧文氏杆菌表现出一定的抗病性.     

根癌农杆菌介导的木霉插入转化及其应用

根癌农杆菌介导的遗传转化法(ATMT)已广泛地应用于真菌的转化研究,该方法具有操作简单、转化效率高和转化子遗传稳定等特点。木霉作为土传植物病原菌的重要生防真菌,对其生防分子作用机制方面的研究也越来越受到关注,目前所面临的问题是如何基因突变和基因替换。ATMT法为木霉(Trichodermaspp.)的分子生物学研究提供了一个强有力的工具,在木霉的插入突变、遗传转化以及基因标记和克隆方面起着重要的作用。本文综述了根癌农杆菌介导木霉遗传转化的原理、特点、转化方法和应用,并且对有关发展趋势进行了展望。     

解淀粉芽孢杆菌HZM9菌株发酵液的抑菌谱及稳定性测定

【目的】将前期分离到的1株具有高效植物促生作用和生物防治作用的解淀粉芽孢杆菌HZM9开发为可以进行田间应用的菌剂。【方法】首先以10种土传病害病原菌为指示菌,用生长速率法测定了HZM9菌株发酵液对各病菌的抑制作用; 又以榉树枯萎尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)为指示菌,测定了发酵液在不同条件下的稳定性。【结果】供试的10种土传病害病原菌经菌株HZM9发酵液处理后,菌丝生长均受到明显的抑制,特别是对尖孢镰刀菌和大豆菌核(Sclerotinia sclerotiorum)的抑菌率均达90%左右。菌株HZM9发酵液有很好的热稳定性,温度升至80 ℃后其抑菌作用变化十分微弱,抑菌率仍然保持在80%以上; 100 ℃处理30 min抑菌率会下降到66.55%,100 ℃处理120 min,抑菌率仍能达到58.78%; 在普通光照和紫外线照射后可以保持稳定的抑菌活性,在pH 5～9和蛋白酶的处理后抗菌活性也很稳定; 在4 ℃下可以持续储藏150 d。【结论】HZM9具有广谱抑菌活性和很好的稳定性,能够适用于土传病害的生物防治。     

枯草芽孢杆菌水剂对西瓜枯萎病的田间防效研究

本试验通过35亿活芽孢／ml枯草芽孢杆菌水剂以浸种、灌根并用的方式防治西瓜枯萎病，田间试验结果表明：枯草芽孢杆菌水剂250倍液、500倍液对西瓜枯萎病具有明显的防治效果，同时对黄瓜秧苗正常生长无任何不良影响。此外，枯草芽孢杆菌水剂还对西瓜植株具有一定的促进生长作用。     

利用食线虫真菌防治植物寄生线虫的研究进展

植物寄生线虫每年给农业、林业造成的损失十分巨大,食线虫真菌是植物寄生线虫生物防治中极其有用的生物资源.综述在利用这类真菌研发线虫生防菌剂中涉及的应用基础研究进展,包括食线虫真菌资源,食线虫真菌侵染线虫的分子机制,生物防治现状,杀线虫毒素概况,以及线虫生防中需要解决的生态学问题.     

植物病害生物防治菌的改良技术及产业化

介绍了植病生防菌的遗传改良技术,通过诱变育种、杂交育种及基因工程技术增强生防菌的抗菌活性和扩大防治对象,使改良后的生防菌较传统的生物杀菌剂具有更高的生防效率和更强的市场竞争力,这些改良技术的研究需要现代生物科学、分子生物学等多学科的结合。对生防菌的产业化研究作了综述,分析了生防菌产业化研究现状及实现产业化的关键技术指出了生防菌产业化的市场开发需要国家的支持,科研单位和企业等各方面的合作。     

Construction of Streptomyces lydicus A01 transformant with the chit33 gene from Trichoderma harzianum CECT2413 and its biocontrol effect on Fusaria

Streptomyces lydicus A01 resists many plant pathogens (including Fusarium spp.) by producing the antifungal agent natamycin, which binds to the ergosterol of fungal cell membranes and inhibits the growth of pathogens. Trichoderma harzianum CECT2413 is a widely-distributed soil fungus that antagonizes several plant fungal pathogens (including Fusarium spp.) by producing chi-tinase and degrading chitin, a major component of the fungal cell wall. This study attempted to enhance the biocontrol effect of S. lydicus A01 on Fusarium spp. by transforming the chitinase gene of Trichoderma. Chitinase and natamycin could act synergisti-cally on both the cell walls and cell membranes of pathogens. The 33-kD chitinase-encoding gene (chit33) was cloned and conju-gal-transformed from T. harzianum CECT2413 to S. lydicus A01, and then confirmed via polymerase chain reaction (PCR) assays. Subsequent analyses using the 3,5-dinitrosalicylic acid (DNS) method and ultraviolet spectrophotometry showed that compared with its wild type strain (WT), the S. lydicus A01 conjugal transformant (CT) with chit33 gene exhibited substantially higher chi-tinase activity and natamycin production. The resistance of S. lydicus A01-chit33 CT and WT to four Fusaria in crops and vegetables was tested via the cup-plate method. Compared with the WT, the conjugal transformant of S. lydicus A01 with chit33 gene from T. harzianum CECT2413 showed greatly increased biocontrol effect on fusarium disease. This study would be beneficial to the development of high-quality antifungal bio-agents for agricultural applications via the synergy between the previously non-existent and pre-existing functions achieved through heterogeneous gene transformation.     

内生芽孢杆菌防治植物病害的应用及作用机制研究进展

植物内生细菌由于其独特的生境,成为植物病害防治中的重要生防因子.芽孢杆菌在植物体内分布具有广泛性和多样性,其在防治病害和促进植物生长发育方面的作用被广泛研究和应用.芽孢杆菌控制植物病害的作用机制主要包括竞争、拮抗、促进植物生长和诱导植物抗病性四个方面.植物诱导抗性作为植物内生细菌防病的主要机制之一,具有非特异性、广谱性和系统性,在植物病害的生物防治中可被广泛应用.     

Fungal genus Hypocrea/Trichoderma: from barcodes to biodiversity

Hypocrea/Trichoderma is a genus of soil-borne or wood-decaying fungi containing members important to mankind as producers of industrial enzymes and biocontrol agents against plant pathogens, but also as opportunistic pathogens of immunocompromised humans and animals, while others can cause damage to cultivated mushroom. With the recent advent of a reliable, BarCode-aided identification system for all known taxa of Trichoderma and Hypocrea, it became now possible to study some of the biological fundamentals of the diversity in this fungal genus in more detail. In this article, we will therefore review recent progress in （1） the understanding of the geographic distribution of individual taxa; （2） mechanisms of speciation leading to development of mushroom diseases and facultative human mycoses; and （3） the possible correlation of specific traits of secondary metabolism and molecular phylogeny.     

4株菌根辅助细菌对苗木猝倒病菌的抑制作用

菌根辅助细菌（MHB）对植物具有促生作用,为探讨MHB对土传病原真菌的生防功能,采用离体平板对峙和活体接种的方法测定了4株MHB对土传病原真菌的抑制作用。结果表明：在离体平板对峙测定中,蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）HB12、HB59菌株和短小芽孢杆菌（B. pumilus）HR10菌株对苗木猝倒病病原丝核菌（Rhizoctonia sp.）有较为明显的抑制作用,其中短小芽孢杆菌HR10对丝核菌的抑制作用最强,抑菌率达85.58 %;蜡状芽孢杆菌HB12和HB59、短小芽孢杆菌HR10、藤黄微球菌（Micrococcus luteus）HR15对苗木猝倒病病原尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）均无抑制作用。将筛选获得的短小芽孢杆菌HR10进行活体松苗接种,结果显示,经HR10菌株处理后的黑松苗木其猝倒病的发病率仅为15 %,病死率也低至10 %,而单接种病原丝核菌的对照黑松苗木的发病率则高达80 %,病死率为65 %。说明菌根辅助细菌（MHB）除对植物具有促生作用外,对某些植物土传病害也具有一定的抑制作用。     

园艺植物病害的生物防治

随着园艺生产规模的扩大和设施栽培的推广应用,园艺植物及其产品在生产和贮藏中的病害问题日趋严重,园艺植物病害防治的方向是不断送还和化学农药的使用,大力研究的发展具有无污染,无公害的生物防治,笔概述了利用微生物防治植物病害的机制,包括对植物的诱导抗性,利用拮抗微生物和菌根真菌等,介绍了抑病土的概念及其利用以及生物农药的开发及应用情况,包括天然植物产物的利用,抗生素农药和杀线植物利用等。另外,对园艺植物病害生的防治上目前存在的问题和今后研究的方向进行了讨论。