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植物幼小原胚的电激转化 总被引:3,自引:1,他引:2
用电激法将外源报告基因导入植物原胚获得瞬间表达.用酶解和显微解剖法分离出烟草含8~32个细胞的幼小原胚与含250~400个细胞的球形胚,导入GUS和GFP基因后,置于KM8p培养基 1~2d.当电场强度为 500~1500 V/cm时,可检测到 GUS蓝色反应和 GFP绿色荧光,其中幼小原胚在电场强度为 750 V/cm时,外源基因瞬间表达频率最高,为 2.2%,球形胚在电场强度为1250 V/Cm时表达频率最高为 5.9%.若以转化细胞占胚细胞总数的比例为有效转化频率,则幼小原胚的有效转化频率约为球形胚的7倍. 相似文献
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利用GATA-2调控成分制备组织特异性表达GFP的转基因斑马鱼 总被引:6,自引:2,他引:4
GATA-2是在多种血细胞和神经细胞表达的一种转录因子,调控血细胞和神经细胞的分化。利用斑马鱼GATA-2基因5’侧翼调控序列和绿色荧光蛋白基因,获得了只在中枢神经细胞表达GFP,或在神经细胞和表层细胞都表达GFP的转基因斑马鱼种质系,同时还进一步证实了GATA-2基因在胚胎发育中的时空表达谱。 相似文献
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细胞外钙调素对转基因烟草悬浮细胞rbcS- GUS基因表达的促进作用 总被引:1,自引:1,他引:0
以转rbcS-GUS报告基因的烟草悬浮培养细胞为材料,研究了细胞外钙调素对rbcS基因表达的影响,实验证实培养介质中钙调素浓度与rbcS-GUS基因表达呈现一个在细胞培养初期较低、随后增高、然后再降低的动态变化;而且培养介质中钙调素浓度变化在前,rbcS-GUS基因表达变化在后,介质中加入外源纯化钙调素可以促进rbcS-GUS基因表达,而且这种促进作用具有浓度剂化在后,介质中加入外源纯化钙调素可以 相似文献
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PKC对HeLa细胞G1/S期进程调控及其机理的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
研究了PKC活性变化对HeLa细胞G1/S期进程的影响及其作用机理,结果表明:(1)HeLa细胞G1期PKC活性的变化影响其G1/S期进程,其中G1期PKC活性升高促进G1/S期进程,而PKC活性降低显著抑制G1/S期进程;(2)PKC的刺激剂TPA促进早期应答基因c-myc与c-jun的表达,PKC的抑制剂GF-109203X抑制其表达;(3)HeLa细胞G1/S期进程中,TPA作用促进G1期C 相似文献
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FMRP与TDG蛋白的相互作用 总被引:3,自引:0,他引:3
脆性X智力低下蛋白FMRP表达的缺乏可以导致最常见的遗传性智力低下疾病—脆性X综合征。用酵母双杂交体系筛选与FMRP相互作用的蛋白质,以期通过相互作用的蛋白质研究与FMRP相关的生化途径。从小鼠胚胎cDNA文库中得到一个与FMRP特异相互作用蛋白的cDNA(Genbank号af102857)。该cDNA编码的蛋白与人的G/T错配DNA胸腺嘧啶糖苷酶(hTDG)高度同源通过多种FMRP造反剪接异构体 相似文献
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钙调素拮抗剂诱导人肺癌细胞PLA-801凋亡机理研究 总被引:5,自引:2,他引:3
用20μmolL^-1的TFP处理人肺癌细胞PLA-801,强烈抑制了细胞的增殖。软琼脂实验发现加药组细胞集落形成率为对照组的63.6%,这表明部分细胞失去了在软琼脂中形成集落的能力。流式细胞光度术显示,加药组细胞G1期峰前出现了程度性细胞死亡的特征峰,荧光染料Heochst33342染色后,荧光显微镜下观察,可见到部分细胞凋亡时核凝集,边化,断裂的情形。 相似文献
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在Effinger和Hayes关于有限域F上多项式环F「x」中Goldbach3素元性质的定理基础上,用模型论方法证明:对每种特征数k,都存在无限多个无限域F,使在F「x」中也有Goldbach3素元性质成立。 相似文献
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RGD序列普遍存在于细胞外基质蛋白中,并能为许多整合素蛋白所识别。利用ELISA,SPR等技术,对表面固定的人工合成生物素-含RGD环六肽〔cyclo-(Arg-Gly-Asp-D-Phe-Lys-Gly-)〕与人血小板整合素蛋白αⅡbβ3的结合能力进行了检测。结果表明,含RGD环六肽与生物素基团之间的间臂长度在1.48 ̄2.2nm时,RGD序列才能有效进入αⅡbβ3头部的反应中心并发生结合反应; 相似文献
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P15INK4b/MTS2对人肝癌细胞增殖的影响及其机理的初步分析 总被引:2,自引:0,他引:2
利用自行构建的稳定高表达P15INK4B的人肝癌细胞,研究了抑癌基因P15在细胞增殖中的作用.首先将抑癌基因 P15的 cDNA构建到高效真核表达的质粒载体 pXJ41-neo中的 EcoRI/XhoI位点,构建成 P15真核表达质粒 pXJP15.通过脂质体法将 pXJP15质粒转染人肝癌细胞SMMC-7721,进一步用 G-418筛选,获得了稳定高表达P15的人肝癌细胞模型SHT及相应的表达空载体的对照细胞模型SVXJ.通过Northern,Western分子杂交分析,表明SHT细胞中P15基因表达和蛋白水平都明显高于对照组细胞,证实成功地建立了P15高表达的人肝癌细胞模型,与对照组相比,P15高表达的SHT1细胞的增殖受到抑制,流式细胞光度术和MI值测定表明P15阻抑细胞由G1期向S期和由G2期向M期的转换.Western免疫印迹分析结果表明,癌基因c-myc,c-fos的蛋白水平表达下降可能是P15抑制细胞增殖的分子机理之一。 相似文献
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用封端法制备超支化聚合物功能材料 总被引:5,自引:0,他引:5
将封法用于超支化聚合物的功能化,制得了两种新型荧光超支化聚合物材料,即超支化聚醚及超支化聚砜胺荧光材料,用N,N-二甲氨基对苯甲醛与超支化聚的末端双羟基发生羟醛缩合反应,制得我超支化聚醚,在三乙胺存在下,一种新的AB2型砜胺单体在氯仿中于40℃反应60h,得到端双键超支化聚砜胺,再用N,N-二甲氨基对苯胺与末端双键反应,合成了荧光超支化聚耐砜胺,这两种产物在固态及溶液状态下皆发射贡-绿色荧光,最大 相似文献
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应用抑制差减杂交法分离水稻幼穗发育早期特异表达的基因 总被引:16,自引:0,他引:16
以水稻茎尖分生组织为对照群体,幼穗分生组织为目标群体,进行抑制差减杂交。用经过SAM cDNA差减的Pb/Sb cDNA群体构建了一个差减文库,通过差示筛选鉴定了40个在Pb/Sb中特异表达或表达增强的候选克隆,Northern杂交验证,至少40%的候选克隆代表了在Pb/Sb中特异表达或表达增强的基因,同时,相当一部分克隆为你荐度转录本。对40个cDNA克隆单向测序后,与GenBank中同源序列进 相似文献