Nuc和mecA基因在金黄色葡萄球菌及其甲氧西林耐药性检测中的初步应用

目的为获得金黄色葡萄球菌对甲氧西林的耐药信息,评估通过PCR扩增nuc基因、mecA基因检测金黄色葡萄球菌及其甲氧西林耐药性的可行性。方法收集获得63株临床分离鉴定的金黄色葡萄球菌,采用传统药敏检测方法进行菌株药敏测试;再用PCR方法检测菌株是否携带nuc基因和mecA基因,以传统药敏检测结果为参照,评估用PCR扩增技术检测金黄色葡萄球菌及其甲氧西林耐药性的可行性。结果 1.样本菌株中有24株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphyococcus aureus,MRSA),39株为甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(Methicillin-sensitive Staphyococcus aureus,MSSA)。来自重症医学科的分离株中MRSA数量较多。2.样本菌株nuc基因携带率为85.7%,其中nuc基因在MRSA菌株中的携带率为87.50%,在MSSA菌株中携带率为84.62%;3.样本菌株mecA基因的携带率为19.05%,其中MRSA菌株的mecA基因携带率为50.0%,MSSA中均不携带mecA基因。来自重症医学科的MRSA中同时携带mecA基因和nuc基因的比例为77.78%。结论用PCR技术检测nuc基因、mecA基因来快速鉴定金黄色葡萄球菌及其甲氧西林耐药性可能存在一定比例的误诊结果。     

耐甲氧西林葡萄球菌临床检测方法评价

目的评价三种方法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的可靠性和临床实用性.方法根据NCCLS的判定标准,采用mecA基因PCR扩增法检测临床分离的85株金黄色葡萄球菌和80株凝固酶阴性葡萄球菌,并与苯唑西林琼脂稀释法和头孢西丁纸片扩散法进行比较.结果苯唑西林琼脂稀释法筛选MRSA(MRCNS)的检出率分别93.75%(95.35%)、95.24%(54.05%);头孢西丁纸片扩散法筛选MRSA(MRCNS)的检出率分别为98.43%(95.35%、)、90.48%(64.86%).结论对于MRSA的检测,选用PCR扩增法,该法具有快速、灵敏和特异性强的特点,且纸片法与PCR扩增法检测结果符合率很高;对于MRCNS的检测,通过表型法筛选后,最好能得到mecA基因的确证.     

我国市售食用菌中金黄色葡萄球菌污染调查、耐药性及其肠毒素基因检测

调查了2011—2016年我国市售食用菌中金黄色葡萄球菌的污染情况,并对分离到的相关菌株进行了肠毒素基因的检测和耐药性分析。收集全国39个城市699份市售食用菌,利用定性和定量检测方法,检出金黄色葡萄球菌阳性样品33份,平均污染率4.72%,污染水平9.75MPN/g。24种抗生素的药敏结果显示,分离株耐药情况严重,对利奈唑胺、利福平敏感,对氨苄西林等22种抗生素都产生不同程度的耐药。7株分离株经表型和分子鉴定确定为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。运用聚合酶链式反应法对分离的39株金黄色葡萄球菌进行了18种肠毒素基因检测,约60%分离株携带4~6种肠毒素基因,携带率最高的肠毒素基因是sei,其次是sem、seg、seq、sec、seb、sen。本研究反映了我国市售食用菌金黄色葡萄球菌污染的潜在风险,相关分离株具毒性潜力,且耐药性严重,应引起重视。     

某院金黄色葡萄球菌的临床分布及耐药性分析

为研究金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus)在医院的临床分布特征及耐药情况,该文以四川某医院2018年收集的539株S.aureus为研究对象,采用微量肉汤稀释法测定其对15种抗生素的最低抑菌浓度(MIC),并用统计学方法进行分析。结果显示,539株S.aureus中有142株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA);MRSA主要分布于皮肤性病科(30株,21.1%);S.aureus对青霉素、红霉素、克林霉素耐药率较高,分别为96.10%、63.50%、60.30%,但对利奈唑胺、万古霉素等敏感;MRSA菌株对苯唑西林、青霉素、红霉素等的耐药率均明显高于甲氧西林敏感型金黄色葡萄球菌(Methicillin-sensitive Staphylococcus aureus,MSSA)菌株;在预防和治疗S.aureus感染时,需根据药敏实验合理选择使用抗菌药物。     

103例葡萄球菌中诱导型克林霉素耐药的检测和分析

目的:了解葡萄球菌对红霉素及克林霉素的耐药性,探讨红霉素对克林霉素诱导耐药的情况.方法:按NCCLS推荐的KB法测定并判读葡萄球菌对红霉素及克林霉素的耐药性,并用D-试验检测红霉素对克林霉素的诱导耐药表型.结果:34株金黄色葡萄球菌红霉素耐药克林霉素敏感,其中D-试验阳性15株;69株凝固酶阴性的葡萄球菌红霉素耐药克林霉素敏感,其中D-试验阳性28株.结论:对红霉素耐药克林霉素敏感的葡萄球菌应使用D-试验检测红霉素对克林霉素的诱导耐药性以帮助临床医生正确选用大环内酯类、林可酰胺类抗生素.     

103例葡萄球菌中诱导型克林霉素耐药的检测和分析

目的：了解葡萄球菌对红霉素及克林霉素的耐药性,探讨红霉素对克林霉素诱导耐药的情况。方法：按NCCLS推荐的KB法测定并判读葡萄球菌对红霉素及克林霉素的耐药性,并用D-试验检测红霉素对克林霉素的诱导耐药表型。结果：34株金黄色葡萄球菌红霉素耐药克林霉素敏感,其中D-试验阳性15株;69株凝固酶阴性的葡萄球菌红霉素耐药克林霉素敏感,其中D-试验阳性28株。结论：对红霉素耐药克林霉素敏感的葡萄球菌应使用D-试验检测红霉素对克林霉素的诱导耐药性以帮助临床医生正确选用大环内酯类、林可酰胺类抗生素。     

产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌耐药性分析

目的了解吉林市区肺炎克雷伯菌CTX-M型超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的基因型分类及耐药情况,并对其分子流行病学特征进行分析.方法采用PCR扩增法检测118株肺炎克雷伯菌产CTX-M型ESBLs基因型情况,调查其阳性株对14种常见抗菌药物的耐药情况,对产CTX-M型肺炎克雷伯菌进行AP-PCR同源性分析,并绘制基因分析图谱.结果 118株肺炎克雷伯菌中共扩增出CTX-M型菌株25株,占21.19%;其中CTX-M-1组13株,占11.02%;CTX-M-9组16株,占13.56%;同时含CTX-M-1组和CTX-M-9组菌株4株,占3.39%;扩增未发现CTX-M-2组、CTX-M-8组和CTX-M-25组阳性株.25株产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶均为多重耐药菌（耐3种以上抗菌药物）,对红霉素耐药率高达100%;其次耐药率依次为头孢噻肟92%,氨苄西林92%,四环素88%;对亚胺培南耐药率较低,对美罗培南均敏感.25株CTX-M型阳性菌株做随机扩增多态性分析,共发现13种RAPD.结论吉林市区产CTX-M型超广谱β-内酰胺酶菌株均为多重耐药,且对红霉素、头孢噻肟和氨苄西林类耐药率均很高.CTX-M酶在一定程度上存在克隆传播.     

武威市凉州区住院患者血流感染主要分离病原菌及耐药性分析

了解武威市凉州区近五年血培养标本分离的主要病原菌及其耐药性,为临床合理使用抗菌药物提供参考。应用WHONET5.6软件统计分析2014年-2018年武威市凉州医院、凉州三院住院患者中463份血培养阳性检测结果。分离革兰阴性菌268株(57.88%),革兰阳性菌195株(42.12%),居前3位的细菌分别是大肠埃希菌(186株,40.17%),表皮葡萄球菌(99株,21.38%),肺炎克雷伯菌(37株,7.99%),产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌26.88%、肺炎克雷伯菌8.11%,未发现对美罗培南耐药的肠杆菌科细菌。耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌33.09%,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌35.71%,未检出耐万古霉素阳性球菌,非发酵菌(16株,3.46%),检出耐碳青霉烯类药物鲍曼不动杆菌一株。武威市凉州区血流感染以肠杆菌科细菌为主,其次为阳性球菌,非发酵菌分离较少,临床医生应慎重对待血流感染病原菌及其药敏结果,重视耐药趋势变化,合理使用抗菌药物。     

我院血流感染的细菌分布及耐药性分析

为了解血流感染的分离菌对常用抗菌药物的敏感性和耐药性。收集酒泉市第二人民医院2017-2019年的血培养分离菌株,采用自动化仪器法或纸片扩散法(K-B法)进行细菌药物敏感性试验,按照美国临床和实验室标准化研究所(CLSI)2017年版标准判断结果,使用WHONET5.6软件进行数据统计分析。共分离细菌280株,其中革兰阳性菌80株,占28.6%,革兰阴性菌200株,占71.4%。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中甲氧西林耐药株的(MRSA和MRCNS)检出率分别为13.0%和78.6%,未发现万古霉、素替考拉宁及利奈唑胺耐药菌株。肠杆菌科细菌对哌拉西林/他唑巴坦、头孢西丁、阿米卡星的耐药率较低,未发现亚胺培南、美罗培南耐药菌株。酒泉市血流感染的分离菌以革兰阴性菌为主,耐药趋势不容忽视,应加强抗菌药物合理应用及院内感染防控措施,微生物实验室应加强细菌耐药监测工作,及时向临床通报检验结果。     

肾移植术后感染致病菌的整合子分类及耐药分析

目的:探讨肾移植患者病原菌的整合子基因分类与耐药的相关性,以期控制和预防院内感染,合理使用抗生素。方法:收集我院19例肾移植患者的19株细菌培养结果和药敏试验的资料,用多重PCR方法进行病原菌整合子的基因检测,并用K-B法与M IC法对其进行药敏分析。结果:①19株致病菌在体外药敏实验中都对抗生素产生严重的多重耐药。②产整合酶基因的菌株共12株,占63%;其中革兰阳性球菌3株,占25%;革兰阴性杆菌9株,占75%;其中2株为耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRSCON),4株为产超广谱β-内酰胺酶(ESBL)的大肠杆菌,1株为产ESBL的肺炎克雷伯菌,其余为肠球菌1株、肠杆菌3株和洋葱伯克霍尔德菌1株。③产整合酶均为Ⅰ类整合酶,其中检测出耐药基因盒为1 009 bp的5株,1 664 bp 1株。结论:肾移植患者的病原菌都存在严重的多重耐药性并与整合酶基因有密切相关。对肾移植患者病原菌进行整合酶基因与药敏分析是控制和预防病区交叉感染、合理使用抗生素治疗多重耐药细菌,降低病死率的关键因素。     

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性及SCC mec分型研究

目的探讨耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的耐药性,并对MRSA进行SCC mec分型.方法收集50株MRSA菌株,应用PCR技术扩增mec A基因确证MRSA,并对50株MRSA进行分型,使用纸片扩散法(K-B法)和肉汤稀释法(MIC法)进行耐药性分析.结果 mec A基因检出率为96%;SCC mecⅢ型4株,SCC mecⅣ型3株,其余43株为未分型;50株MRSA对苯唑西林和β-内酰胺类药物完全耐药,对大环内酯类药物及克林霉素耐药性高于80%,所有菌株均对万古霉素、达托霉素和利奈唑胺敏感.结论 MRSA尚未出现严重的多重耐药现象,此结果可为临床用药提供参考.     

重庆西南医院骨科感染金黄色葡萄球菌的分子分型及耐药性研究

目的:了解骨科感染中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率,分析其分型特点和耐药特征,为临床治疗和流行病学研究提供依据.方法:从重庆西南医院骨科患者送检标本中分离出162株金黄色葡萄球菌,以mec A-fem B双重聚合酶链式反应(PCR)鉴定MRSA,应用葡萄球菌染色体mec耐药盒(SCCmec)对金黄色葡萄球菌A蛋白基因(spa)分型、多位点序列分型(MLST)方法确定菌株序列型别,并检测所有菌株对青霉素、苯唑西林、庆大霉素、利福平及四环素等13种抗菌药物的耐药情况.结果:162株金葡菌中共检出34株MRSA(20.99%),包括SCCmecⅠ型16株,SCCmecⅣ型17株,SCCmecⅤ型1株,未检测到SCCmecⅡ、Ⅲ型.spa及MLST分型结果显示,所有MRSA菌株共分为14个spa型,9个ST型.药敏试验显示菌株多重耐药现象较少,未发现耐万古霉素的MRSA.结论:西南医院骨科MRSA主要为SCCmecⅠ、Ⅳ型,ST59-MRSA-Ⅳ-t437为主要流行克隆,其对克林霉素、红霉素耐药率较高.     

烧伤病人细菌学调查

目的：为了及时动态掌握烧伤病人感染菌生态学及药敏情况。方法：收集我科1994年～1997年烧伤创面分泌物，各种导管插管，血液标本226份进行细菌学调查。结果：细菌培养阳性138份（58．8％），其中创面分泌物送检160份，阳性120份（75％），导管插管标本40份，阳性10份（25％），血液标本26份，阳性8份（30．8％）；共检出细菌14种153株，耐甲氧西林金葡菌高居第一位，占23．5％，绿脓杆菌次之，占17．6％。药敏结果提示：耐甲氧西林金葡菌对去甲万古霉素最敏感（100％），其次为环丙沙星（87．7％），其它均耐药；革兰氏阴性杆菌对舒普深、复达欣耐药率最低。结论：耐甲氧西林金葡菌已取代绿脓杆菌上升为第一位优势菌，且只对去甲万古霉素，环丙沙星敏感。     

牛源木糖葡萄球菌的生物学特性及耐药性分析

为确定致奶牛乳房炎木糖葡萄球菌的某些生物学特性及耐药性,采用常规方法对60株木糖葡萄球菌分离株进行了检测与分析。结果显示:被测菌株血浆凝固酶均为阴性,过氧化氢酶及甘露醇发酵为阳性,8株分离菌出现β-溶血,5株对小白鼠有致病性。本次分离的木糖葡萄球菌对磺胺嘧啶(耐药率100%)、青霉素钾(耐药率93.3%)、庆大霉素(耐药率90%)、四环素(耐药率90%)高度耐药,对环丙沙星(耐药率43.3%)、氧氟沙星(耐药率46.6%)呈中度敏感。     

宁夏地区162株大肠杆菌临床分离株对磺胺类药物的耐药性分析

分析宁夏地区大肠杆菌临床分离株对磺胺类药物的耐药性,为指导临床合理用药提供参考.用PCR技术和药敏实验对宁夏地区临床分离的162株大肠杆菌进行了磺胺类药物耐药基因sul1,sul2,sul3的分子检测和耐药性研究.结果表明,在162株大肠杆菌临床分离株中,127株检测出了耐药基因,阳性率为78.4%.其中,sul1基因的阳性率最高,为65.4%,sul2,sul3基因的阳性率分别为48.1%,1.9%;106株对磺胺类药物的耐药率为65.4%,耐药菌株中有5株未检测到sul1,sul2,sul3耐药基因.药敏实验结果与基因检测结果的符合率为95.3%.宁夏地区大肠杆菌临床分离株对磺胺类药物具有较高的耐药性,应予以足够重视.     

成都市市售即食食品中克罗诺杆菌的分离鉴定及药敏检测

了解市售食品中克罗诺杆菌的污染状况以及分离菌株的药敏情况.从成都市武侯区周边超市、农贸市场、食品小吃店等采集食品样品共计100份,按国标GB4789. 40-2016方法进行克罗诺杆菌的分离,对菌株16S r DNA和gyr B基因进行PCR鉴定,将扩增的16S r DNA产物进行测序比对,进一步采用纸片扩散法检测菌株对16种抗生素的药敏情况.研究结果表明100份食品样品中有32份样品分离出克罗诺杆菌,分离率为32%. 32株分离菌株对头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素、阿米卡星、环丙沙星、氯霉素、头孢西丁、甲氧苄啶及氨曲南等10种抗生素敏感;对万古霉素和克林霉素完全耐药;对红霉素、四环素和氨苄西林具有不同程度的耐药,耐药率分别为9. 38%、6. 25%和6. 25%;对红霉素、氨苄西林、亚胺培南和四环素的中介率分别为90. 63%、40. 63%、3. 13%和3. 13%.研究发现成都市武侯区周边超市和农贸市场食品样品存在克罗诺杆菌污染,且分离菌株存在不同程度地耐药,为成都市市售食品中克罗诺杆菌的风险评估提供基础数据.     

西双版纳州医院2008年细菌感染分布及耐药性分析

目的:对我院细菌感染分布及耐药性进行调查分析,为临床合理使用抗生素药物提供依据.方法:对我院临床送检的各类标本采用英国Aris全自动微生物鉴定/药敏分析仪进行培养分离、鉴定及药敏试验,对结果进行回顾性统计分析.结果:阳性标本703份,检出率为35.42%,以革兰阴性杆菌检出较高.革兰阴性杆菌498株,占70.84%,主要为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及铜绿假单胞菌;革兰阳性菌205株,占29.16%,主要为凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌属和金黄色葡萄球菌.大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌除对亚胺培南敏感外,对其他常用抗生素药物不同程度耐药;铜绿假单胞菌对头孢哌酮、头孢曲松、哌拉西林的耐药率在45.00%～50.00%范围内;耐药率最低的是左氧氟沙星、亚胺培南、氨曲南、头孢吡肟、头孢他啶,耐药性分别为18.42%、21.79%、21.79%、23.1%、25.79%;阴沟肠杆菌除对亚胺培南、阿米卡星敏感外,对青霉素类、一至三代头孢菌素等多药高度耐药.耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)检出率为68.37%,其中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率为85.06%.结论:细菌耐药性较严重,临床医师应重视细菌培养和药敏试验,合理使用抗生素.     

秦皇岛地区貂源肠外致病性大肠杆菌四环素类耐药表型与基因型相关性分析

为分析秦皇岛地区貂源肠外致病性大肠杆菌对四环素类药物的耐药性及耐药基因之间关系,对秦皇岛地区分离的20株貂源肠外致病性大肠杆菌采用K-B药敏纸片法,选择常见的3种四环素类药物进行耐药性的检测,并通过PCR扩增对其耐药基因进行判定。结果表明:20株肠外致病性大肠杆菌中,多重耐药菌株占75%,多重耐药基因的菌株占100%,耐药基因检出和耐药性结果比较表明,四环素、强力霉素、土霉素对5种耐药基因的符合率在88.89%～100%之间。     

临床病原菌耐药性监测分析

目的：监测2012年上半年江阴市人民医院临床主要病原菌对抗菌药物的耐药情况,为临床合理用药提供可靠依据。方法：采用VTTEK32病原茵鉴定仪及GNS448药敏板进行药敏试验,根据CLSI2010年M100-S20判定耐药性。结果：2012年上半年江阴市人民医院共分离获得病原菌菌株2431株,其中革兰阴性（G-）菌1688例,占69．44％;革兰阳性（G’）菌743例,占30．56％;分离获得的醋酸钙鲍曼复合不动杆菌和金黄色葡萄球菌菌株数分别位列G菌和G’菌首位;大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺菌株和金黄色葡萄球菌耐甲氧西林菌株检出率分别为30．18％和30．07％。结论：江阴市人民医院分离获得的病原菌为院内感染的常见病原菌,且以革兰阴性杆菌为主,细菌多重耐药现象严重,应积极进行耐药监测并采取有效控制措施。     

新生儿血培养病原菌分布及耐药性分析

为了解本院新生儿病房血培养病原菌的分布及主要病原菌对抗菌药物的耐药性,本研究分析了2015年1月至2015年12月新生儿病房送检的血培养标本所分离病原菌的种类及抗菌药物耐药情况.结果共分离到病原菌236株,其中革兰阳性菌192株(81.36%),以凝固酶阴性葡萄球菌为主;革兰阴性杆菌40株(16.95%),以大肠埃希菌为主.药敏结果显示,凝固酶阴性葡萄球菌耐药率较高,其中耐甲氧西林检出率占82.69%,未检出耐奎奴普丁/达福普汀、替加环素、利奈唑烷和万古霉素的葡萄球菌;主要革兰阴性菌对氨苄西林、复方新诺明、庆大霉素耐药率较高,未检出耐阿米卡星、头孢吡肟、头孢他啶、头孢替坦、妥布霉素、亚胺培南菌株.结论:本院新生儿血培养病原菌以革兰阳性菌为主,凝固酶阴性葡萄球菌是主要病原菌,并且耐药率较高.