一株铜绿假单胞菌的分离鉴定及其对VPAHPND拮抗效果的评价

近年来,急性肝胰腺坏死病(Acute hepatopancreatic necrosis disease, AHPND)造成了凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖业巨大的经济损失,其病原为一类含有致病基因PirAB的弧菌(Vibrio),主要为副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus,VP_AHPND).本研究以VP_AHPND为受试菌株,从江苏海域捕获的黄姑鱼(Nibea albiflora)体内分离筛选对VP_AHPND具有抑制作用的拮抗菌株.通过形态学、生理生化及分子生物学方法进行鉴定,研究了其拮抗效果、拮抗活性物质,并对生物安全性和被动保护效果进行评估.结果表明,分离筛选出1株具有良好拮抗效果的菌株JSHY97,经鉴定该菌株为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa).该菌株对3株具有不同分型的VP_AHPND均具有良好的拮抗效果,其抑菌圈直径达19.25 mm～21.80 mm,初步判断其活性物质来源于胞外产物.口服JSHY97的凡纳滨对虾...     

荧光假单胞菌产木聚糖酶的纯化和性质

有硫酸铵分级沉淀,葡聚糖凝胶分离技术,对荧光假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕ．）所产的半纤维素酶进行分离纯化,得到单一组分的木聚糖酶。通过凝胶电泳法,测得其摩尔式量为３３０００。研究表明,该酶的最适ｐＨ值为６．０,最适温度６０℃。酶的动力学研究测出米氏常数Ｋｍ值为４．７６ｍｇ／ｍｌ。     

荧光假单胞菌与植物病害生物防治

荧光假单胞菌对多种植物病害具有防治作用,它首先在植物根际定殖,然后靠噬铁素对铁离子(Fe~(3+))的竞争和抗生素的拮抗作用抑制病原菌的生长发育,保护植物体免受病菌危害。荧光菌在根际的定殖能力与它同根系分泌物的凝集能力有关,与它在根表的短期不可逆吸附也有一定关系。荧光菌菌剂研究较多,目前最好的可贮存一年。虽然荧光菌已成功地用于一些病害的生物防治,但仍有许多问题有待解决。     

荧光假单胞菌P32培养基的优选

本文对荧光假单胞菌P32的培养基成分进行了研究,利用正交试验筛选出产菌量较高的培养基,成分如下:(％,W/V)蔗糖6,甘油3,蛋白胨1,NH_4H_2PO_4,0.5.     

检查假单胞菌荧光色素方法的改良

金氏B培养基中加入蛋黄之后,荧光假单胞杆菌产生荧光色素的能力加强,便于检验,对于产生荧光色素能力弱的菌株也能得到明确的阳性结果,这一方法的使用,消除了(月示)蛋白胨对培养基质量的限制。     

一株产CoQ10的红假单胞菌的研究

从滇池分离到一株革兰氏阴性杆菌，于光照厌氧及黑暗好氧条件下生长良好，活细胞在870、803nm处有吸收峰，具平行片层状的光合内膜系统，可归属于红假单胞菌属（Rhodopseudomonas)；该菌体中提取分主了得到的黄色结晶品，经Craven试验、高效薄层层析、高效液相色谱、紫外光谱、红外光谱、核磁共振及质谱证实，为CoQ10。     

红假单胞菌产类胡萝卜素条件的研究

通过对影响红假单菌类胡萝卜素的因素的全面研究,获得了胡萝卜素产量相对辊主贩培养条件,以乙酸钠为碳源,谷氨酸钠为氮源,酵母亮为生长因子,４ｍｇ／Ｌ,ＭｇＳＯ４,２ｍｇ／ＬｆＥ２（ｓｏ４）３,１５００ｌｘ光照度,３０℃,微好氧培养１２０ｈ。     

荧光假单胞菌噬铁素的性质研究

本文报道了荧光假单胞菌Ｐ３２产生的噬铁素的特性．噬铁素在紫外光下发出黄绿色荧光，与Ｆｅ３＋有高度亲和性，在２３０ｎｍ和４００ｎｍ附近各有一吸收峰，氨基酸组成为苏氨酸：甘氨酸：赖氨酸：胱氨酸：亮氨酸：天冬氨酸＝２：４：４：４：１：１，生物合成需较低浓度Ｆｅ３＋为条件，与Ｆｅ３＋的复合物无荧光，但可用连二亚硫酸钠，８－羟基喹啉和抗坏血酸粉末恢复荧光．     

固定化假单胞菌产L—多巴

选择海藻酸钙和聚乙烯醇凝胶为固定化载体包埋假单胸菌,以提高该菌以Ｌ－酷氨酸为底物生产Ｌ－多巴的效率。     

具有ACC脱氨酶活性及抗枯萎病菌的假单胞菌株B*8

运用新的快速筛选程序,获得了具有１－氨基环丙烷－１－羧酸（１－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｒｏｐａｎｅ－１ｃａｒ－ｂｏｘｙｌａｔｅ,ＡＣＣ）脱氨酶活性和拮抗瓜类枯萎病菌双重功能的根际假单胞菌株Ｂ８．利用ＡＣＣ为唯一氮源,从不同的土样中,快速筛选出８０个具有ＡＣＣ脱氨酶活性的菌落．在马铃薯葡萄糖培养基和西瓜培养基上,经异步培养法进一步筛选并纯化出３株对西瓜枯萎病菌具有较强拮抗作用的拮抗菌Ａ９、Ｂ８和Ｃ１７．对拮抗作用最强的Ｂ８进行分析表明,它属于假单孢菌属,能分泌较多的铁载体,对瓜类枯萎病以及其他植物病原菌具有广谱抗性．结果显示,此程序可替代通常采用的低效而耗时的筛选和生物测定过程,加快新的促进植物生长根际细菌的筛选和应用．     

2010年南方水稻黑条矮缩病应急防控试验探究

南方水稻黑条矮缩病是一种严重为害水稻生产的病毒病,目前没有十分有效的防控措施,特别是对已经大面积暴发成灾的本田期水稻。本研究在江西省萍乡市芦溪县麻田乡,针对整个田块已经发生病毒病的二晚移栽稻田,进行应急防控实验,探究不同药剂组合对南方水稻黑条矮缩病的防治效果。试验以杀虫剂、抗病毒剂、生长调节剂、免疫激活剂和生物肥料为材料,通过不同的组合和不同的施药次数,探讨不同处理的防治效果,试验发现不同的药剂组合对防治南方水稻黑条矮缩病的确存在不同的防治效果,最高防治效果可达46.75%。这些研究为下一步研究防治水稻病毒病应急防控措施奠定基础。     

转溶菌酶基因籼稻在湖南地区的抗稻瘟病研究

以转溶菌酶基因粳稻中花9号[ZH9(R)]与几个湖南地区目前生产上有广泛应用价值但感病的籼型杂交稻亲本9311、MH63、288、E32和PA64s进行一次杂交和多次回交转育,从各转育世代中选育出优良的抗病株系,进而配制新的杂交稻组合,以期获得优良杂交稻亲本新品系。试验结果表明,各转育后代发病情况均明显轻于对应籼稻亲本;在这5个品种中,MH63要优于其它几个亲本,其转育后代抗性和农艺性状也相对优良,且已基本趋于稳定;田间筛选到的353份优良单株的DNA样中检测到269个阳性样,阳性检出率达76.20%,对应田间的抗性表现,吻合率达94.05%。     

Acclimation and Characterization of a Pseudomonas Strain for Improved Phosphorus Removal

A Pseudomonas strain(named as P.PAO-1) with phosphorous removal function was isolated and characterized.A new method of two-stage cultivation was applied to the strain to induce the synthesis of intracellular polyhydroxylbutyrate(PHB) in the cells.In the first stage,bacterial cells were enriched under a high carbon source condition;in the second stage,the bacteria cells were cultivated under the nutrient-imbalanced conditions with the carbon source-regulated medium.As a result,the PHB content of strain P.PAO-1 reached 22.8% compared with the normal 7.41% in the non-acclimated strain.This change had led to the rising of P uptake from 1 to 25 mg·L~(-1).When added the strain P.PAO-1into the activated sludge(with the addition proportion of 1:1),the ratio of biological phosphorus removal increased by 14.9%under the normal alternating anaerobic/aerobic conditions with low-carbon consumption.The results demonstrated that the isolated pure culture strain P.PAO-1 belonged to the functional group of poly-P accumulating microorganism.When cultured by the two-stage cultivation method,the initial accumulation of PHB in the strain cells could be achieved and the phosphorous removal capacity of strain P.PAO-1 could be induced subsequently.When applied to the wastewater,strain P.PAO-1 performed phosphorus removal from the wastewater with or without the addition of activated sludge.     

脂肪酶产生菌的筛选及基因的克隆表达

目的筛选出脂肪酶活性较高菌株,通过脂肪酶基因克隆技术获得高表达的脂肪酶,根据酶活曲线确定该酶的最适温度和最适pH.方法采用透明圈法,以三丁酸甘油酯为底物筛选脂肪酶活性较高菌株;通过PCR扩增获得其脂肪酶基因Pseudomonas peli(PP)序列,构建pET-28 a表达载体,并在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中进行异源表达;通过Ni柱将脂肪酶纯化,并根据酶活曲线确定该酶的最适温度和最适pH.结果筛选到一株脂肪酶活性较高的菌株,16S rRNA基因序列比对结果初步鉴定为Pseudomonas peli.PCR扩增得到的基因片段长度为801 bp,其序列与Pseudomonas peli中的脂肪酶基因序列相似性达到100%,PP基因在大肠杆菌中异源表达蛋白的分子量约29 KD,该蛋白在55℃、pH 7.0时活性最高.结论通过基因克隆表达后得到的脂肪酶Ni柱纯化后纯度达95%以上,且耐高温,为脂肪酶工业化应用奠定了基础.     

假单胞杆菌BC001对吡啶和喹啉的生物去除

从首钢焦化厂废水处理系统的活性污泥中分离出1株能在高浓度的吡啶(约400mg/L)和喹啉(约500mg/L)双基质条件下良好生长的细菌,经16SrDNA及生理形态特征鉴定为假单胞杆菌(Pseudomonassp.BC001),它对吡啶的去除主要通过生物吸附,而对喹啉的去除包括生物吸附和降解两个阶段。该菌能利用喹啉作为唯一的碳源和氮源代谢生长,适量的外加碳源对喹啉降解具有促进作用,经检测喹啉降解的中间产物主要为2-羟基喹啉和8-羟基香豆素,氮的主要代谢终产物为NH4 。     

棉花黄萎病生防细菌NCD-2抑菌物质提取研究

应用微生物控制植物病害是非常有效的方法。枯草芽孢杆菌是最著名的产生抗生作用的拮抗细菌。本文所使用的防治棉花黄萎病生防细菌NCD-2是枯草芽孢杆菌菌株,对16种植物病原真菌具有抑制作用,并且对棉花黄萎病具有较高的田间防病效果。通过发酵培养、有机溶剂萃取和盐析和透析提取了该菌株的胞外分泌产物,经抑菌作用测定证明该菌株分泌的有效抑菌成分为耐热蛋白。     

一株硫氧化菌的筛选与表征

利用液体选择培养基、固体选择培养基从污泥中筛选出一种可以氧化低价硫的菌株,该菌为革兰氏阴性菌,在光学显微镜下有较强的运动能力.对含有该菌的培养基进行pH值检测,在培养的第3天发现pH值有显著下降,继续培养一周左右,pH值下降到0.6;用离子色谱进行检测,培养5天,液体培养基中硫酸根含量从249.2mg.L-1增加到3679.7mg.L-1;将菌液加入FeS培养基中,培养2周后,FeS被氧化,培养基颜色变浅.     

染料脱色菌无花果曲霉的微波诱变育种

采用微波对染料脱色菌无花果曲霉(Aspergillus ficuum)进行不同时间诱变处理,确定了微波诱变的最佳诱变时间,比较了出发菌株与突变株的菌落形态及孢子形态的差异,研究了培养时间、温度、转速、pH对染料脱色的影响。结果表明:用功率为800 W的微波火力对无花果曲霉(Aspergillus ficuum)进行处理30 s,获得的突变株P30具有最佳脱色效果,突变株的菌落比原菌落直径大,分布不规则,菌落相对较少,其孢子颜色变深。突变株对染料脱色的最佳pH为6.0,最佳温度为33℃,转速为120 r/m in,时间为72 h。P30突变株对活性艳蓝KN-R的脱色率比出发菌株提高了11%。     

2006年水稻条纹叶枯病综合控制技术的实施与成效

本文通过分析2006年水稻条纹叶枯病发生态势,阐述了农业措施与药剂防治相结合的综合控制技术的实施情况,以及在灰飞虱大暴发情形下,实施水稻条纹叶枯病综合控制技术取得的成效。