HPLC-MS/MS法测定岩黄连提取物中脱氢卡维丁的含量

采用高效液相色谱电喷雾离子化质谱法分离并测定岩黄连提取物中脱氢卡维丁的含量.色谱采用XTerraMS C18柱(100 mm×2.1 mm,5μm),以0.1%甲酸水溶液-甲醇为流动相,梯度洗脱,流速为0.2 mL/min.质谱采用三重四级杆的质谱仪,电喷雾离子源,正离子扫描方式,以多反应离子监测(MRM)模式进行定量检测.结果表明,脱氢卡维丁在0.2~200 ng/mL(r=0.999 5)范围内呈良好线性关系,平均加样回收率为99.29%,相对标准偏差(RSD)为2.4%.     

一品红离体培养及体细胞胚高频率发生的研究

一品红苞片为外植体进行离体培养,以MS+2,4-D 2.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1固体培养基愈伤诱导率及相对生长量最高。此培养基中继代的愈伤组织转入MS+2,4-D 1.0 mg.L-1+6-BA 0.5 mg.L-1+水解酪蛋白80 mg.L-1固体培养基时体细胞胚分化率最高。加入活性碳1 g.L-1有利于高频率体细胞胚发生。MS培养基优于N6和B5培养基,有利于高频率体细胞胚发生。胚性愈伤组织及时转入液体培养基中悬浮振荡培养有利于高频率体细胞胚发生。     

软枣猕猴桃体细胞培养获得再生植株

以东北地区软枣猕猴桃不同外植体进行诱导培养和继代培养,结果发现,以幼茎作为外植体愈伤组织诱导率最高,达到７５％ ．从诱导出的愈伤组织上继续进行分化培养,获得再生植株．     

甜叶菊叶片离体培养及试管无性系的建立

研究了离体条件下甜叶菊（Stiuia rebaudiana Bertoni)叶片愈伤组织诱导和植株再生技术,离体培养以MS为基本培养基并附加300mg/L水解酪蛋白,离体叶片在BA 0．5mg/L和NAA 0．5mg/L的培养基上诱导形成愈伤组织,在BA 0．5mg/L和NAA0．05mg/L的培养基上可诱导愈伤组织分化不定芽,分化频率为100％,不定芽在White基本培养基并附 加NAA0．01mg/L的培养基上诱导生根,生根率可达100％,炼苗后移栽,成活率达95％以上。     

几种豆科牧草外植体培养和体细胞胚诱导及人工种子研究

研究了鹰咀紫云英，苜蓿，红豆草，甘肃棘豆，红三叶草，白三叶草，胡卢巴和扁蓿豆八种豆科植物的组织培养和体细胞胚诱导。不同种类的外植体在附加不同成分的ＵＭ培养基上进行离体培养，均获得愈伤组织采用固体和乳浮两种方式进行分化诱导；     

岩黄连总生物碱提取工艺及抗氧化活性研究

以脱氢卡维丁得率为评价指标,采用单因素实验及正交试验确定岩黄连中总生物碱的最佳提取工艺,并采用自由基清除法评价其抗氧化活性。实验结果表明,岩黄连总生物碱的最优提取工艺为：提取温度80℃,提取时间2.5 h,乙醇体积分数60%,料液比1∶14,提取3次,在此条件下得率为7.34%;抗氧化活性实验表明,岩黄连生物碱粗提物对DPPH自由基、超氧阴离子自由基有较好的清除作用,对ABTS自由基和羟基自由基有一定程度的清除作用,呈现浓度依赖性,表明岩黄连生物碱粗提物是潜在的天然抗氧化剂。     

曼陀罗愈伤组织培养及药用成分莨菪碱的分析

为解决野生资源不足,满足临床上对东莨菪碱和莨菪碱的需求,以曼陀罗嫩茎为外植体进行了愈伤组织的诱导培养和继代培养,并对愈伤组织中的生物碱、东莨菪碱和莨菪碱进行了分析.结果证明:MS+2,4-D1.0mg.L-1是曼陀罗愈伤组织诱导和继代培养的理想培养基.由愈伤组织提取的生物碱中含有东莨菪碱和莨菪碱.实验培养的曼陀罗愈伤组织为东莨菪碱和莨菪碱的工厂化生产奠定了基础.     

茎瘤芥(榨菜)子叶及带下胚轴茎段离体培养研究

以茎瘤芥永安小叶品种无菌苗子叶和带下胚轴茎段为材料,初步探索愈伤组织诱导、分化及再生植株生根培养.结果表明,子叶与叶柄的切口处极易产生愈伤组织,在MS+1.0mg·L-16-BA+0.2mg·L~(-1)NAA培养基中,愈伤组织分化率达到64%,其不定芽量最大;1/2MS+0.6mg·L~(-1)IBA培养基对不定根形成最为有利,生根率可达到96%.     

两种红豆杉离体细胞中紫杉醇含量的调节

以矮壮素、水杨酸和甘露醇为诱发子,研究了短叶红豆杉(Taxus brevifolia)和墨西哥红豆杉(Taxus globosa)离体细胞中紫杉醇含量的变化.实验结果表明:矮壮素、水杨酸和甘露醇不同程度地提高离体细胞中紫杉醇含量.短叶红豆杉的紫杉醇含量比墨西哥红豆杉的高,但诱发子诱导墨西哥红豆杉紫杉醇相对增加量大.0.5 mg*L-1水杨酸和0.5 mg·L-1矮壮素分别使短叶红豆杉和墨西哥红豆杉细胞中紫杉醇含量达到最高,分别是对照的1.8和15倍.还讨论了紫杉醇含量与愈伤组织生长的关系.     

硅钨酸质量法测定延胡索总生物碱质量分数

建立延胡索总生物碱质量分数检测方法.运用硅钨酸质量法,将延胡索总生物碱中生物碱物质转化为可以准确称量的形式,计算延胡索总生物碱质量分数.三批样品质量分数平均值为57.12%,符合中药五类新药技术研究要求.所建立的方法操作简便、准确、可靠,适用于延胡索总生物碱的质量控制.     

齿瓣延胡索细胞悬浮系的建立和延胡索乙素的形成

就各种因素对齿瓣延胡索悬浮细胞生长和延胡索乙素形成的影响做进一步的研究。结果表明：随着接种量的提高,细胞生长加速,培养液浊度增大,齿瓣延胡索细胞悬浮液培养中最适接种量为2g/30ml;pH5.6最有利于细胞生物量的积累;2,4—D与2种细胞分裂素的组合,对于生长量积累和THP含量的作用最显著;在培养基中添加甘露糖和半乳糖,对于提高培养物THP含量是有效的;G1y Phe Lys的作用效果最显著,细胞鲜质量、干质量和THP含量均最高。     

栗斑腹鹀种群数量变化的分析

1999年至 2 0 0 1年每年 4～ 7月在吉林省西部地区对栗斑腹种群数量及繁殖情况进行了调查 ,发现三年来栗斑腹种群数量连续下降 .其原因是 :人为干扰导致栗斑腹繁殖成功率及繁殖成活率降低 ,从而导致栗斑腹种群数量下降 ;研究地区内近几年连续高温干旱的天气也导致了栗斑腹种群数量的下降 ,气温升高 (R2 =0 9964 )、降雨量减少 (R2 =0 84 98)对栗斑腹种群数量下降的影响很大 .     

植物细胞培养实验在细胞工程实验教学中的应用

为提高细胞工程实验教学的效果,培养学生的实验操作能力和解决问题能力,探索了适合于实验教学的具体化和可操作的植物细胞培养方案.大叶黄杨(Euonymus japonicus)和紫花地丁(Viola philippica)可作为植物细胞培养的理想实验材料;诱导愈伤组织的最适培养基为基本培养基+2,4-二氯苯氧乙酸2 mg/L+6-苄氨基腺嘌呤0.4 mg/L.     

不同产地元胡中微量元素含量分析

以火焰原子吸收光谱法,分别对13个产地元胡的5种微量元素(Fe,Zn,Cu,Mn,Ni)含量进行分析,结果显示:不同产地元胡药材中这5种微量元素含量有一定差异,其中Fe元素含量差异最大,范围为33.3³56.25μg/g。该方法回收率在96.41%356.25μg/g。该方法回收率在96.41%¹04%,RSD值均小于5%,能有效反映各个产地微量元素含量,为元胡药效研究和质量检测提供科学依据,同时也为中药材的地道种植提供依据。     

滇产金钗石斛植株与细胞培养产生总生物碱含量分析

选用滇产金钗石斛(Dendrobium nobileLindl)植株不同生长时期和细胞培养不同阶段,采用碱性氯仿提取生物碱,用溴甲酚绿酸性染料比色法测定其含量,最终研究结果表明:金钗石斛茎中总生物碱含量前3年逐年递增,从各部位来看,都呈现叶>茎>根的分布规律,宜3年采收;细胞不同生长阶段中1月至6月总生物碱含量都基本呈现逐月递增。金钗石斛细胞培养具备直接提取替代原药成分的可能性。     

RP-HPLC法同时测定延胡索药材中延胡索乙素和原阿片碱

建立了反相高效液相色谱(RP-HPLC)法同时测定延胡索药材中延胡索乙素与原阿片碱含量的方法，并对不同产地延胡索药材中延胡索乙素与原阿片碱含量进行了考察．结果表明，使用Phenomenex Luna C18色谱柱，甲醇一磷酸盐缓冲溶液(pH=7．68，V：V=65：35)流动相，在检测波长281nm下，测定延胡索乙素与原阿片碱的线性范围分别为0．13～4．68μg和0．09～3．24μg，平均回收率分别为101．86％和98．13％，RSD分别为1．42％和1．36％．结果表明，此法简便、准确、快速，可用于药材中延胡索乙素与原阿片碱含量的测定，也可用于含这两种生物碱的药材的质量评价；两种生物碱含量在不同产地及来源延胡索药材中有较大差别．     

红豆杉愈伤组织诱导及细胞培养的研究

本文研究了从红豆杉（Ｔａｘｕｓｃｈｉｎｅｓｅ）的嫩茎诱导愈伤组织的过程．探讨了红豆杉细胞悬浮培养和平板培养的方法．结果表明：在所实验的３种培养基（ＭＳ，Ｂ５，Ｗｈｉｔｅ）中，虽然都能诱导红豆杉幼茎产生愈伤组织，但以ＭＳ培养基较好，其中ＭＳ＋２．４－Ｄ１ｍｇ／ｌ＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／ｌ培养基愈伤组织诱导率高达９８％．ＭＳ和Ｂ５液体培养基均可作为红豆杉单细胞悬浮培养的培养基，普通平板培养法培养红豆杉单细胞的植板率只有０．０３％，有待改进其它平板培养法     

东北红豆杉细胞悬浮培养研究

东北红豆杉（Taxus cuspidata sieb et zucc)幼茎诱导的愈伤组织经多次继代培养,选择生长旺盛,紫杉醇含量高的愈伤组织进行细胞悬浮培养,建立了东北红豆杉细胞悬浮系,同时,对影响愈伤组织进行细胞悬浮培养,建立了东北红豆杉细胞悬浮系,同时,对影响愈伤组织继代培养及细胞悬浮培养的条件进行了研究,确定了适合愈伤组织生长的条件以及影响细胞悬浮培养的主要因素。