慢病毒载体研究进展

慢病毒作为一种特殊的逆转录病毒,与通常使用的逆转录病毒载体和腺病毒载体比较,具有可感染分裂细胞及非分裂细胞、转移基因片段容量较大、目的基因表达时间长、不易诱发宿主免疫反应等优点,已成为当前基因治疗和转基因动物中载体研究的热点。近年来对其基础生物学特性、载体改造及其应用等研究均取得了较大进展。本文就慢病毒载体及应用方面的研究进展作一综述。     

腺病毒载体在基因治疗中的应用进展

目前基因治疗中的载体主要包括病毒载体和非病毒载体,腺病毒载体具有不整合到基因组相对安全和高感染效率等特点,成为基因治疗中载体研究的热点和突破口。本文就腺病毒载体在基因治疗中的应用做一综述。     

质粒与基因治疗

基因治疗是与传统治疗完全不同的一种新型治疗方法,它针对的是疾病的根源即基因,开创了医学的新纪元。在基因治疗中载体是不可缺少的基因转移工具。质粒作为一类非病毒载体,有着安全性高,制备简单、方便快捷等优点,因此是现今最主要也是被广泛地用于基因治疗的一类载体。本文综述了质粒的特点以及它在基因治疗中的应用机理、应用现状和应用前景。     

基因治疗载体的研究进展

基因治疗已经开始用于肿瘤、癌症及各种遗传性疾病的治疗当中,临床效果已经开始显现,且应用前景广阔。基因治疗的关键是采用适宜的载体材料将外源基因传递至受体靶细胞中,本文总结了基因治疗中常用的病毒、非病毒载体,报道如下。     

基因治疗中目的基因的导入方法

基因治疗正从实验室研究走向临床应用，它给医学界引入了一种全新的概念，基因治疗主要是利用病毒介导的基因转移。文中介绍了目前已应用和将要应用于人类基因治疗的逆转录病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体、疱疹病毒载体等的构建方法，优缺点和适于治疗的疾病。扼要地介绍了目的基因导入的理化方法。     

动物腺病毒载体的研究进展

腺病毒载体是目前基因治疗中应用最广泛的一种病毒载体,与其他病毒载体不同,腺病毒载体的诸多优点决定了腺病毒载体在基因治疗领域中具有广阔的应用前景．文章综述了腺病毒载体的结构、研发过程、构建及应用前景等,为进一步优化和利用腺病毒表达载体提供参考．     

非病毒转基因载体——脂质体

基因治疗已成为目前医药科技研究的热点，脂质体作为一种非病毒转基因载体在临床显露出良好的基因治疗前景，具有非常的潜力。     

人类基因治疗述评（二）

3　关于非病毒载体的设计策略在基因治疗的研究中,关于载体及其改造的研究,关于基因调控的研究,关于非病毒载体的研究均特别引人注目。这里略谈非病毒载体的设计策略。基因转移的非病毒技术近年来取得了迅速的进步。尽管现在多用病毒来转染哺乳动物细胞,但存在一些目前的?..     

慢病毒及其载体系统研究进展

基于慢病毒的病毒载体的研究已经发展到一定水平,因此用慢病毒作为基因转移媒介的临床研究已经开始,在实验室和临床应用中,慢病毒具有特别的优点,尤其是能整合未分裂细胞的独特能力.现在基于HIV的慢病毒载体的临床研究已经开始应用于人体.本文介绍基于HIV-1的慢病毒和慢病毒载体的结构,慢病毒载体的优点以及慢病毒载体应用的展望.     

转基因治疗根性撕脱以及脊髓损伤的研究进展（英文）

根性撕脱伤和脊髓损伤是临床上非常重要的疾病,临床治疗方法很多,但难以成功治愈根性撕脱和脊髓损伤引起的瘫痪或慢性疼痛.基因治疗有可能为有效地治疗根性撕脱伤和脊髓损伤,并减轻对病人、家庭、医疗机构和世界经济的影响.癌症的治疗中基因治疗已解决了临床许多挑战性的问题,靶点基因的脊髓损伤研究从实验室走向临床.本综述从臂丛神经撕脱伤和脊髓损伤相关的血脊髓屏障的解剖和病理表现,脊髓损伤和根性撕脱伤基因治疗的种类,以及治疗脊髓损伤活体动物应用到的基因转运载体的种类,重点阐述病毒和非病毒载体转基因治疗在脊髓的转运路径.靶向脊髓的基因治疗已有很长时间,但仍然有问题没有解决,尤其是如何有效地转导病毒载体入在体动物的神经元仍未清楚.在病毒载体的安全性和设计上的问题未解决之前,临床治疗尚需进一步研究.     

慢病毒载体及其介导的RNA干扰在基因治疗中的应用研究

主要就慢病毒载体及其介导的RNA干扰技术在基因治疗中的应用研究进行了综述,并对其在该领域具有的广阔前景进行了展望.慢病毒载体作为一种新型的载体,可有效地将携带的目的基因导入宿主细胞,并将其整合到宿主细胞基因组中,从而使目的基因得以持久稳定地表达.该载体因具有高感染性、高表达效率及不易诱发宿主免疫反应等优点,已成为基因治疗研究中的一个重要工具.RNA干扰技术可以特异性抑制或关闭特定基因的表达,因此该技术可广泛应用在基因功能探究和恶性肿瘤治疗等领域.由慢病毒载体介导的RNA干扰技术能持久、稳定、特异性地抑制各类细胞中特定基因的表达,在病毒感染、肿瘤等疾病的基因治疗中被广泛应用,成为生物医学领域的新热点.     

HPV16、18型E6/E7融合基因痘苗病毒表达载体的构建

目的:构建一种含人乳头瘤病毒(HPV)16型、18型E6/E7融合基因痘苗病毒表达载体.方法:PCR扩增HPV16型、18型E6、E7基因,克隆到pSC-A载体中,通过定点突变方法,分别构建成含E6/E7融合基因的质粒,即pSC-A.HPV16 E6/E7和pSC-A-HPV18 mE6/E7,并将二者连接成载体pSC-A-HPV16 E6/E7-HPV18mE6/E(pSC-T,HPV16 E6/E7-HPV18mE6/E7:T),最后以痘苗病毒表达载体pJ38为转移载体,构建质粒pJ38-HPV16 E6/E7-HPV18mE6/E7(pJ38-T),对所有重组质粒进行酶切鉴定和测序分析.结果:E6/E7融合基因成功克隆到pJ38上.结论:成功构建表达HPV E6/E7融合基因重组痘苗病毒载体,为研制宫颈癌治疗性疫苗奠定基础.     

Construction and expression of inverted configuration of retroviral vector containing intron 1 of hFIX

Intron was found to play an important role in improving gene expression. To improve the human factor IX(hFIX) expression level in hemophilia B gene therapy study, the retroviral vector containing intron 1 of hFIX gene was constructed in forwarded configuration, but the intron 1 was found spliced in virus particles by RT_PCR detection. So the inverted configuration vector G1NaPAi′IX was suggested and constructed on the basis of SNMBAIXm and transfected into PA317. Then C2C12 cells were transfected using the above virus supernatant and the G418_resistant clones were selected. PCR and RT_PCR detection found that intron 1 structure existed in C2C12 clones and retroviral particles. And the expression level of inverted vector was 3 times higher than that of forwarded vector. These results showed that the inverted configuration vector was in deed able to avoid splicing of intron 1 during the process of retroviral packaging and improved the expression level of hFIX protein.     

There is the second virus that causes tobacco leaf curl disease (not TbLCV-CHI) in the field

Sequence analysis of virus isolation DNA of tobacco leaf curl disease shows that there is the second geminivirus (not Chinese Tobacco Leaf Curl Virus, TbLCV-CHI) that causes tobacco leaf curl disease in the field in the Guangxi Zhuang Autonomous Region, China. This virus DNA-A contains 2 734 nt. Large intergenic region (LIR) contains 269 nt, the virus sense strand contains 2 open reading frames (ORFs): AV1 (115 aa) and AV2 (coat protein gene, CP, 256 aa), and the complementary sense strand contains 4 ORFs: AC1 (replicase gene, 361 aa), AC2 (transactivator, 134 aa), AC3 (134 aa) and AC4 (97 aa). The virus belongs to one kind of subgroup III geminiviruses from old world, and could be the Chinese tomato yellow leaf curl virus (TYLCV-CHI).     

Expression of human clotting factor Ⅸ mediated by recom- binant lentiviral vector in cultured cells and hemophilia B mice

To explore the expression of human clotting factor Ⅸ (hFⅨ) cDNA in vitro and the feasibility of gene therapy for hemophilia B mice mediated by recombinant lentiviral vector, a recombinant hFⅨ lentiviral vector driven by ubiquitin-C promoter, FUXW, and by ABP liver specific promoter, FAXW, was constructed respectively. Recombinant lentivirus was harvested from 293T cells by calcium phosphate-mediated transient cotransfection of three plasmids (transgene vector, CMV腞8.2, VSV-G). hFⅨ expression was detected in supernatant of 293T, BHK and L-02 cells infected with FUXW virus, whereas higher expression of hFⅨ levels (630 ng/106 cells/48 h) was detected only in L-02 cells infected with FAXW virus. Serum hFⅨ antigen was detected in all hemophilia B mice treated with FAXW virus by tail vein injection, an efficiency level of hFⅨ was observed (45 ng/mL, approximately 1% of normal human levels), the expression lasted for more than 60 d. The results indicated that HIV-based lentiviral vectors offer a promising approach to the gene therapy of hemophilia B.     

检测、预防计算机病毒的方法

要使计算机里存储的信息免遭破坏，预防计算机感染病毒或及时发现病毒是非常重要的。本文介绍一种通过检测主导扇区、引导扇区，中断向量表以及若干文件长度的方法，以及时检测出病毒。在检测程序运行后，确认系统不被病毒感染的情况下，再通过修改INT113H的中断向量对任何的写盘操作进行提示。只有用户确认后能执行写操作，从而起到防止病毒感染的作用。     

实验动物雪貂阿留申病病毒核酸检测方法的建立

目的 建立阿留申病病毒PCR检测方法,以用于实验动物雪貂阿留申病病毒的检测。方法 参考Genebank中阿留申病病毒核酸VP2基因序列设计一对引物,建立PCR检测方法,进行特异性、敏感性测试,并对实验雪貂粪便样品进行筛查。结果 测序结果显示,使用设计的引物可特异性地扩增获得阿留申病病毒的VP2中531 bp基因片段;在常见实验动物DNA病毒,小鼠多瘤病毒、小鼠细小病毒、犬细小病毒、疱疹病毒、鼠痘病毒、仙台病毒、小鼠腺病毒中均未扩增出目的条带;以目的片段核酸为模板测试该方法敏感性,检测下限达到90. 6 copy/μL。应用该方法对39份雪貂粪便样品进行检测,未检测出阿留申病病毒核酸阳性。结论 本研究建立的方法具备一定的特异性和敏感性,可作为实验动物雪貂中阿留申病病毒感染病原筛查的方法。