七叶树内生真菌的分离及活性研究

利用组织培养法,从秦岭紫柏山七叶树茎段中分离得到45株内生真菌,通过真菌形态特征和ITS序列分析,将其鉴定到7个属如链格孢属(Alternaria)、鬼伞属(Coprinellus)、枝孢属(Cladosporium)及颈点霉属(Phoma)等。采用紫外-可见分光光度法、高效液相(HPLC)及质谱(MS)方法检测表明,菌株SL-6的代谢产物中存在七叶皂苷类化合物。抑菌活性试验显示,菌株SL-6的发酵液对胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)、油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)及棉花黄萎病菌(Verticillium dahliae)植物病原菌表现出较强的抑制活性。     

杨树内生真菌的分离和鉴定

采用组织分离法,从3种健康杨树休眠芽、叶痕飞树皮、木质组织获得83个真茵茵株,其中部分菌株经形态观察、分类鉴定,归属于2亚门、3 目J 科5属6种,分别是链格抱( A lternaria alternωα ) 飞细极链格抱( Alternaria tenuissimα ) 飞球黑子包(Nigrospora sphαericα ) 飞大刀镰抱( Fusαrium culmorum) 飞球毛壳菌( Chaetomium globosum) 和黑附球菌( EpicoCClιm purpurascens) 0 3 种杨树( 南林351 杨( Pop ulus deltoides hαrvard x P. deltoideslw) 飞土耳其杨(P. deltoides ‘ 8307 - 26’ )和天演杨( P. euranericαna) ) 均是6 种真菌在我国的新寄主。     

八角莲植株地下茎内生真菌的分离

从云南省文山县老君山产的八角莲(Dysosma versipellis)植株的韧皮部(地下茎)中分离得到41株内生真菌,初步鉴定它们分属半知菌亚门的10个属,其中镰刀菌属(Fusarium)和青霉属(Penicil lium)占总数的60%,为优势属,结果表明八角莲内生真菌有着丰富的多样性特点。     

川八角莲内生真菌及根际真菌的分离和鉴定

对生长于云南省嵩明县的川八角莲植株及其根际土壤进行了内生真菌与根际真菌的分离.结果共获得内生真菌29株,分别属于2科4属;获得根际真菌29株,分别属于6科9属,并对这两组真菌类群作了比较研究,对植物内生真菌的起源作了初步探讨.     

喜树果内生真菌的分离与鉴定

从喜树(CamptothecaacuminataDecne.)果实中分离、纯化得到5株内生真菌,经初步鉴定,分别属于半知菌亚门的匙孢霉属(MystrosporiumCda.)、鲜壳孢属(ZythiaFr.)及无孢类群(MyceliaSterilia)。其内生真菌经摇瓶培养后,采用薄层层析(TLC)法对其菌丝体提取物进行分析,初步表明WZ001菌株可能产生喜树碱(Camptothecin,CPT)的类似物。     

一株产紫杉醇的红豆杉内生真菌的分离鉴定

用组织研磨涂布法对中国红豆杉中产紫杉醇的内生真菌进行分离,得到45株内生真菌;通过形态学和分子生物学手段对一株产紫杉醇的菌株Tax-4进行鉴定,其结果为黑团壳属(Massaria)。表明从中国红豆杉中分离得到了一株产紫杉醇的黑团壳属内生真菌,丰富了产紫杉醇内生真菌的资源。     

东北红豆杉内生真菌分离方法的研究

本文论述了东北红豆杉的形态学和生态学特性与内生真菌的概念,探讨了东北红豆杉内生真菌的分离方法。结果表明,分离内生真菌时采用0．1％的升汞液和80％的酒精液作为表面消毒剂、采用PDA和S－7作为分离用培养基较为适宜。     

一株产紫杉醇的内生真菌的分离及产物鉴定

从云南红豆杉树皮中分离得到内生真菌Ｍ１１,经液体、固体发酵,用薄层层析法对该真菌的培养物、菌丝体提取物进行了分析,结果表明菌株Ｍ１１能合成抗癌药物紫杉醇     

桃儿七内生菌及产鬼臼类物质菌株的筛选

目的寻找扩大获得鬼臼类物质资源的新途径。方法采用常规无菌方法从桃儿七植株中分离纯化内生菌;利用细菌和真菌的常规鉴定方法对所分离的菌进行鉴定;用薄层层析（TLC）法检测发酵产物。结果分离得到6株细菌,20株真菌,其中4株真菌（Tc,Td,Te,Mi）可产鬼臼毒素类物质,2株真菌（Mh,Id）可产鬼臼毒素单糖甙。结论桃儿七部分内生真菌具有产生与其宿主相同或相似生理活性成分的能力。     

铁皮石斛内生真菌的分离与鉴定

从铁皮石斛( Dendrobium candidum )的根、茎、叶中分离获得内生真菌共30株,经显微形态观察将其中20株鉴定为3个目、4个科、9个属.结果表明,铁皮石斛不同部位内生真菌的数量、分布和种群存有差异.     

蛇足石杉内生真菌的分离与鉴定

从健康蛇足石杉的茎中分离内生真菌,用PDA培养基分离纯化菌株,对照真菌鉴定手册,根据菌株的菌落形态、大小、颜色、生长速率以及菌丝体和孢子的形态特征进行鉴定。从蛇足石杉的茎中分离出5株内生真菌,经鉴定它们分别属于链格孢霉属、镰刀菌属、无孢类群和青霉属。     

桃耳七中鬼臼毒素的分离与纯化

来自太白山的小檗科植物桃耳七(Sinopodophyllum emodi Wall.)中含有一种抗肿瘤的木脂素--鬼臼毒素.为了通过简便的方法从桃耳七中制得纯度较高的鬼臼毒素,对分离纯化鬼臼毒素的方法进行了研究.发现鬼臼毒素在苯中析出时能生成一种苯加合物,根据这一特性,在不使用柱层析法的情况下,只通过普通的化学分离法制得了质量分数大于95%的鬼臼毒素,总产率为1.7%.     

一株喜树内生真菌次级代谢产物分离纯化及结构鉴定

以一株分离自福建省武夷山自然保护区的喜树内生真菌SXZ-19为研究对象,通过固体平板发酵培养对菌体的化学成分进行了研究.从10L发酵菌体提取物中分离得到8个单体化合物,通过核磁共振以及质谱数据鉴定了化合物1～8的化学结构,分别为:2个线性呋喃聚酮类化合物(1～2);2种真菌毒素(7～8),交链孢酚单甲醚(alternariol monomethyl ether,AME)和交链孢酚(alternariol,AOH);4个洛伐他丁类似物oblongolides D(3),P(4),H(5)和V(6),其中化合物4和5互为差向异构体,为从同一菌株中分离得到oblongolides的差向异构体.     

一株产黄酮银杏内生真菌的分离鉴定与培养介质的初步研究

从银杏（Ginkgo biloba L.)叶片中分离获得了一株内生真菌EG4,经形态学分类研究鉴定为刺盘孢Colletortrichum sp.用TLC分析培养液发现该菌可产生黄酮类化合物,培养生物学特性的研究表明不同的碳,氮源对其生长和代谢有不同的影响,蔗糖和葡萄糖,NH4^ ,能够明显促进其生长;乳糖,NO2^-能够明显促进其酮类物质的合成。     

红树林真菌E33代谢产物的分离及衍生物制备

从南海红树林麒麟菜内生真菌E33中分离到6个化合物,其中alternariol monomethyl ether(1),alterna-riol(2),dehydroaltenusin(3)为首次从海洋红树林真菌里得到,通过酯化反应制备了化合物1的新衍生物7-hy-droxy-9-methoxy-1-methyl-6-oxo-6H-benzo[c]chromen-3-ylacetate(4),这4个化合物对hepG2细胞显示了微弱的细胞毒活性。     

一株柏树内生真菌产生抗肿瘤药物紫杉醇

报道了一株从柏树中分离到的产抗癌药物紫杉醇的菌株,样品采自江苏,是第一例柏树内生菌产紫杉醇的报道,表明产紫杉醇真菌的多样性.简化和改进了提取紫杉醇的方法,可以快速得到一定量的紫杉醇满足TLC分析的需要,该方法提高了处理样品的速度,节省了时间和试剂消耗等,适用于大量样品的初筛.     

小花棘豆(Oxytropis glabra DC.)11株内生真菌的分离培养及鉴定

用小花棘豆(Oxytropis glabra DC.)单株植物叶和茎切段做外植体,体外分离并培养内生真菌,研究菌落和分生孢子的微生物形态特征,对培养出的内生真菌的5.8SrDNA/ITS区进行扩增及序列测定,序列输入GenBank并与已发表的小花棘豆内生真菌序列进行同源性比对,并利用DNASTAR软件包中MegAlign软件构建系统发育树,结合分子生物学及微生物学研究推测内生真菌所属类群.结果显示:11株小花棘豆内生真菌的菌落和分生孢子的微生物形态特征与埃里砖格孢属真菌Embellisiasp.L12特征一致;小花棘豆内生真菌间ITS1和5.8SrDNA区序列相同,与Embellisiasp.L12相比只有一个变异位点,位于5.8SrDNA区,在ITS2区另有两个变异位点.推测小花棘豆内生真菌应与埃里砖格孢属亲缘关系密切,对其物种种属分类地位还须深入研究.     

新疆远志内生真菌的分离及其代谢产物分析

采用组织块法从栽培新疆远志(Polygala hybrida DC)的根、茎、叶中分离内生真菌32株.利用化学成分的系统预试验,对部分菌株发酵液中代谢产物进行研究.结果表明:新疆远志内生真菌代谢产物的种类比较多,主要是皂苷、内脂、香豆素、生物碱、蛋白质及糖类物质.采用薄层层析(TLC)和紫外-可见光分光光度法对内生真菌发酵液进行分析,最终发现真菌YZ-31可代谢产生皂苷等成分.经形态学初步鉴定该菌株为交链孢霉属(Alternaria Nees)真菌.     

女贞（Ligustrun lucidum Ait）内生真菌抑菌活性及发酵条件初探

从女贞茎、叶中分离到21株内生真菌,分别用PDA,YPD和NHK培养基摇瓶发酵培养后获得各菌株发酵液,以E.Coli,B.Subtilis作为测试菌株,寻找最优化产次生代谢产物的发酵条件,综合抑菌活性分析后得出,女贞内生真菌液体培养的最适碳源是蔗糖和淀粉,最适氮源是胰蛋白胨,摇瓶速度为120r/min,瓶装量为70ml/250ml,最适pH7.0,培养时间12天.