生物技术在药用植物三叶青中的应用研究进展

三叶青是一种珍稀的中草药,其提取物含有三叶青黄酮、β-谷甾醇和多糖等,具有良好的抗肿瘤作用,临床上已经用于抗癌、抗艾滋病毒,治疗血液病、心脑血管疾病、肝炎和病毒性脑膜炎等.该文从三叶青的人工栽培、离体快速繁殖和细胞培养、药用活性成分分析等方面,综述了生物技术应用于三叶青中的研究进展,并对今后研究方向进行了展望.     

响应面法优化纤维素酶提取三叶青多糖的工艺研究

为了优化三叶青多糖的酶法提取工艺,选用纤维素酶提取三叶青多糖。通过单因素试验法和响应面分析法,考察酶加量、酶解温度、酶解时间、水料比这4个因素对三叶青多糖提取率的影响。得到的最佳提取条件为:酶加量0.274%,酶解温度60.5℃,酶解时间62.4 min,水料比25.8∶1(体积∶质量,mL/g),此条件下三叶青多糖的实际提取率为10.47%,与理论最佳提取率10.43%相比,相对误差为0.38%。此结果表明,运用响应面法优化得到的工艺条件准确可靠,能够真实地反映各因素对三叶青多糖提取率的影响,该提取工艺稳定合理、客观可行。     

三叶青无性扦插繁殖方法研究

为探讨高效的三叶青扦插繁殖方法,采用五因素四水平正交试验设计,以生根率、平均生根数和平均根长为扦插生根质量的指标,研究插穗类型、扦插基质、植物生长调节物质、处理浓度、处理时间对三叶青扦插繁殖生根的影响.结果表明,对生根质量指数影响效果最大的是扦插基质,其次是植物生长调节剂,处理浓度排第三,处理时间排第四,影响效果最小的是插穗类型.插穗类型为半木质化带二片叶,扦插基质为新鲜黄泥,植物生长调节剂为吲哚-3-丁酸(indole-3-butyric acid,IBA),处理的质量浓度为100 mg/L,处理时间为0.5 h,三叶青生根质量效果最佳.     

三叶青两个肌动蛋白基因片段的克隆及其分析

根据GenBank中登录的植物肌动蛋白保守序列设计1对引物,对三叶青的块根进行RT‐PCR ,在1次扩增中得到2个不同的肌动蛋白基因片段,分别命名为 ThAct1和 ThAct2．测序结果显示：ThAct1基因片段长度为867 bp ,编码252个氨基酸;ThAct2基因片段长度为1079 bp ,编码152个氨基酸．经Blast分析,ThAct1和ThAct2基因均属于NBD＿sugar‐kinase＿HSP70＿actin superfamily家族,与其它物种Actin基因序列和编码的蛋白质均具有同源性．RT‐PCR结果初步表明：在茎、普通根和块根中 ThAct1和 ThAct2基因的表达未见差异;但在叶中,ThAct1的表达稍强,而 ThAct2的表达稍弱．另外,在茎、普通根和块根中,ThAct1表达比ThAct2强;但在叶中 ThAct1表达比ThAct2弱．结果为分析肌动蛋白基因在三叶青块根发育中的功能奠定了基础;获得的肌动蛋白也可以作为内参基因,在三叶青功能基因组的研究中用于其它基因的定量表达分析．     

孙健：提质增效，助力中药材产业发展

正孙健是浙江省中药研究所的一名科研工作者,也是一名从2017年开始服务于淳安县临岐镇的科技特派员。光阴似箭,2020年,他已经和临岐一起成长了3个春秋。2017年,他第一次到临岐。当时,临岐镇的中药材产业方兴未艾、朝气蓬勃。助力药材品质提升为了振兴淳安的药材产业,临岐镇打造了"淳六味"品牌,即以"山茱萸、覆盆子、前胡、黄精、重楼、三叶青"为代表的地产优质药材。     

三叶青ThMYB1及ThMYB2转录因子的克隆及生物信息学分析

三叶青块根内黄酮类化合物对肿瘤的治疗有积极作用，MYB类转录因子在调控植物次生代谢等生物过程中发挥着重要作用，特别是在黄酮类化合物的合成代谢中。克隆三叶青块根中表达丰度最高的两个ThMYB转录因子的cDNA,并对其进行初步的生物学信息分析。经PCR扩增并测序后得到片段长度为1 450bp的ThMYB1及856bp的ThMYB2的扩增产物；生物信息学分析发现，ThMYB1和ThMYB2蛋白质序列与葡萄(Vitis vinifera)及河葡萄(Vitis riparia)的MYB转录因子相似度最高，分别为80.50%及95.93%;信号肽分析表明两种蛋白质均为非分泌蛋白质，属于亲水性蛋白质；细胞亚定位分析表明ThMYB1和ThMYB2位于细胞核的概率最高；蛋白质保守域的分析表明ThMYB1编码蛋白质含有一个SHAQKYF类保守域和一个MYB-CC型转换因子，属于R2R3-MYB亚家族，ThMYB2推测蛋白质存在一个PLN 03212超家族结构域，属于1R-MYB/MYB-related亚家族；系统进化树分析表明ThMYB1与ThMYB2两种推测蛋白质序列相似度较低。实验结果为后续ThMYB...     

人物速览:20名突出贡献科技特派员

<正>白岩（浙江农林大学）2005年始任科技特派员，现被派驻杭州市淳安县枫树岭镇。主持浙江省“尖兵”“领雁”科技攻关项目，引进葛根新品种，开发栀子油新型功能油脂和黄精新型产品，助推三叶青、重楼、黄精、葛、枙子等药材产业发展，拉动当地1.3万亩药材高质量发展。18年来，共培训药农5000余人次，服务企业、合作社、基地等120余个，发放技术资料10万余份，拓展林下药材面积2万余亩，培育药材苗木2100万株，实现药农新增利润约5400万元。     

山奈酚诱导三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231中乳腺癌耐药蛋白的表达并下调抗肿瘤药物对MDA-MB-231细胞的杀伤作用

为确定三叶青活性物质山奈酚对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)的影响及其作用的分子机制,通过定量PCR的方法检测TNBC临床标本及MDA-MB-231细胞中孕烷X受体(pregnane X receptor,PXR)的表达情况;通过荧光素酶报告基因活性检测确定山奈酚对MDA-MB-231细胞中PXR转录因子活性的影响;通过MTT(四唑盐)方法、裸鼠皮下成瘤方法研究了山奈酚以及抗肿瘤药物卡铂、维利帕尼以及拉帕替尼等对MDA-MB-231细胞的抗肿瘤作用。结果表明:PXR在TNBC临床标本以及MDA-MB-231细胞中有明确表达;山奈酚能够诱导MDA-MB-231细胞对抗肿瘤药物卡铂、维利帕尼以及拉帕替尼等对MDA-MB-231细胞的杀伤作用;山奈酚能够诱导MDA-MB-231中PXR的转录因子活性以及PXR下游基因乳腺癌的表达;使用小干扰RNA(small interfere RNA,siRNA)抑制乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)的表达能够逆转山奈酚诱导的抗肿瘤药物耐药。可见,山奈酚诱导TNBC细胞MDA-MB-231中乳腺癌耐药蛋白的表达并下调抗肿瘤药物对MDA-MB-231细胞的杀伤作用。     

三叶青根多糖对HepG2细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的:探讨三叶青根多糖(RTP)对肝癌细胞HepG2增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及其机制.方法:不同质量浓度(0.65、1.25、2.5、5、7.5、10 mg/mL)的RTP作用于肝细胞L-02不同时间(24、48和72 h),MTT法检测细胞增殖,筛选出对肝细胞L-02无毒性的RTP质量浓度.对肝细胞L-02无毒性质量浓度的RTP作用于HepG2细胞24、48和72 h后,MTT法检测细胞增殖,筛选出RTP对HepG2细胞的最佳作用质量浓度和时间.最佳质量浓度的RTP干预HepG2细胞一定时间(最佳作用时间)后,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell检测细胞迁移和侵袭,qRT-PCR法和Western Blot法分别检测细胞中P21、Cyclin D1、Bcl-2、Bax、E-cadherin和MMP-2的mRNA和蛋白表达水平,qRT-PCR检测细胞中miR-151表达水平.转染miR-151抑制剂抑制HepG2细胞中miR-151表达,检测抑制miR-151表达后HepG2细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭及细胞中P21、Cyclin D1、Bcl-2、Bax、E-cadherin和MMP-2的mRNA和蛋白表达情况.结果:低质量浓度(0.65、1.25、2.5 mg/mL)RTP对肝细胞L-02无毒性.RTP作用HepG2细胞的最佳作用质量浓度和时间分别为1.25 mg/mL、48 h,1.25 mg/mL的RTP及抑制miR-151表达均可降低HepG2细胞活性、迁移和侵袭细胞数及细胞中Cyclin D1、Bcl-2和MMP-2的mRNA和蛋白表达水平(P0.05),提高HepG2细胞凋亡率及细胞中P21、Bax和E-cadherin的mRNA和蛋白表达水平(P0.05).并且RTP可抑制HepG2细胞中miR-151表达.过表达miR-151且同时用1.25 mg/mL的RTP作用HepG2细胞时,细胞活性、迁移和侵袭数及细胞中Cyclin D1、Bcl-2和MMP-2的mRNA和蛋白表达水平升高(P0.05),细胞凋亡率及细胞中P21、Bax和E-cadherin的mRNA和蛋白表达水平降低(P0.05).结论:RTP可抑制肝癌HepG2细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调miR-151表达有关.     

浅析MSExcel.NetSnake.a宏病毒的处理方法

随着信息化建设步伐的加快,网络办公因方便、快捷、省时、省力而得以推广和流行,特别是上级单位和下属单位进行沟通工作时,下属单位多,对于一些紧急任务分解等带来了一些麻烦.此种情况下,电子邮件、QQ工作交流群等使用频率高,宏病毒也乘虚而入,给网络办公和协同工作带来了不必要的麻烦和困惑.针对笔者在Eexcel软件中遇到的MSExcel.NetSnake.a宏病毒,从MSExcel.NetSnake.a宏病毒的释义、表现、判断、处理办法等方面做了阐述.     

基于ARM的金属氧化物避雷器在线监测系统设计与实现

针对现有金属氧化物避雷器在线监测系统抗干扰能力差,数据处理不准确,工作不稳定等诸多问题,设计了基于ARM控制芯片和ZigBee技术的MOA在线监测系统,给出了系统的整体设计方案,完成了信号采样、调理单元和ARM终端的设计.采用有线和无线通讯相结合的方式进行通讯,采取屏蔽、接地和隔离等措施进行抗干扰处理.进行了系统主程序、工况辨识子程序、信号采集与分析子程序和通讯子程序等软件设计,采用组态软件技术设计了系统的上位机软件.对数字滤波、FFT变换和基波电流峰值的提取等进行了仿真分析,仿真结果验证了系统的可行性和有效性.     

茶皂素及其在化妆品中的应用

概述了茶皂素的来源、提取工艺、结构和特性,主要介绍了茶皂素在化妆品中的应用.作为基质成分,茶皂素可以用于洗发香波、天然草本洗发露、防晒消炎润肤膏、沐浴液等,它不仅具有良好的乳化、发泡、分散、渗透、润滑等活性作用,而且还具有消炎、镇痛、杀菌、止痒等药理作用.同时介绍了茶皂素在化妆品及纺织品洗涤、医药和农药等方面的应用前景.     

几种重要工业沸石概况

介绍了NaA、NaY和ZSM-5等重要沸石的工业合成.讨论了合成中的化学、技术及经济等因素.此外,还描述了SiCl_4脱铝和沸石的成型等过程.     

银杏叶部病害的发生与防治研究

调查了鄂北地区银杏集中产区的安陆、随州等市的银杏苗圃、叶用林和果用林的银杏叶部病害的种类和危害状况.结果表明,危害银杏叶片的病害主要有黑斑病、炭疽病、叶斑病和轮纹病等4种.果用林发病较重,叶用林次之,苗圃较轻.针对病害的发生原因,提出了相应的防治措施.     

电动汽车能耗分配及影响因素分析

为了在电动汽车设计中合理分配有限的车载能源,对电动汽车各耗能部件能耗情况进行了研究.确定了电动汽车能耗评价指标,分析了车身设计、工况和温度等因素对能耗的影响.通过实际的测量和分析,得到了电动汽车耗能部件的能耗分配关系,纯电动大客车驱动效率约为75%.提出了再生制动、加强部件润滑、轻量化设计、减小电池内阻等降低能量消耗率的措施和方案.     

扶持小微企业发展的法律环境建立与完善

为了发挥小微企业在活跃市场和解决就业及科研创新等方面的重要作用,针对中国小微企业现状,分析了小微企业规模小、扶持弱、创新差和融资难等问题.对美、日、德和中国的相关法律法规进行了比较分析.提出了改善法律环境,健全管理机制,完善社会服务体系等引导和扶持小微企业发展的措施.     

抗菌肽的研究进展

抗菌肽具有分子量小、热稳定性好、无免疫原性、抗菌谱广等特点.并且,抗菌肽对畜禽具有促生长、保健和治疗疾病等功效;无毒副作用,无残留、无致细菌的耐药性等特性.在动物养殖和提高畜产品品质方面,抗菌肽也具有重要的潜在应用价值.文章结合当今抗菌肽的研究现状和发展前景,对抗菌肽的分类、抗菌机理、应用状况等方面进行了综述.     

制备水性聚氨酯的物料和方法

介绍了适合于制备PU的物料,包括了多异氰酸酯和催化剂等.介绍了制备水性聚氨酯的方法,如外乳化法和包括保护端基法、丙酮法、熔融分散法、酮亚胺-酮连氮法与预聚物法等在内的内乳化法.指出了只有通过交联和复配的方法,才能得到高性能的PU乳液.     

基于IBE算法的无线传感器网络加密方法研究

由于无线传感器网络在电源、计算能力、内存容量和易受攻击等方面的局限性,传统的网络密钥分配和管理方法已不适用.目前人们提出了随机分配等基于对称密钥系统的加密方法.文中试图探讨基于非对称密钥系统的方法.从身份标识的密钥体系IBE(Identity-Based Encryption)出发,给出了一种适用于无线传感器网络的密钥分配和管理方法.首先简要介绍基于身份标识的密钥体系,特别是Boneh-Franklin算法,然后给出密钥分配和加密方法,并从算法的复杂性、安全性、健壮性和内存需求等方面,与随机算法、RAS算法等进行分析比较,应用仿真平台TinyOS的实验结果表明了文中推出方法的可行性和有效性,显示了良好的综合性能,为无线传感器网络的加密提供了新的手段.     

题库管理与试卷自动生成系统的设计

题库、试卷是教育部本科评估的指标和观测点,传统手工编制的试卷经常出现内容雷同、知识点不合理以及笔误、印刷错误等情况.介绍了一个题库管理与试卷自动生成系统的设计与实现,系统具有题库管理、试卷自动生成和在线考试等功能.系统采用Visual Basic.NET 2003和SQL Server作为开发工具,在不同功能模块分别采用C/S模式和B/S模式,试卷的生成格式为Word文件.整个系统的设计应用了公用函数封装、动态链接库、MD5加密算法和ADO.NET等技术.