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应用阻抑性RACE方法克隆得到白鲫鱼的两个MT全长CDNA(MT-A和MT-B),它们可读框间的同源性为92.3%.用封闭式充氮层析系统得到高纯度的两个白鲫鱼肝MT蛋白,并用Edman法测定了N-端氨基酸序列.据此证明了MT-B是表达MT-2蛋白的基因,MT-A是表达MT-1蛋白的基因.此外测序过程中发现MT-1的N-端被封闭,而MT-2则是非封闭的,这提示它们在转录及翻译后调控机制的不同.白鲫鱼MT两基因的核酸序列和尾部非翻译区长度的差异(MT-A约150 hp, MT-B约360 bp),以及两 MT蛋白亚型的N-端封闭情况的不同,都为解释它们在组织中分布及其功能的差异性提供了线索. 相似文献
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选用α1B-肾上腺素受体(α1B-AR)密度分别为(6336±913)和(773±164)fmol·mg-1的两株克隆HEK293细胞,分别用高表达和低表达α1B-AR表示,比较去甲肾上腺素(NE)持续作用下不同初始表达水平的α1B-AR发生密度改变的差别.结果显示: 10μmol·L-1NE持续作用48h可使高表达以α1B-AR的密度发生下调,却可使低表达α1B-AR的密度发生上调.蛋白激酶C(PKC)抑制剂RO-31-8220或Calphostin C可消除NE对高表达α1B-AR的下调作用,但对低表达α1B-AR的密度上调无影响.PKC激动剂PMA不仅可模拟NE对高表达α1B-AR的下调作用,而且使低表达α1B-AR的密度也发生下调.肌浆网/内质网钙泵抑制剂CPA和内钙螯合剂BAPTA-AM不影响NE对高表达α1B-AR的下调作用,但可部分抑制低表达α1B-AR的上调.以上结果提示,NE持续作用可对初始表达水平不同的α1B-AR密度产生不同方向的调节作用,作用机制亦不尽相同. 相似文献
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人δ珠蛋白基因启动子区-64位C→T点突变对DNA结合蛋白的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
用凝胶迁移改变实验研究了人δ珠蛋白基因启动子区-64C→T点突变对DNA结合蛋白的影响,人工合成两条36bp该基因启动子区-83--48bp之间的片段WOG和MOG,WOG含有野生型“CAAT样盒”以及,MOG含有变异型“CAAT样盒”。结果表明:(1)在红系细胞MEL,k562以及经Hemin诱导的k562细胞中,MG对CCAAT结合蛋白和GATA-1的要和力显著增加;(2)经Hemin诱导的k 相似文献
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用密度泛函理论(DFT)的B3LYP/6-31G*方法,对(HAlNH)的低聚物(HAlNH)。(n=1~15)团簇的几何构型、电子结构、振动光谱和化学热力学性质进行了研究,得到了它们的基态结构.比较了(HAlNH)n团簇骨架和(AlN)n团簇的差异.结果表明,(HAlNH)n团簇骨架是由Al-N键形成的四元环和六元环构成的,每一个Al或N原子形成4个化学键,其中3个为Al-N键,1个为Al-H或N-H键.(HAlNH)n(n=1-15)团簇中Al-N键的数目与对应的(AlN)n团簇相等.(HAlNH)n(n=1—15)团簇结构的稳定性幻数序列为: n= 2,4, 6, 8, 10, 12, 14等偶数. 相似文献
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膜基质金属蛋白酶和金属蛋白酶抑制因子-1 在早期胎盘中的表达及其功能的研究 总被引:6,自引:1,他引:5
用原位杂交方法研究了人早期胎盘中膜型金属蛋白酶(MT-MMP-1)和金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的分布。结果表明:(1)在绒毛滋养层细胞和与其邻近的蜕膜细胞中MT-MMP-1和TIMP-1的表达量相对较高;(2)在基底盘,Rohrs和Nitabuch纹间的外绒毛膜滋养细胞,滋养层和蜕膜的腺体细胞表达最高;(3)胎膜分离层和绒毛干的少量细胞滋养层细胞以及蜕膜和绒毛干的血管壁上有明显的MT- 相似文献
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山羊 β-酪蛋白基因启动区指导人血清白蛋白在转基因小鼠乳汁中的高效表达 总被引:3,自引:0,他引:3
构建了包含山羊β-酪蛋白基因启动区5′端上游调控序列和外显子1,2及内含子1在内的乳腺表达载体,并与人血清白蛋白(hALB)小基因(含全长cDNA序列及其内含子1)构建成融合基因,鼠尾静脉注射实验表明,该融合基因能在小鼠乳腺中特异表达,应用显微注射方法交该融合基因导入小鼠受精卵,并将受精卵移植于假孕母鼠,共获得33只F0代小鼠,经PCR和Southern印迹杂交证实,有8只小鼠基因组中整合有hAL 相似文献
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玉米自交系P9-10遗传转化体系的建立 总被引:12,自引:2,他引:12
在N6培养基中添加10^-4mol.L^-1AgNO3可促进玉米P9-10自交系幼胚诱导产生I型胚性愈伤组织,把这些胚性愈伤组织经高渗处理后作为受体,用基因枪转化含Bt基因的pMG6质粒,通过选择压递增式筛选,得到了14个抗性克隆。抗性克隆3种不同的培养基中共诱导出10个胚状体,经分化得到10个再生植株累PCR和Southern杂交分析证实有8个再生植株的基因组中整合有Bt基因。ELISA分析结果 相似文献
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DREB转录因子在提高植物抗逆性中的作用 总被引:114,自引:3,他引:111
拟南芥rd29A基因编码一种与LEA蛋白相似的亲水性很强的蛋白,该基因的表达受干旱、高盐及低温的诱导、rd29A基因启动子区域中的有两个与上述环境胁迫应答有关的DRE顺式作用元件,利用rd29A基因启动子的DRE顺式作用元件和酵母One-Hybrid方法,两类与DRE元件特异结合,在低温或干旱、调卤胁迫条件下调控报道基因表达的南芥DREB转录因子被克隆及鉴定,分别定名为DREB1A ̄C和DREB2 相似文献
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运用凝胶电泳阻抑法揭示了在活跃表达人ε-珠蛋白基因的K562细胞内存在一个红细胞专一的核基质蛋白(简称ε-NMPk),它能专一与正调控元件ε-PRE-ⅡDNA(-44 ̄419bp)相结合,Southwestern blotting分析表明,-ε-NMPk是由2个分子量约为40ku的亚基所组成,还发现在K562,HEL和Raji细胞中都至少存在着1个核基质蛋白,它们能ε-珠蛋白基因5′旁侧DNA序列 相似文献
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以往研究提示,c-myc和c-erbB-2癌基因在鼻咽癌中有过表达.为了阐明这两种癌基因过表达的分子机制,应用当前肿瘤研究新技术──组织微阵列,结合间期双色荧光原位杂交(FISH)和免疫组化(IHC),对267例鼻咽癌组织、24例癌旁组织和29例鼻咽部慢性炎症组织进行了大样本研究.结果发现,鼻咽癌c-myc和c-erbB-2癌蛋白过表达发生率分别为48%~63%和20%~38%;但c-myc和c-erbB-2两个癌基因在鼻咽癌中均无扩增;8与17号着丝粒探针杂交则分别显示有43%~50%和20%~27%的鼻咽癌染色体呈现多体性. 蛋白表达分析表明,c-erbB-2表达与17号染色体多体性有关(P<0.0005). 相似文献
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