外界条件对球孢白僵菌几丁质酶的影响

本文研究了球孢白僵菌(Beauveria bassiana)的培养条件——温度、初始pH值、接种量、培养时间等对产几丁质酶的影响;探讨了几丁质酶活性与几丁质浓度、粒子大小、酶解温度、pH值的关系;从而获得了高活性几丁质酶的培养条件及生物转化几丁质废物的适宜环境.     

禾谷镰孢菌原生质体的制备和再生研究

为建立禾谷镰孢菌（Fusarium gromineanum Schwabe）转化体系，选用禾谷镰孢菌株F128为受体，分别用裂解酶、蜗牛酶、崩溃酶、纤维素酶、几丁质酶消化该菌细胞壁，都可获得一定数量的原生质体。其中产生原生质体效率最高的是崩溃酶，而且以5g／L浓度产生的原生质体数量最多，消化3．5－4．5h即可获得相当数量的原生质体，菌量的加入以每毫升酶解液中加入20mg湿菌性产生的原生质体最多。所制备出的原生质体的再生方式至少有2种。     

抑制多种植物病原菌的几丁质酶产生菌X2-23的鉴定

样品经纹枯病菌细胞壁培养基富集后 ,从 16 6株几丁质酶产生菌中分离得到一株高产几丁质酶细菌X2 2 3.X2 2 3对所有指示菌如水稻纹枯病、稻瘟病、水稻恶苗病、小麦赤霉病、油菜菌核病以及水稻白叶枯病等多种病原菌均具强烈的拮抗作用 .当X2 2 3加入上述病原真菌的液体培养基中时 ,由光学显微镜和电子显微镜观察发现病原真菌菌丝发生扭曲、变形、菌丝细胞壁肿胀裂解、细胞质聚集、原生质体外溢或裸露等异常现象 .几丁质酶活性达 2 5 .5U/mL .该细菌经鉴定为圆孢芽孢杆菌 (Bacillusglobisporus) ,是一种新的几丁质酶产生菌 .     

球孢白僵菌毒素对昆虫体外培养细胞的超微结构和细？…

用吸附法从球孢白僵菌的代谢产物中提取毒素，并将毒素作用于草地夜蛾体外培养细胞Ｓｆ－２１细胞株，以研究球孢白僵菌毒素的昆虫致病机理，扫描和透射电镜观察结果表明，在毒素作用下，培养细胞的细胞膜，细胞核，线粒体和核糖体均有很大程度的损伤。     

不同碳、氮源与诱导物对球孢白僵菌产几丁质酶的影响

本实验通过研究各种不同碳、氮源及诱导物的作用,探求了提高白僵菌产几丁质酶活性的可能途径。一、材料和方法1.菌种球孢白僵菌(Beauveria bassiana 017)由吉林省农科院植保所提供。2.培养基 1)种子培养基:马铃薯葡萄糖琼脂斜面。2)基本培养基(g％):MgSO_4,KCI及K_2HPO_4均为0.075％,FeSO_4为0.001％,自然pH值,于300ml     

球孢白僵菌毒素对昆虫体外培养细胞胞内同功酶和代…

用吸附法从珠孢白僵菌的代谢产物中提取毒素，并将毒素作用于草地夜蛾体外培养细胞，以研究球孢白僵菌的昆虫致病机理，同功酶特异性染色结果表明，细胞中毒后，细胞内的乳酸胶氢酶，苹果酸脱氢酶，酯酶等同功酶在种类和含量上有所减少。并发现其细胞代谢紊乱，当毒素质量浓度在０－５００ｍｇ．Ｌ＾－１时，培养液中的葡萄糖和蛋白的质量浓度随细胞中毒加深而升高。     

电子束诱变球孢白僵菌高产几丁质酶的研究

本文利用电子束诱变球孢白僵菌分生孢子．比较不同诱变剂量对白僵菌产几丁质酶的影响。实验结果，在诱变剂量为０．０４×１０６ｒａｄ时，发生正变的机率较高，部分菌株几丁质酶活力比出发菌株提高１．２８倍。     

球孢白僵菌毒素对昆虫体外培养细胞胞内同功酶和代谢水平的影响

用吸附法从球孢白僵菌（Beauveriabassiana）的代谢产物中提取毒素，并将毒素作用于草地夜蛾（Spodopterafrugiperda）体外培养细胞，以研究球孢白僵菌的昆虫致病机理．同功酶特异性染色结果表明，细胞中毒后，细胞内的乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、酯酶等同功酶在种类和含量上都有所减少．并发现其细胞代谢紊乱，当毒素质量浓度在0～500mg·L(－1)时，培养液中的葡萄糖和蛋白的质量浓度均随细胞中毒加深而升高．     

粗糙脉孢菌中几丁质合酶1缺失突变体的构建及表型分析

在丝状真菌中,几丁质是真菌细胞壁的主要成分之一,对维持细胞形态和结构起到了重要的作用.几丁质是由几丁质合酶(chitin synthase,CHS)催化合成的,几丁质合酶参与生物钟调节的生理活动.本文以丝状真菌粗糙脉孢菌几丁质合酶1(CHS-1)为研究对象,通过同源重组基因敲除技术、电转化、分生孢子过膜以及PCR鉴定的方法,获得了chs-1缺失突变菌株CHS-1KO.通过竞争性生长管(racetube)培养分析发现:对照Ku70RIP和突变菌株CHS-1KO(Ku70RIP背景)均具有明显的分生孢子带,但分生孢子带昼夜节律周期缩短,直线生长速率显著减慢,ku70RIP菌丝生长长度是3.4±0.31 cm/24 h,而突变菌株CHS-1KO(Ku70RIP背景)菌丝生长长度是2.07±0.19 cm/24 h.并进一步结合细胞壁染色对细胞形态分析发现:变菌株CHS-1KO菌丝沿生长方向膨胀、分支变短.这些结果表明:几丁质合酶1在粗糙脉孢菌分生孢子带昼夜节律形成和菌丝生长中发挥重要的作用.     

球孢白僵菌产几丁质酶液态发酵研究

对球孢白僵菌Bb174产几丁质酶的液态发酵条件进行了试验研究。选择麸皮和蚕蛹粉作为培养基的基本成分。以不同比例的麸皮和蚕蛹粉进行试验,结果显示:麸皮和蚕蛹粉分别为5％,培养温度28℃,接种量10％,装液量10mL,起始pH6.0,添加0.3％NaNO_3对产儿丁质酶有利,最高酶活力为4664U/mL。     

紫外诱变球孢白僵菌选育几丁质酶高产菌株方法的研究

本实验利用紫外线对白僵菌进行诱变，比较了不同诱变剂量对白僵菌产几丁质酶的影响，从而筛选出几丁质酶高产菌株．     

Bt和球孢白僵菌混配对酒曲害虫黑菌虫的毒杀效果研究

利用苏云金芽孢杆菌与球孢白僵菌混配杀灭酒曲害虫黑菌虫．研究结果表明：在温度40℃、相对湿度73％～75％条件下,苏云金芽孢杆菌杀虫剂与球孢白僵菌杀虫剂以5：4混配时能有效杀死酒曲害虫黑菌虫,杀虫至第15天可以使黑菌虫的校正死亡率达93．33％．     

Discovery and demonstration of the teleomorph ofBeauveria bassiana (Bals.) Vuill., an important entomogenous fungus

A Cordyceps specimen was collected in Anhui, China, a strain of Beauveria bassiana, an important ento-mopathogenic fungus for biological pest control, was isolated and their relationship was demonstrated by microcycle co-nidiation. The teleomorph is an undescribed species and is named Cordyceps bassiana.     

不同温湿度下白僵菌对红缘天牛幼虫致病力的研究

为了寻找白僵菌(Beauveria bassiana)对红缘天牛(Asias halodendri)的最佳作用条件,测定不同的温、湿度条件下,白僵菌作用于红缘天牛幼虫后,幼虫的死亡情况.结果表明:(1)31℃是白僵菌感染红缘天牛幼虫的最佳温度.该温度下,幼虫在5 d的校正死亡率高达77.78%,致死速率快,LT50仅为0.121 d,僵虫率为46.67%,显著高于其他各组,温度增高或降低,都会使致死速率和僵虫率降低;(2)相对湿度>90%时,白僵菌对红缘天牛幼虫的致死效果最好,此时的校正死亡率和僵虫率分别为100%和63.33%,致死速率也最快,LT50为1.017 d,相对湿度降低时,幼虫的校正死亡率和僵虫率显著降低.     

不同温湿度下白僵菌对2种沟眶象成虫的致病力研究

研究不同温、湿度条件下白僵菌对臭椿沟眶象成虫和沟眶象成虫的致病力情况.结果表明,当温度为28℃时,白僵菌对臭椿沟眶象及沟眶象成虫的致死效果均为最好,校正死亡率和僵虫率分别为100%、80%和43%、40%.此时致死速率最快,致死中时(LT50)分别为2.130 d和5.023 d;当湿度为80%～90%时,白僵菌对臭椿沟眶象成虫和沟眶象成虫的致死效果均为最好,校正死亡率和僵虫率分别为100%、90%和63%、60%.同时致死速率最快,其致死中时(LT50)分别为1.384 d和3.269 d.由此可知,在适宜的温、湿度条件下白僵菌对臭椿沟眶象及沟眶象成虫均有较强的杀虫活性.     

猴头菌原生质体制备条件的研究

比较了不同酶液、酸碱度，渗透压稳定剂，菌龄和菌丝培养基成分等因素对猴头菌菌丝释放原生质体作用的影响。结果表明：在土豆培养基（ＰＤＰ）上静止浅层培养９６小时的菌丝，用２％的溶壁酶液，以０．６ｍｏｌ／ＬＭｇＳＯ４为渗透压稳定剂，在ＰＨ５．５的条件下酶解，获得的原生质体数最大。     

高山被孢霉高产ARA的原生质体融合子筛选

利用原生质体融合技术,对两株单一优良性状差异显著的高山被孢霉菌株F24和G12进行原生质体融合,再采用双灭活或流式细胞分选法筛选优良性状相结合的高产菌株,对双亲菌株原生质体的制备、融合和再生的相关条件进行了研究,并对双灭活和流式细胞分选的具体方法进行了研究.经研究发现,采用培养16 h的高山被孢霉菌丝于混合酶液(蜗牛酶15.0 mg·m L~(-1)、纤维素酶6.0 mg·m L~(-1)、溶菌酶0.5 mg·m L~(-1)和几丁质酶0.2 mg·m L~(-1))中30℃酶解4 h为原生质体制备的最佳条件.并探究得出两种融合子筛选方法的最佳方案,成功筛选出融合子,进一步再生培养验证ARA产量,最终挑选出一株ARA产量达6.32 g·L~(-1)的高产菌株.以前尚未发现此方法在高山被孢霉上的应用,为高山被孢霉育种提供了一种有效的手段.     

球孢白僵菌毒素对昆虫体外培养细胞的超微结构和细胞内总蛋白的影响

用吸附法从球抱白鹰菌（Ｂｅａｕｖｅｒｉａ　ｂａｓｓｉａｎａ）的代谢产物中提取毒素,并将毒素作用于草地夜蛾（Ｓｐａｏｄｏｐｔｅｒａ　ｆｒｕｇｉｐｅｒｄａ）体外培养细胞Ｓｆ－２１细胞株,以研究球抱白僵菌毒素的昆虫致病机理．扫描和透射电镜观察结果表明,在毒素作用下,培养细胞的细胞膜、细胞核、线粒体和核糖体均有很大程度的损伤．聚丙烯酸胺凝胶电泳结果表明,其细胞内总蛋白的种类和含量均有所改变,进一步证明,细胞完整结构的破坏导致了细胞内物质环境稳定性的破坏．