前列腺癌组织中PSA、IL-6、IL-8的表达及作用机制分析

目的探讨前列腺癌(PCa)组织中前列腺特异性抗原(PSA)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)的表达及作用机制.方法选取60例PCa患者,另选取60例前列腺增生(BPH)患者作为对照,分别取受试者的PCa及BPH组织标本,应用免疫组织化学法检测不同组织中PSA、IL-6及IL-8的表达情况,并分析PSA、IL-6及IL-8的表达与PCa患者的临床病理特征关系.结果 PCa组织中PSA、IL-6及IL-8的表达率均高于BPH组织(P0.05).临床分期T3～T4期、低分化、淋巴结转移PCa组织中PSA、IL-6、IL-8表达率显著高于临床分期T1～T2期、中高分化、无淋巴结转移组织(P0.05).经Pearson相关性分析:PCa组织中PSA与IL-6、PSA与IL-8、IL-6与IL-8均呈正相关关系(P0.05).结论 PSA、IL-6、IL-8在PCa组织中呈明显高表达,且均与PCa患者的临床分期、分化程度及淋巴结转移密切相关.     

转录因子KLF7高表达与前列腺癌发生的相关性及其靶基因预测

目的探讨KLF7高表达与前列腺癌(PCa)发生的相关性,并对其可能的下游靶基因进行筛选。方法比较前列腺增生(BPH)患者(n=22)以及PCa患者(n=30)血糖、血脂及一般资料的差异;调取石蜡包埋的前列腺组织标本,运用免疫组织化学法检测组织中KLF7及其下游因子IL-6,以及肿瘤发生相关因子E-钙粘蛋白、Ki67的表达量。运用统计学方法,比较各因子在BPH和PCa患者前列腺组织中的表达差异,并分析KLF7表达与各因子之间的相关性。运用Cistrome Data Browser数据库对KLF7可能的下游靶基因进行预测。结果 PCa患者血清中总前列腺特异性抗原(TPSA)含量显著高于正常体检及BPH个体(P0.001); PCa患者前列腺组织中KLF7及IL-6表达量显著高于BPH患者前列腺组织(P0.05),肿瘤发生相关因子Ki67表达量显著高于BPH患者前列腺组织(P0.05),E-钙粘蛋白的表达量在两组间无显著差异。相关性分析结果显示:前列腺癌组织中KLF7的表达与患者血清中TPSA含量显著正相关(r=0.465,P=0.001),与癌组织中IL-6的表达显著正相关(r=0.437,P=0.014),与癌组织中Ki67的表达显著正相关(r=0.434,P=0.002),与癌组织中E-钙粘蛋白的表达显著正相关(r=0.473,P=0.009)。生物信息学分析结果显示:转录因子KLF7可能通过调控肿瘤相关基因STAT3,DDX20,ZNF233,ZNF581,ZNF487,ZNF580,ZNF391,ZNF793,HMGB1,DMAP1,CTNNB1,ZBTB45等参与肿瘤的发生发展。结论 KLF7高表达可能是前列腺癌发生的危险因素,前列腺癌组织中KLF7的表达与IL-6、Ki67以及E-钙粘蛋白的表达显著正相关。KLF7可能通过调控一系列肿瘤相关基因的表达参与肿瘤发生发展的过程。     

细胞因子IL-17E、IL-17F及其受体在前列腺癌组织中的表达及意义

目的探讨细胞因子白细胞介素17E(IL-17E)及其受体白细胞介素17RB(IL-17RB)、细胞因子白细胞介素17F(IL-17F)及其受体白介素17RC(IL-17RC)在正常前列腺组织(normal prostate,NP)、良性前列腺增生组织(benign prostatic hyperplasia,BPH)和前列腺癌(prostate cancer,Pca)组织中的表达差异.方法利用免疫组织化学染色法检测了6例NP、39例BPH和20例Pca标本中IL-17E、IL-17RB、IL-17F和IL-17RC阳性表达率,并分析配体与相应受体阳性表达率的相关性,配体阳性表达率与前列腺癌恶性程度的关系.结果在前列腺组织中,IL-17E、IL-17RB、IL-17F和IL-17RC主要表达于腺上皮细胞以及单个核细胞,少部分表达于血管内皮细胞及部分癌细胞.与BPH和NP比较,在Pca组织中,IL-17E表达明显降低,差异具有统计学意义(P0.05),且随着前列腺癌Gleason分级增加,IL-17E的表达降低;与NP比较,IL-17RB在Pca中表达增加,差异具有统计学意义(P0.01);与BPH和NP比较,IL-17F在Pca组织中表达明显增加,差异具有统计学意义(P0.05),随着前列腺癌Gleason分级的增加,IL-17F表达增强;与BPH和NP比较,IL-17RC在Pca中表达也增加,差异具有统计学意义(P0.05,P0.01);在Pca组织中,IL-17F与IL-17RC表达呈正相关性(r=0.633,P=0.021).结论 IL-17F可能具有促进前列腺癌发生发展的效应,而且主要是通过IL-17F—IL-17RC信号通路的激活实现的.     

前列腺癌的IVIM-DWI及其与MVD的相关性分析

目的:探讨体素内不相干运动弥散加权成像(IVIM-DWI)技术在前列腺癌中的诊断价值,并结合CD34病理染色结果,分析IVIM-DWI各灌注相关参数的病理生理学基础.方法:采用3.0T核磁共振对符合纳入标准的前列腺癌患者(PCa组)24例[平均年龄(74.29±7.77)岁]及良性前列腺增生患者(BPH组)21例[平均年龄(70.48±9.40)岁],行IVIM-DWI检查,应用经典双指数函数模型对所得数据进行处理分析得到相关定量参数D、D*、f值.对行根治性切除手术的前列腺癌及良性前列腺增生患者的病理切片行CD34染色并计算微血管密度(MVD).结果:PCa组中D值及f值较BPH组明显减低,而D*值明显升高,差异有统计学意义(P0.05).PCa组中D*值与MVD显著正相关(r=0.793,P0.05),BPH组中f值与MVD显著正相关(r=0.766,P0.05).结论:IVIM-DWI各相关参数(D、D*、f值)在前列腺癌与良性前列腺增生的鉴别中具有明确的诊断价值.前列腺癌中D*值的升高与前列腺癌组织内微血管密度密切相关,而f值的减低可能与癌灶中血管通透性的异常有关.     

MGLL在前列腺癌组织中的表达及其对癌细胞生长的调控作用

目的:探索单酰甘油脂酶(MGLL)在前列腺癌(PCa)中的表达及其临床预后.方法:利用基因表达谱交互分析(GEPIA),Oncomine及人类蛋白质图谱(THPA)生物信息学工具,分析癌症公共数据库TCGA及GEO中PCa及对照样本中MGLL的mRNA及蛋白表达情况,基于TCGA数据库中的PCa病人样本信息进行生存分析,观察MGLL与成纤维细胞生长因子(FGF)/磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B (AKT)信号通路中关键蛋白的共表达相关性.通过Western blot检测MGLL在PCa细胞系中的表达;通过Transwell检测过表达MGLL对PCa细胞系迁移和侵袭的作用.结果:Oncomine数据库中检索到6组PCa研究队列,GEPIA工具共有492例PCa样本及52例前列腺对照样本.发现在Oncomine的多个PCa队列研究中,与对照前列腺组织相比,MGLL mRNA在PCa组织中显著低表达(P0.021).GEPIA分析的TCGA队列显示,MGLL在PCa中的mRNA水平亦显著降低(P0.01).THPA在线工具表明,MGLL蛋白在正常前列腺组织中高表达,而在PCa组织中低表达.蛋白水平与mRNA水平趋势一致.GEPIA的生存分析表明,MGLL表达水平与PCa患者总生存期(OS)和无瘤生存期(DFS)密切相关,MGLL低表达患者的预后较差(P=0.018;P=0.034).蛋白共表达分析表明,PCa中MGLL与FGF受体FGFR1、PIK3CA、AKT2、GSK-3B及CRMP2均成正相关(R=0.6,P=0;R=0.36,P=0;R=0.22,P0.001;R=0.36,P=0;R=0.5,P=0).Western blot检测表明MGLL在多个PCa细胞系中低表达,且过表达MGLL会抑制PCa细胞的迁移和侵袭能力(P0.05).结论:MGLL在PCa组织及癌细胞系中低表达,且与癌患者预后相关,其机制可能与PI3K/AKT/GSK-3B信号通路相关.     

IVIM-DWI对外周带前列腺癌的诊断价值

目的:探讨3.0TMR体素内不相干运动扩散加权成像(IVIM-DWI)定量参数对外周带前列腺癌(PCa)的诊断价值.方法:回顾分析经超声引导穿刺病理证实的51例外周带前列腺病变患者资料,其中27例为前列腺癌患者(恶性组)、36例为良性前列腺增生(BPH)和/或慢性前列腺炎(CP)患者(良性组).对所有患者均行前列腺常规MRI扫描及体素内不相干运动磁共振扩散加权成像(IVIM-DW)扫描,IVIM-DWI采用14个b值(b=0、25、50、75、100、150、200、400、600、800、1 000、1 200、1 500、2 000 s/mm~2).GE ADW4.6 Functool后处理软件计算病变组织内感兴趣区的表观扩散系数(ADC)、纯水分子扩散系数(D值)、灌注相关扩散系数(D~*值)及灌注分数(f值).采用独立样本t检验比较PCa组和BPH组各参数值的差异,对于两组间具有统计学差异的参数值,建立受试者工作特征曲线分析各参数值对前列腺癌的诊断效能.结果:PCa组的ADC值、D值及f值均明显低于BPH组,有统计学差异(P0.05).各组间D~*值无统计学差异(P=0.581).结论:IVIM的定量参数ADC值、D值对外周带前列腺良恶性病灶的诊断及鉴别价值均较高,以ADC值的诊断效能最优.     

转录抑制因子锌指蛋白57在前列腺癌组织中的表达

目的探讨转录抑制因子锌指蛋白57(ZFP57)在前列腺癌组织中的表达及意义.方法收集行前列腺穿刺活检的石蜡包埋组织标本,其中前列腺癌组织92例,癌旁组织24例,良性增生组织24例,正常前列腺组织24例.使用免疫组化法半定量检测组织标本中ZFP57的表达情况;Western blot定量检测ZFP57蛋白的相对表达量.收集前列腺癌患者TNM分期、Gleason评分、转移情况、前列腺癌特异性抗原(PSA)血清水平,分析与ZFP57表达的关系.结果免疫组化检测显示:前列腺癌组织中ZFP57阳性率明显低于本研究中其他组织标本,差异具有统计学意义(P0.01);ZFP57阳性率在正常前列腺组织、良性增生组织、癌旁组织间比较差异无统计学意义(P0.05).Western blot检测显示:前列腺癌组织中ZFP57的相对表达量明显低于本研究中其他组织标本,差异具有统计学意义(P0.01).不同TNM分期、Gleason评分、转移情况、PSA水平的前列腺癌患者ZFP57阳性率之间差异均具有统计学意义(P0.01),其中,TNM分期增加、Gleason评分增加、癌细胞转移、ρ(PSA)20 ng/m L的前列腺癌患者ZFP57阳性率明显降低.结论前列腺癌组织中ZFP57呈低表达,且与临床病理指标呈负相关;ZFP57可能作为抑癌基因参与前列腺癌的发生与发展.     

PAK6基因沉默对前列腺癌细胞放疗敏感性研究

为探讨p21活化激酶6基因沉默对雄激素依赖性前列腺癌细胞株LNCa P细胞放疗敏感性的影响。采用利用蛋白质免疫印迹技术检测筛选出的靶向PAK6的sh RNA对LNCa P细胞中PAK6蛋白表达抑制情况。并以靶向PAK6的sh RNA转染LNCa P细胞,分别给予0、1、3、5Gy单次剂量放射治疗,观察放疗对PAK6基因沉默的前列腺癌细胞的抑制作用。用CCK-8法检测前列腺癌细胞的增殖活性;流式细胞仪测定其凋亡变化。结果显示,放疗能抑制前列腺癌细胞的增殖,增加其凋亡率;接受等剂量照射的PAK6基因沉默组前列腺癌细胞增殖减缓更明显,凋亡的肿瘤细胞显著增多。由此可知,PAK6基因沉默的前列腺癌细胞对放射治疗更敏感。     

MRI弥散张量成像对前列腺疾病的诊断价值

目的:初步探讨弥散张量成像(diffusion tensor imaging,DTI)对前列腺癌(prostate carcinoma,Pea)和良性前列腺增生(benign pmstate hyperplasia,BPH)的诊断及鉴别诊断价值.方法:分别对22例PCa和31例BPH患者及20名健康志愿者进行前列腺DT...     

实时定量PCR技术检测前列腺癌微小转移的研究

通过利用TaqMan定量PCR检测前列腺增生和前列腺癌患者外周血中前列腺特异抗原(PSA)和前列腺特异膜抗原(PSMA)的表达量,建立了一种通过检测患者外周血单个核细胞中前列腺特异基因表达水平检测前列腺癌微小转移的方法.实验结果表明,PSA在转移癌、局限癌和增生患者组中与GAPDH的相对表达量分别为(2.63×10-3±3.4×10-4),(2.6×10-4±3.9×10-5)和(2.6×10-5±4.5×10-6),各组间有显著性差异(p＜0.001);PSMA在各组间的相对表达量分别为(6.4×10-3±9.3×10-3),(5.0×10-4±8.3×10-5),(2.4×10-5±7.2×10-6),各组间亦存在着显著性差异(p＜0.001).因此用定量PCR技术检测外周血中PSA和PSMA的表达水平,可区分前列腺转移癌、局限癌和增生患者,该方法可用于前列腺癌的早期诊断.     

MAOA 在诱导前列腺癌神经内分泌分化中的作用

摘要:目的 建立神经内分泌性前列腺癌( neuroendocrine prostate cancer,NEPC) 细胞模型和动物模型,探讨单胺氧化酶 A( monoamine oxidase A,MAOA)在前列腺癌神经内分泌分化( neuroendocrine transdifferentiation,NED) 中的作用及机制。 方法 选取人前列腺癌细胞系 C4-2,通过恩杂鲁胺( enzalutamide,ENZ)长期诱导获得 NEPC 细胞模型;通过酶活性实验、Real-time PCR 和 Western blot 技术检测 NED 过程中 MAOA 的水平变化;使用 MAOA 抑制剂氯吉灵( clorgyline,CLG)检测 MAOA 对神经内分泌标志物的影响并探讨其潜在机制;建立前列腺癌异种移植模型,体内实验验证 MAOA 与 NED 之间的相关性。 结果 ENZ 可作为诱导 NEPC 模型的方法;在 ENZ 引起的 NED 过程中,MAOA 的表达和活性增加;抑制 MAOA 的活性可以延缓 NED 的发生,这可能是 MAOA 通过抑制缺氧信号实现的。结论 MAOA 是促进 NED 和维持神经内分泌细胞特性的关键靶点,MAOA 抑制剂 CLG 可以延缓 NEPC 发生,可能作为前列腺癌患者的潜在治疗药物。     

前列腺穿刺活检术的研究进展

前列腺癌(Prostate Cancer, PCa)是一种对中老年男性危害巨大的恶性疾病。近年来,前列腺癌在我国的发病率及死亡率显著升高。以往,系统性6针穿刺活检法是临床上应用最多的前列腺癌诊断方法,但此方法并不能明显提高前列腺癌的检出率。随着影像学技术如单光子计算机断层扫描(ECT)、多排螺旋CT (MDCT)、经直肠超声(TRUS)和多参数磁共振成像(mpMRI)等技术的发展,以及多种融合技术在实际操作中的应用,前列腺穿刺变得精准化、可视化,病理诊断阳性率有所提高,同时穿刺针数减少,并发症的发生降低。本文就近年来前列腺穿刺活检术的新进展进行综述。     

Prostate cancer targeted MRI nanoprobe based on superparamagnetic iron oxide and copolymer of poly（ethylene glycol） and polyethyleneimin

Methoxyl poly （ethylene glycol） （mPEG-OH） was successfully grafted onto branched polyethyleneimine （hy-PEI） to yield a water soluble graft copolymer mPEG-g-PEI. This copolymer may package superparamagnetic iron oxide （SPIO） by ligand exchange. The SPIO weight percentage in the polymer coated nanoparticles was determined to be 55%, the size and zeta potential of nanoparticles was 50 nm and 12 mV respectively. Antibody fixation onto the complex （mPEI-g-PEG-SPIO） surface layer was achieved by activated single chain monoclonal antibody against prostate stem cell antigen （PSCA）. Our study showed that the single chain antibody functionalized nanoprobe （scAbpscA-PEI-g-PEG-SPIO） with a small size can specifically enter the prostate cancer cells, decreasing MRI T2-weighted signal intensity of prostate cancer cells to 44.76%, Our results revealed that the potential of this magnetic nanoparticulate system promised as a novel MRI nanoprobe for early diagnosis of prostate cancer （PCa）.     

Bioinformatics Analysis of the Relationship between Lifestyle and Prostate Cancer

In this study, we assessed the relationship between lifestyle and prostate cancer. We selected the Gene Expression Omnibus(GEO) dataset GSE10306 to analyze the expression levels of ataxin10(ATXN10), interferon related developmental regulator 1(IFRD1), formin-binding protein 1 like(FNBP1 L) and THO complex 2(THOC2) in prostate biopsies pre and post intensive nutrition and lifestyle intervention. Following a three-month intervention of nutrition and lifestyle, these genes showed a significant down-regulation. ONCOMINE database analysis showed that the four genes exhibited high expression in prostate cancer tissues compared with normal prostate tissues, which indicated that comprehensive lifestyle changes may modify the progression of prostate cancer mediated by altering the expression of ATXN10, FNBP1 L, THOC2 and IFRD1. Among the four genes, the high expression of IFRD1 was found to indicate a worse overall survival(OS) and disease-free survival(DFS). FNBP1 L and THOC2 were associated with CD8+ T cell infiltration of prostate cancer. We also speculated a possible regulatory network for lifestyle to influence miRNA, subsequently influencing the expression of relevant genes. Our findings suggested that these genes may be used as potential target sites for the treatment of prostate cancer.     

Human CMTM2/CKLFSF2 enhances the ligand-induced transactivation of the androgen receptor

CKLF (chemokine-like factor)-like MARVEL (MAL and related proteins for vesicle trafficking and membrane link domain) transmembrane domain containing (CMTM) is a novel gene family. One member of this family, CMTM2, also named chemokine-like factor superfamily 2 (CKLFSF2), is expressed highly in the testis and moderately in the prostate, marrow and peripheral blood cells. However, the function of human CMTM2 remains unknown. Here, we found that CMTM2 was upregulated in 5α-dihydrotestosterone (DHT)-treated LNCaP cells. We investigated the relationship between CMTM2 and the androgen receptor. Our results showed that CMTM2 enhanced DHT-mediated androgen receptor (AR) transactivation and the expression of prostate specific antigen (PSA). We also observed that CMTM2 enhanced the AR protein level, which was reversed by silencing endogenous CMTM2 expression, which suggested that CMTM2 might play an important role in maintaining the AR protein level. We also found that CMTM2 suppressed Akt activation. A previous study showed that Akt could phosphorylate AR at Ser210 and Ser790 and lead to AR ubiquitylation and degradation as well as suppression of AR activity. Taken together, suppressing Akt activation and increasing the AR protein level might be one of the mechanisms for the CMTM2-mediated enhancement of AR transactivation. Supported by National High Technology Research and Development Program of China (Grant Nos. 2006AA02A305 and 2002BA711A01) and National Natural Science Foundation of China (Grant Nos. 30271203 and 30671907)     

基于生物信息学构建前列腺癌单细胞层面lncRNA-miRNA-mRNA调控网络

利用生物信息学筛选差异表达基因（Differentially Expressed Genes,DEGs）,构建前列腺癌（Prostate Cancer,PCa）单细胞层面lncRNA-miRNA-mRNA调控网络,在分子水平上研究前列腺癌的发生发展过程及预后指标。首先从基因表达综合数据库（GEO）和癌症基因组图谱（TCGA）数据库分别下载单细胞RNA测序数据GSE157703和转录组测序数据TCGA-PRAD,通过R语言筛选差异表达信使RNA （DEmRNA）和差异表达长非编码RNA （DElncRNA）,利用相关软件预测并构建lncRNA-miRNA-mRNA调控网络;然后使用R语言进行基因本体论（Gene Ontology,GO）和京都基因与基因百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG）分析,运用STRING数据库、Cytoscape软件建立蛋白相互作用网络,同时对单细胞RNA测序数据进行质控、降维、聚类和分群,构建单细胞层面的lncRNA-miRNA-mRNA调控网络;最后进行生存分析,通过人类蛋白质图谱进行验证。结果显示,共得到3 013个DEmRNA和1 101个DElncRNA,筛选出51个lncRNA、27个miRNA和97个mRNA构建lncRNA-miRNA-mRNA调控网络。GO分析揭示靶基因在腺状细胞迁移、化学突触传递的调节等生物学过程富集,KEGG分析揭示miRNA在癌症、轴突导向和胞间的黏附等信号通路富集。通过PPI得到Top 10基因,据此整合单细胞水平上PCa单细胞转录组测序数据,得到包括肿瘤细胞在内的9个细胞群的多条精确的lncRNA-miRNA-mRNA调控轴。生存分析结果显示,ITGA2、PDLIM5H和PRRG4低表达组的无病生存期显著高于高表达组（P<0.05）,免疫组织化学验证了上述基因在肿瘤组织中均有不同程度的表达。本研究成功构建了PCa单细胞水平的lncRNA-miRNA-mRNA调控网络,并发现其不仅参与PCa的发生和发展,同时在临床预后预测方面也有重要意义。     

Delineation of prognostic biomarkers in prostate cancer

Prostate cancer is the most frequently diagnosed cancer in American men. Screening for prostate-specific antigen (PSA) has led to earlier detection of prostate cancer, but elevated serum PSA levels may be present in non-malignant conditions such as benign prostatic hyperlasia (BPH). Characterization of gene-expression profiles that molecularly distinguish prostatic neoplasms may identify genes involved in prostate carcinogenesis, elucidate clinical biomarkers, and lead to an improved classification of prostate cancer. Using microarrays of complementary DNA, we examined gene-expression profiles of more than 50 normal and neoplastic prostate specimens and three common prostate-cancer cell lines. Signature expression profiles of normal adjacent prostate (NAP), BPH, localized prostate cancer, and metastatic, hormone-refractory prostate cancer were determined. Here we establish many associations between genes and prostate cancer. We assessed two of these genes-hepsin, a transmembrane serine protease, and pim-1, a serine/threonine kinase-at the protein level using tissue microarrays consisting of over 700 clinically stratified prostate-cancer specimens. Expression of hepsin and pim-1 proteins was significantly correlated with measures of clinical outcome. Thus, the integration of cDNA microarray, high-density tissue microarray, and linked clinical and pathology data is a powerful approach to molecular profiling of human cancer.