地西他滨对卵巢癌SKOV3的细胞 凋亡和增殖的影响

目的:探讨地西他滨(DAC)对人卵巢癌细胞株SKOV3的细胞凋亡和增殖等细胞生物学方面的影响.方法:采用不同浓度的地西他滨(10、100、 200 nmol/L)处理人卵巢癌细胞株SKOV3后,通过流式细胞仪检测地西他滨对人卵巢癌细胞株SKOV3的细胞凋亡的影响,细胞活性检测试剂盒(CCK-8)检测地西他滨、顺铂(Cisplatin)以及地西他滨联合顺铂对人卵巢癌细胞株SKOV3的增殖的影响.结果:浓度为100 nmol/L的地西他滨对人卵巢癌细胞株SKOV3的增殖抑制最明显,细胞增殖抑制率达61.31%,有统计学差异(P0.05).地西他滨浓度超过100 nmol/L后对SKOV3的抑制率没有明显升高.低浓度地西他滨联合顺铂相比于单用地西他滨或者顺铂,SKOV3的细胞增殖抑制率升高,有统计学差异(P0.05).浓度为100 nmol/L的地西他滨处理人卵巢癌细胞株SKOV3后细胞凋亡率升高,有统计学差异(P0.05).结论:低浓度地西他滨促进人卵巢癌细胞株SKOV3的凋亡,抑制SKOV3的增殖,地西他滨可能通过增强铂类化疗药物的敏感性抑制肿瘤的发生发展.     

红景天苷抑制卵巢癌细胞SKOV3增殖的基因水平研究

目的:探究红景天苷对卵巢癌细胞SKOV3增殖的作用及作用机制.方法:在培养基中添加不同浓度(4、8、16、30和40 μmol/mL)红景天苷,分别标示为SAL-1、SAL-2、SAL-3、SAL-4和SAL-5组,采用CCK-8检测细胞活性,流式细胞术检测SKOV3细胞的细胞周期和凋亡率,实时荧光定量PCR(RT-q...     

手术前后血管内皮生长因子、血小板活化因子水平与非小细胞肺癌的关系

目的：探讨非小细胞肺癌患者手术前、后血清血管内皮生长因子（VEGF）、外周血血小板活化标志物的动态变化规律及其与非小细胞肺癌（NSCLC）的关系。方法：用EUSA法检测120例非小细胞肺癌患者手术前、后血清VEGF水平和60例健康体检者VEGF水平；同时用流式细胞术（FCM）检测其外周血血小板活化标志物水平。结果：①NSCLC患者手术前、后VEGF水平和血小板活化标志物水平均显著高于正常对照组（P〈0．01）；②NSCLC患者手术后第7天血清VEGF水平显著高于术前和术后第1天水平（P〈0．01）；而血小板活化标志粉水平则相反；③NSCLC患者血清VEGF和外周血血小板活化标志物水平与有无淋巴结转移和TNM分期有密切关系（P〈0．05）。结论：NSCLC患者血清中VEGF和外周血血小板活化标志物水平都升高。且与NSCLC的分期有密切关系．它们可作为动态检测NSCLC患者病情进展、判断预后的拳考指标。     

淫羊藿素对不同p53分型顺铂耐药卵巢癌细胞株周期阻滞作用的研究

目的:研究淫羊藿素(ICT)对不同p53分型顺铂耐药卵巢癌细胞株的增殖抑制作用及机制,为复发耐药性卵巢癌治疗药物的研发提供新思路.方法:利用胸腺嘧啶核苷酸(TdR)双阻滞法建立周期同步化模型,采用流式细胞技术检测淫羊藿素对同步化后的不同p53分型顺铂耐药卵巢癌细胞株的细胞周期阻滞作用,Western blot检测浓度为20μmol/L淫羊藿素作用下细胞株周期蛋白CyclinE、CyclinB1、p53及CHK1蛋白表达情况.结果:淫羊藿素浓度为20μmol/L作用4 h时即产生周期阻滞作用,阻滞效果随作用时间延长而增强;其中,p53野生型C13~*细胞株G1期百分比升高(P0.05);p53变异型A2780cp细胞株G2期百分比升高(P0.05);p53缺失型的SKOV3细胞株G2期百分比升高(P0.05).淫羊藿素20μmol/L作用下,p53野生型C13~*细胞株CyclinE表达下调,而CyclinB1蛋白无明显变化;p53变异型A2780cp及p53缺失型SKOV3细胞株CyclinB1蛋白表达下调,而CyclinE无明显变化.p53野生型C13~*细胞株p53蛋白表达明显上调,p53变异型A2780cp细胞株p53蛋白无明显变化,p53缺失型SKOV3细胞株p53蛋白表达缺失;三株细胞CHK1蛋白表达均明显升高.结论:淫羊藿素对不同p53分型顺铂耐药卵巢癌细胞均具有时间依赖性的周期阻滞作用;其对不同p53分型顺铂耐药卵巢癌细胞的阻滞作用途径不同;其中对p53野生型C13~*细胞株通过p53途径下调CyclinE蛋白诱发细胞G1期阻滞;而对p53突变型A2780cp及p53缺失型SKOV3细胞株则通过CHK1途径下调CyclinB1诱发G2期阻滞.     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)联合低剂量顺铂诱导多药耐药人卵巢癌细胞凋亡的实验研究

为研究卵巢癌多药耐药机制和逆转耐药,探讨在低剂量顺铂存在下,人可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对多药耐药人卵巢癌细胞的杀伤增效作用及其可能存在的分子病理机制。用顺铂为诱导剂,逐步建立多药耐药人卵巢癌细胞株SKOV3/cDDP。(此细胞株经免疫组化检测P-gp高表达)。TRAIL、顺铂或两药联用12h,24h,48h,采用MTT法测试细胞毒作用,Hochest33258染色荧光显微镜下观察细胞形态学改变,透射电镜下观察亚细胞结构形态,通过流式细胞术检测细胞凋亡比例,Western blot分别检测在联用TRAIL作用前后cFLIP蛋白的表达情况。结果显示:1)单用100ng/mL TRAIL只能杀伤4.67%±0.26%的SKOV3/cDDP细胞,IC50>1000ng/mL。顺铂对SKOV3/cDDP细胞的作用存在剂量依赖性细胞毒效应,这种效应主要通过诱导细胞凋亡实现;2)亚毒性浓度TRAIL(100ng/mL)与亚毒性浓度DDP(1.0μg/mL)联用可杀死52.12%±2.84%的SKOV3/cDDP细胞。呈现出高效协同作用;3)流式细胞术分析、透射电镜观察及荧光显微镜证实其协同性杀伤作用主要通过促进诱导细胞凋亡实现;4)亚毒性浓度TRAIL(100ng/mL)与亚毒性浓度DDP(1.0μg/mL)联用,可使细胞cFLIP蛋白的表达下调,促进了细胞凋亡的发生。结论:TRAIL与亚毒性浓度顺铂联用表现出对多药耐药人卵巢癌细胞的高效杀伤作用,这种作用可能主要由促进细胞凋亡介导实现,cFLIP蛋白的表达减少可能参与这一过程。     

DHA对糖脂代谢异常HepG2细胞甘油三酯和胆固醇合成的影响

目的探讨不同剂量的二十二碳六烯酸(DHA)对棕榈酸(PA)培养后的HepG2细胞甘油三酯和胆固醇合成的影响。方法 HepG2细胞分为无血清培养基培养的对照组和含有0.25 mmol/L PA的无血清培养基培养的PA组以及用DHA替代20%、50%、100%PA的DHA替代组。对照组和PA组培养24 h后用无酚红低糖培养基鉴定细胞是否出现胰岛素抵抗,并测定细胞内甘油三酯(TG)、胆固醇(TCH)水平;模型成立后用DHA替代20%、50%、100%PA培养12 h,再次检测细胞葡萄糖摄取量、TG和TCH水平,Western blot检测脂肪酸、胆固醇合成关键基因SREBP-1c和SREBP-2的蛋白表达水平。结果 PA处理后HepG2细胞活性明显下降,葡萄糖摄取量显著低于NC组(P0.05),说明HepG2细胞出现胰岛素抵抗,且PA组TG、TCH水平均有不同程度的升高;用DHA替代PA后,细胞活性有所改善,葡萄糖摄取量较PA组有明显升高(P0.05),TG、TCH水平较PA组均有不同程度的降低,并且SREBP-1c和SREBP-2表达随DHA浓度升高呈下降趋势(P0.05)。结论 DHA可抑制SREBP-1c和SREBP-2的表达,从而抑制TG、TCH的合成,改善细胞脂代谢紊乱及胰岛素抵抗。     

单侧入路与双侧入路球囊扩张椎体后凸成形术治疗老年人新鲜椎体骨质疏松性压缩骨折疗效差异研究

研究单侧入路与双侧入路球囊扩张椎体后凸成形术治疗老年人新鲜椎体骨质疏松性压缩骨折疗效差异。选取2015年10月至2018年10月在本院接受治疗的胸腰部椎体压缩性骨折老年患者共300例,均为单一性椎体骨折,将其随机分成2组,单侧入路组(150例),双侧入路组(150例),观察患者X线暴露时间、手术时间、骨水泥填充量、术中出血量及透视次数状况;术前、术后72 h及术后6 m拍摄患者脊柱正位和侧位X线片,并在侧位X片上测量手术前后椎体前缘和中部高度的变化情况,ELISA法检测血清骨钙素(BGP)、Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PINP)及碱性磷酸酶(ALP)含量。单侧入路组患者X线暴露时间、手术时间、骨水泥填充量、术中出血量及透视次数均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);术后72 h及6 m两组患者伤椎体前缘及中部高度较术前显著升高,差异有统计学意义(P0.05),术前术后两组对比差异均无统计学意义(P0.05);单侧入路组患者术后3 d血清BGP、ALP较术前、双侧入路组显著升高,PINP含量较术前、双侧入路组显著降低,差异均有统计学意义(P0.05)。单、双侧入路椎体后凸成形手术对于治疗老年椎体骨质疏松性压缩骨折疗效近似,但单侧入路椎体后凸成形手术可以大大缩短手术时间、降低透视次数及骨水泥填充量,增大成骨细胞活性,使患者骨密度增大。     

PDGFRA调控p53信号通路介导卵巢癌细胞增殖、凋亡和侵袭的作用及机制

为了探究血小板源性生长因子受体α(platelet derived growth factor receptor α,PDGFRA)调控卵巢癌细胞的增殖、凋亡和侵袭的作用以及具体机制，首先基于GEO数据库中相关基因芯片（GSE4122和GSE14407）分析验证PDGFRA在卵巢癌中存在的表达差异，再应用SangerBox在线分析PDGFRA与卵巢癌患者预后的关联性.构建PDGFRA过表达质粒，用MTT检测PDGFRA对OVCAR3细胞增殖的影响，用流式细胞术检测PDGFRA对OVCAR3细胞凋亡的影响，用Transwell检测PDGFRA对OVCAR3细胞侵袭能力的影响，用Western blot法检测p-p53、p53及p21蛋白的表达水平.结果发现：PDGFRA在卵巢癌中显著上调，与PDGFRA低表达患者相比，PDGFRA高表达患者的预后更差；与vector-NC相比，PAGFRA组细胞的增殖和侵袭显著提高，细胞凋亡及p-p53、p21蛋白的表达水平均显著下降.由此得出，PDGFRA通过介导p53信号通路调控影响OVCAR3细胞的增殖、凋亡和侵袭.     

桂枝茯苓丸调控MTDH和PTEN逆转卵巢癌多药耐药的机制研究

研究桂枝茯苓丸在人卵巢癌耐药性裸鼠肿瘤模型中对凋亡的诱导作用,探讨其可能的作用机制。采用实时无标记细胞分析系统检测SKOV3/DDP对顺铂和紫杉醇的耐药性,建立SKOV3/DDP卵巢癌耐药性BALB/c裸鼠肿瘤模型,模型裸鼠随机分为桂枝茯苓丸浓缩液16 g.kg-1.d-1(高)、8 g.kg-1.d-1(中)、4 g.kg-1.d-1(低)剂量组、PI3K抑制剂LY294002组、低剂量桂枝茯苓丸LY294002组(联用组)及对照组,给药10天后剖取肿瘤组织,采用流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡率,采用荧光定量PCR检测肿瘤组织中MTDH、PTEN mRNA的相对表达。结果表明,SKOV3/DDP细胞对顺铂和紫杉醇的耐药倍数分别为4.57和4.36倍。随着桂枝茯苓丸浓缩液剂量的增加,肿瘤细胞的凋亡率逐渐增加,上调PTEN mRNA和下调MTDH mRNA的作用逐渐增强,各组之间差异具有显著性(P < 0.01)。LY294002和低剂量桂枝茯苓丸联用后,抑制凋亡的作用强于二者分别单用的凋亡抑制作用,下调MTDH mRNA和上调PTEN mRNA的作用强于其他各组(P < 0.01)。说明在SKOV3/DDP卵巢癌耐药性BALB/c裸鼠模型中,桂枝茯苓丸能够剂量依赖性地诱导耐药性肿瘤细胞的凋亡,其机制可能与上调PTEN mRNA和下调MTDH mRNA有关。     

肝癌患者血清可溶性白介素2受体检测及其临床意义

应用夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测了45例肝癌(HCC)患者及42例健康成人的血清可溶性白介素2受体(sTL-2R)水平,结果显示HCC患者sTL-2R水平较健康成人明显增高(p＜0．01),其升高幅度与肿瘤体积大小有关(p＜0．05),而与AFP及HBsAg阳性与否无关(P＞0．05),故HCC者测定血清sTL-2R不仅能了解肿瘤患者的机体免疫功能状态,且在一定程度上能对疾病的严重程度,疗效及判断预后作出评估。