导管分子程序化死亡过程中Ca2+的时空变化

利用焦锑酸钾沉淀法研究了辣椒叶片导管分子程序化死亡（PCD）过程中Ca^2 分布的变化。在导管分子形成初期，液泡和细胞核占据细胞的大部分体积，Ca^2 主要分布在细胞间隙和细胞壁上；当壁次生加厚开始后，液泡、细胞核与其他细胞器解体，细胞内Ca^2 明显增多；细胞质进一步解体，Ca^2 在未进行次生加厚的细胞壁上明显增多，而次生加厚带上非常少；随着细胞质更进一步的消失，Ca^2 主要分布于未次生加厚的细胞壁侧，次生加厚带上仍然非常少；在细胞内物质彻底消失后，Ca^2 在次生加厚带部位上分布增加，而在未次生加厚的壁上减少。观察结果表明，在导管分子PCD的初期、细胞壁次生加厚期和成熟期，Ca^2 的分布发生时空变化，可能表明它对细胞壁次生加厚具有调节和提高Ca^2 运输效率的作用。     

环境雌激素研究进展

环境雌激素通过雌激素受体以及其他的细胞核受体或通过细胞中的信号传递系统，如离子通道，Ｃａ＾２＋以及Ｃａ＾２＋调节蛋白等，影响细胞的分裂增殖并表现出各种生物效应，评述了目前主要的环境雌激素如ＤＤＴ，多氯联苯（ＰＣＢｓ），二恶英以及植物来源的环境雌激素的作用机制。     

蚕豆保卫细胞慢液泡离子通道的开放特性

设计一种合适溶液组合,使液泡膜内、外的阴、阳离子分离在２个不同的液泡平衡电位（Ｅ）,即：ＥＫ＾＋＝ＥＣａ＾２＋＝ＥＭｇ＾２＋＝－３０ｍＶ,ＥＣｌ＾－＝３０ｍＶ。通过测定慢液泡通道（ＳＶ）的尾电流,得到ＳＶ的逆转电位（Ｅｒｅｖ）是Ｅ＝３０ｍＶ,说明ＳＶ是阳离子通道,不是阴离子（Ｃｌ＾－）通道,通过减少液泡内的Ｃａ＾２＋和增加胞质一侧Ｃａ＾２＋浓度,可以使ＳＶ在液泡膜正常的生理电位（４０ｍＶ）下开放,     

绒毡层乌氏体在Ca2+运输中的作用

利用焦锑酸钾沉淀法研究了小麦花药发育过程中Ｃａ＾２＋的分布，四分体末期，在绒毡层内表面、药室和花粉的表面均分布的携带Ｃａ＾２＋的乌氏体，并且乌氏体和花粉的表面相接触，分表面开始有Ｃａ＾２＋的积累，单核花粉期，其药室内分布有大量携带Ｃａ＾２＋的乌氏体，花粉表面的Ｃａ＾２＋境我，成熟花粉时期，萌发和花粉管的生长，Ｔｉｒｌａｐｕｒ等人的应用荧光标记方法研究了花粉发育过程中花药Ｃａ＾２＋的分布，认为Ｃａ＾     

CNTF信号转导途径上游的新支路

用活细胞内荧光探针Ｆｕｒａ２／ＡＭ检测ＣＮＴＦ对谷氨酸引起的海马神经细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度升高的快速影响，并观察Ｇ蛋白是否参与。结果表明，谷氨酸可引起海马神经细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度快速升高，并在５００μｍｏｌ／Ｌ范围内呈剂量相关性。ＣＮＴＦ对静息条件下海马神经细胞内的游离Ｃａ＾２＋浓度无显著性改变。但ＣＮＴＦ孵育５ｍｉｎ后，可快速压抑谷氨酸引起的胞内游离Ｃａ＾２＋浓度升高，这一过程有ＰＴＸ敏感     

一种新的红细胞源性降压因子的作用机制

研究了一种来自红细胞的新的内源性降压因子（ＥＤＤＦ）的降压机制，重点探讨其对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）胞浆游离钙离子及核内钙离子转运的影响，以ｆｌｕｏ－３／ＡＭ作为Ｃａ＾２＋荧光探针，采用激光扫描共聚焦显微镜观察人脐静脉ＶＳＭＣ（ＨＵＶ），钙超载模型大鼠肠系膜ＶＳＭＣ（ＣａＯＭＶ）和正常对照Ｗｉｓｔａｒ大鼠肠系膜培养的ＶＳＭＣ（ＷＭＶ）「Ｃａ＆２＋」ｉ及（「Ｃａ＾２＿」ｎ）的变化；用流式细胞仪测定     

金属离子对重组钙调神经磷酸酶A亚基的作用

进行了金属离子对重组钙调神经磷酸酶Ａ亚基催化活性和溶液构象作用的研究和分析。Ｍｎ＾２＋，Ｎｉ＾２＋，Ｍｇ＾２＋／Ｃａ＾２＋对钙调神经磷酸酶Ａ亚基的激活能力不同，大小排序为Ｎｉ＾２＋〉Ｍｎ＾２＋〉Ｍｇ＾２＋／Ｃａ＾２＋。相应的ＣＤ谱和内源荧光光谱测定表明，金属离子诱导了此酶Ａ亚基构象状态的改变。并以钙调神经磷酸酶Ａ亚基激活作用最强的Ｎｉ＾２＋为例，进行其不同浓度对酶活性和构象影响的对应研究。结果提示     

Ba2ErCl7晶体的生长、结构和激光上转换机制

报道了新型上转换材料Ｂａ２ＥｒＣｌ７的单晶生长方法。用“一步合成法”直接将Ｅｒ２Ｏ３，ＢａＣｌ２．２Ｈ２Ｏ和ＮＨ４Ｃｌ合成Ｂａ２ＥｒＣｌ７多晶料，并分别用提拉法和坩埚下降法得到４ｍｍ＊８ｍｍ＊１５ｍｍ的优质大块单晶；用８０３ｎｍ的ＬＤ泵浦时有强烈的黄绿光发射；     

植物肌动蛋白荧光类似物体外与体内的聚合

利用碘乙酰胺俄勒冈绿对植物花粉肌动蛋白进行荧光标记，从１０ｍｇ肌动蛋白可得到３ｍｇ肌动蛋白荧光类似物，标记率为７２％，纯度为９９％．体外实验结果表明，肌动蛋白荧光类似物在Ｍｇ~２＋和Ｋ~＋存在条件下可聚合成丝状肌动蛋白；将肌动蛋白荧光类似物通过细胞显微注射方法引入活体植物细胞内，可观察到有绿色荧光微丝分布在细胞质中，说明所得脱动蛋白荧光类似物具有与细胞内源肌动蛋白相似的功能．     

钙调神经磷酸酶催化结构域的活性和性质

钙调神经磷酸酶（Ｃａｌｃｉｎｅｕｒｉｎ，ＣＮ）是唯一的Ｃａ＾２＋／钙调素（Ｃａｍｏｄｕｌｉｎ，ＣａＭ）信赖的蛋白磷酸酶，由催化亚基Ａ（ＣＮＡ，６１ｋｕ）和调节亚基Ｂ（ＣＮＢ，１９ｋｕ）１：１组成。用ＰＣＲ方法构建了仅含ＣＮＡ催化结构域的编码区ｃＤＮＡ序列。经在Ｅ．ｃｏｌｉ中诱导表达，纯化，制备了ＣＮＡ催化结构域多肽。以ＰＮＰＰ为底物，研究了其磷酸酶活力。结果表明，在有ＣａＭ和ＣＮＢ时，其活性为ＣＮ     

小鼠胸腺髓质CD4-CD8+单阳性细胞表型分析

对胸腺髓质型ＣＤ４＾－ＣＤ８＾＋细胞进行表型分析，发现这群经有型不均一、外周成熟的ＣＤ８＾＋Ｔ有型为ＴＣＲαβＣＤ３＾＋Ｑａ－２＾＋ＨＳＡ＾－３Ｇ１１＾－６Ｃ１０＾－，而胸腺髓质型ＣＤ４＾－ＣＤ８＾＋细胞Ｑａ－２＾＋细胞占２０％，ＨＳＡ＾＝者占３３％，３Ｇ１１＾－者占３０％，６Ｃ１０＾－者占７０％，这４种表面标志表达的不同提示髓质区ＣＤ８单阳性细胞仍需经历一个表型成熟的过程，根据这４种表面标志在细     

光合放氧中心结构和放氧机理的新模型

目前在放氧中心的结构和放氧机理方面均存在许多重要问题待解决。结合最新研究成果，提出了放氧中心结构和放氧机理新模型，在新结构模型中，２个Ｈ２Ｏ分子不对称地结合于“Ｃ”形结构开口端２个低价的Ｍｎ＾Ⅱ１和Ｍｎ＾Ⅲ４上，并保持较大距离；２个组氨酸的咪唑环通过Ｎ原子与２个高价的Ｍｎ＾Ⅳ２，Ｍｎ＾Ⅳ３结合；Ｃｌ结合于Ｍｎ＾Ⅲ４，并与Ｃａ相连；Ｃａ通过Ｏ桥和ＣＯＯ－相连使２个Ｍｎ２０２单元保持特定空间构型。整个     

PI3K/Akt信号传递途径与CD3ε介导T淋巴细胞激活和凋亡的调控

利用Ｖｅｓｔｅｒｎ印迹免疫沉淀及激酶活性测定方法，研究表达ＣＤ８ａ胞外区－跑膜区和ＣＤ３ε胞浆区的融合分子（ＣＤ８ε）的Ｊｕｒｋａｔ Ｔ淋巴细胞激活与凋亡过程中磷酸肌醇３－激酶（Ｐ１３Ｋ）和蛋白激酶Ｂ（ＰＫＢ或Ａｋｔ）表达及酶活性的变化．结果表明，在抗ＣＤ８单抗诱导的ＣＤ８ε＾＋Ｊｕｒｋａｔ Ｔ淋巴细胞（ＴＪＫ）激活与凋亡过程中，Ｐ１３Ｋ及Ａｋｔ的表达均明显增加，Ａｋｔ的激酶活性也增加．而将ＣＤ８     

人神经元电压门控钙通道γ-3基因的克隆

将小鼠Ｃａｃｎｇ２基因的编码区与ＥＳＴ数据库进行同源性分析，得到一个与小鼠Ｃａｃｎｇ２基因在 ４３５ ｂｐ中有 ７５％同源的 ＥＳＴ（ＧｅｎＢａｎｋ： Ｗ２９０９５）．在该 ＥＳＴ中设计引物与 ｃＤＮＡ文库载体臂上引物行巢式 ＰＣＲ和 ＲＡＣＥ反应，在人脑前叶皮质 ｃＤＮＡ文库和人脑 Ｒｅａｄｙ ｃＤＮＡ中获得 ｃＤＮＡ序列 １５４５ ｂｐ，其中包含一个 ９４８ ｂｐ的可读框，编码 ３１５个氨基酸．该可读框经确证命名为 ＣＡＣＮＧ３．ＣＡＣＮＧ３基因与大规模测序中定位于１６ｐ１２－ｐ１３．１的ＢＡＣ克隆ＡＣ００４１２５完全一致，从而将该基因定位于１６ｐ１２－ｐ１３．１，并由此获得它的基因组结构，编码区由４个外显子组成．经ＲＴ－ＰＣＲ分析，ＣＡＣＮＧ３在成人脑和胎脑有表达．运用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ在视网膜色素变性家系、视网膜色素变性伴耳聋和癫痫家系进行突变检测，未检测到突变．     

2, 5-二巯基-1, 3, 4-噻二唑在铜表面的吸附与键合行为

通过表面增强Ｒａｍａｎ光谱（ＳＥＲＳ），红外光谱（ＩＲ）及Ｘ射线光电子能谱（ＸＰＳ）技术，研究２，５－二巯基－１，３，４－噻二唑（ＤＭＴＤ）在铜表面的作用机制，得到了吸附在铜表面的ＳＥＲＳ光谱，研究表明，ＤＭＴＤ分子是通过其环外的两个硫醇基与金属铜发生键合反应，生成了ＤＭＴＤ的单硫盐，同时，ＤＭＴＤ分子通过其环外的两个硫原子与Ｃｕ＾＋相配位，并通过Ｃｕ＾＋连接成一层牢固的一维链状聚合物膜吸附于铜表     

CD2胞内区结合蛋白的分子克隆与鉴定

为了探讨 ＣＤ２分子的信号传递功能，以编码ＣＤ２胞内区（Ｔｈｒ２１１－Ｇ１ｎ３３６）肽段的ｃＤＮＡ为“钓饵”，采用酵母双杂交系统从激活的人Ｔ淋巴细胞ｃＤＮＡ文库中筛选与之相互作用蛋白的ｃＤＮＡ序列．并采用免疫共沉淀法鉴定该蛋白在体内与ＣＤ２胞内区结合的特异性．克隆并鉴定了一个与ＣＤ２胞内区特异性结合的胞内蛋白分子，与ｖ－ｆｏｓ转化效应蛋白（Ｆｔｅ－１）同源 Ｆｔｅ－１参与细胞转化、生长、蛋白合成及向线粒体转运蛋白质．蛋白数据库检索表明，Ｆｔｅ－１具有蛋白激酶ＰＫＣ的结合与作用位点，提示Ｆｔｅ－１参与ＣＤ２分子介导的信号传递     

β-环糊精与对苯二酚包合物的合成与晶体结构

合成了环糊精与对苯二酚包合物［（Ｃ_（４２）Ｈ_（７０）Ｏ_（３５）·（Ｃ_６Ｏ_２Ｈ_（６））_３·（Ｈ_２Ｏ）_（２１．２）·（ＣＨ_３ＯＨ）_２］，并用Ｘ射线单晶衍射法测定了晶体结构．该晶体属三斜晶系，空间群为 Ｐ１，晶胞参数：ａ＝ １．５５０ ０（１） ｕｍ，ｂ＝ １．５５３ ６（１） ｕｍ， ｃ＝ １．８２４ ６（１） ｕｍ， ａ＝ １１３．１７（２）°，γ＝ ９９．１２（２）°， γ＝ １０３．３７（３）°， Ｖ＝ ３．７７３ ９（４）ｕｍ～３， Ｚ＝ １； Ｄｃ＝ １．３４３ ｇ／ｃｍ~３， μ＝ ０．１２４ ｍｍ~（－１）， Ｆ（０００）＝ １５９４， Ｒ＝ ０．０７９ ５， Ｓ＝ ０．９６３ ９．晶体结构测定表明，客体分子在主体分子空腔内的位置以及主－客体包合物稳定存在的一个重要因素是客体分子的极性基团的溶剂化程度．     

小麦黄花叶病毒72ku蛋白在大肠杆菌中的表达及其抗血清制备

采用逆转录－ＰＣＲ方法，扩增获得小麦黄花叶病毒（ＷＹＭＶ）ＲＮＡ２上的７２ｋｕ蛋白基因，将其克隆到ｐＥＴ３０ａ（＋）上，构建了该基因的原核表达载体ｐＥＴＰ７２。ＳＤＳ－ＲＡＧＥ分析结果显示，经ＩＰＴＧ诱导，７２ｋｕ蛋白基因在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）ｐＬｙｓＳ中得到高效表达。以含表达产物的凝胶作为抗原，免疫家兔，首次制备了小麦黄花叶病毒ＲＮＡ２７２ｋｕ蛋白特异性抗血清。     

控制麻疹病毒血凝集性的重要功能位点

ＩＭＡ．ＳＭＤ是经Ｂ９５ａ细胞系培养纯化的２株麻疹病毒，其血凝集性呈阴性。将其在Ｖｅｒｏ细胞系中培养数代后其血凝集性转变为阳性。对在２种细胞中培养获得的病毒进行序列分析发现：以上２株病毒Ｈ蛋白的第５４６位均由Ｓｅｒ（ＨＡＤ阴性）突变为Ｇｌｙ（ＨＡＤ阴性）。利用位点专一性诱变并在ＣＯＳ细胞中对２种Ｈ蛋白进行表达证实：该突变导致血凝集性的改变；进一步利用抗ＣＤ４６的单克隆抗体证实：该突变同时导致Ｈ蛋白     

胞内、胞外钙对花生四烯酸刺激的人嗜中性白细胞呼吸爆发的调控

呼吸爆发是人嗜中性白细胞行使杀菌功能的重要生理反应。用化学发光方法测量外源花生四烯酸刺激的嗜中性白细胞在体外的呼吸爆发，用荧光探针标记法测量嗜中性白细胞内的自由钙离子浓度，发现用细胞内质网膜上Ｃａ＾２＋－ＡＴＰ酶的抑制剂ｔｈａｐｓｉｇａｒｇｉｎ升高细胞内自由钙离子浓度后，花生四烯酸的嗜中性白细胞的呼吸爆发增强，而用ＥＧＴＡ或ＢＡＰＴＡ螯合胞外或胞内钙离子则会抑制花生四烯酸刺激的呼吸爆发。这些实验结