粉螨同工酶技术制样条件探索

以腐食酪螨和椭圆食粉螨为材料，采用垂直板型聚丙烯酰胺凝胶电泳法，通过对EST、MDH进行比较研究，探讨了粉螨同工酶技术制样的条件。结果表明：使用pH7．4的0．01M的磷酸缓冲液制备样品实验效果最佳；取样时通常以样品与匀浆液体积比1：10浓度配比，低于此浓度则容易造成酶带缺失；饥饿对实验效果影响不明显，通常无须饥饿处理。     

腐食酪螨和粉尘螨的共同抗原

目的：探讨腐食酪螨和粉尘螨之间是否存在共同抗原.方法：对粉螨过敏患者进行腐食酪螨和粉尘螨特异性IgE相关性分析，用SDS-PAGE分析腐食酪螨和粉尘螨变应原，并对螨特异性IgE阳性血清进行免疫印迹试验及抑制试验.结果：42例粉螨过敏患者血清粉尘螨和腐食酪螨特异性IgE光密度值相关性较高（r=0.641 5，P＜0.01）.SDS-PAGE分析知腐食酪螨和粉尘螨变应原分子量均为10 kD～110 kD.免疫印迹抑制试验表明，腐食酪螨变应原可与粉尘螨变应原发生交叉反应.结论：腐食酪螨和粉尘螨间存在共同抗原.     

用模糊聚类对储粮储食中孳生粉螨的分类研究

采用模糊聚类方法对仓储粮食中孳生粉螨进行分类研究;分层取样20种粮食后,分离出23种螨,并分别按带权重αi和不带权重αi两种模糊矩阵分类;结果表明采用带权重αi分类比较符合实际生境分布;以F3粉尘螨、F15小粗脚粉螨一类和F4弗氏无爪螨、F8伯氏嗜木螨一类为优势种,集中分布在特定粮食类生境中,同时伴随多种其他螨种(腐食酪螨,粗脚粉螨,家食甜螨类等),分布广泛;从而得出在仓储粮生境中既存在优势种分布,也存在多样性分布结论。     

黑斑蛙(Rana nigromaculata)不同组织器官和不同发育时期同工酶的比较研究

采用聚丙烯酰胺凝胶平板电泳 (PAGE) ,对黑斑蛙的五种不同组织器官和五种不同发育时期的个体进行了酯酶 (α—EST)和过氧化物酶 (PO)同工酶的差异比较研究 .结果显示 ,不同组织器官中两种同工酶均存在明显的区别 ;不同发育期的α—EST同工酶也存在质的差异 .从蝌蚪到幼蛙的发育中 ,α—EST同工酶谱逐渐增加 ,但从幼蛙发育到成体蛙 ,α—EST同工酶谱却出现了减少现象 .不同发育时期的个体Rf为 0 .2 3的α—EST酶谱皆得以表达 .     

粉螨污染空气的研究

为探讨粉螨污染空气的情况 ,采用空气粉尘采样器和自制空气悬浮螨采样器 ,进行工作场所内悬浮螨的分离 ,并将获得的粉螨制片、鉴定。结果在中药厂、面粉厂、纺织厂、粮库的工作场所内和本校教学楼的工作环境内发现粉螨 8种 ,即粗脚粉螨 ( A.siro) ,小粗脚粉螨 ( A.farris) ,腐食酪螨 ( T.putrescentiae) ,椭圆食粉螨 ( A.ovatus) ,纳氏皱皮螨 ( S.nesbitti) ,害嗜鳞螨 ( L .destructor) ,粉尘螨 ( D.farinae)和屋尘螨 ( D.pteronyssinus) ,隶属于 3科 6属。由此可见 ,空气中粉螨的污染严重 ,应引起注意     

苜蓿盲蝽属6种昆虫不同地理种群同工酶比较研究

应用聚丙烯酰胺凝胶垂直板型电泳技术,对内蒙古苜蓿盲蝽属(AdelphocorisReuter)的6种苜蓿盲蝽不同种群的酯酶同工酶(EST)、过氧化物同工酶(POD)、乳酸脱氢酶同工酶(LDH)进行比较研究.结果表明,6种苜蓿盲蝽属昆虫不同种群的酯酶同工酶(EST)谱带清晰、稳定,且不同种群间有差异;6种苜蓿盲蝽中,只有苜蓿盲蝽A.lineolatus的POD同工酶染出的酶带最多,且在雌雄两性间的活性差异较大,但染出的酶带数少于EST同工酶,活性也弱于EST同工酶,其余种类染出的酶带较少.POD同工酶特征的支序分析结果表明,苜蓿盲蝽A.lineolatus的4个种群分为2大支系,不同的地理分布和生态环境是导致同工酶酶谱趋异的主要原因.     

山东省储粮螨类的分布与聚类分析

通过对所采到的２３０８０头粮螨进行聚类分析,结果表明,山东省储粮螨类的最优势种为腐食酪螨,符合中国的最优势种为腐食酪螨这一规律,应用聚类分析的方法分析,螨类的发生在一定程度上气候区相中吻合。     

铁胁迫对大豆POD和EST同工酶的影响

采用垂直聚丙烯酰胺凝胶电泳,研究了2个品种的大豆--浙春3号和1601在不同时期、不同浓度铁胁迫下过氧化物酶(POD)同工酶和酯酶(EST)同工酶的变化情况.结果表明,浙春3号的2种同工酶酶谱的变化基本一致,随铁浓度的增加酶带数和强度都有所增加;而1601的2种同工酶,在高浓度铁处理时,酶带数和强度都减少.2个大豆品种不同时期的POD和EST同工酶酶谱对铁胁迫的反应也有差异.不同品种大豆的同工酶酶谱的变化,与其对铁胁迫的抗性有关.     

椭圆食粉螨ISSR-PCR反应体系正交优化试验设计

以椭圆食粉螨基因组DNA为模板,采用正交试验设计方法,建立椭圆食粉螨的ISSR最佳反应体系.优化得到的反应体系为:Mg2 浓度1.0 mmol/L、Taq DNA聚合酶1.0 U、dNTPs浓度0.2 μmol/L、引物浓度0.3 μmol/L、模版DNA量40 ng.反应程序为:94 ℃预变性5 min;94 ℃变性1 min,48℃、50℃、52 ℃(不同引物退火温度各异)复性1 min,72 ℃延伸1.5 min,35个循环;72 ℃延伸5 min;4 ℃保存.通过梯度退火试验,确定不同引物的最适退火温度.     

不同寄主尖孢镰刀菌同工酶异质性的研究

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳测定了来自不同寄主枯萎病原菌尖孢镰刀菌过氧化物酶同工酶(POD)和酯酶同工酶(EST).结果表明,过氧化物酶同工酶共有3条主酶带,其迁移率分别为:Rf=0.08,Rf=0.20和Rf=0.4.但不同寄主的尖孢镰刀菌POD同工酶存在着明显的差别,来源于花生的尖孢镰刀菌只有2条POD同工酶酶带,其迁移率为:Rf=0.20和Rf=0.08;来源于甜瓜的尖孢镰刀菌只有1条POD同工酶酶带,其迁移率为:Rf=0.20;来源于不同寄主的镰刀菌的EST同工酶谱之间也存在着较大的差别.来源于黄瓜、甜瓜和西瓜的镰刀菌的EST酶谱较为相似,都具有Rf=0.018,Rf=0.114和Rf=1.000的3条酶带,其它寄主来源的镰刀菌的EST酶谱间互相则存在着很大的差别.但这些菌株基本上都存在着Rf为0.018和1.000的2条酯酶同工酶酶带.     

皱疤坚螺在不同发育时期的酯酶(EST)同工酶比较

采用聚丙烯酰胺电泳法分析了皱疤坚螺(Camaena cicatricosa)不同发育时期3个组织的酯酶同工酶,得到19条基本谱带,其中有4条为公共谱带。实验结果表明:不同的组织之间酯酶同工酶存在差异。在相同组织的不同发育时期酯酶同工酶酶谱是相似的,但在谱带上也存在有细微的差异;肝的酯酶活性最大,足的酯酶活性最小。以酶谱为性状,对其进行了聚类分析,发现不同发育时期足和外套膜的相似性比较大,肝的酯酶同工酶酶谱出现了较大变化,而且依成体肝、亚成体肝和幼体肝的顺序与其它组织依次聚类。     

粘虫中毒后体内酯酶同工酶活力变化的研究

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(PAGE)，研究了试虫中毒后不同阶段体内酯酶同工酶的变化情况。两种杀虫剂对粘虫体内酯酶同工酶影响的研究表明，中毒试虫体内酯酶同工酶不同程度地被抑制，个别酶带消失，也有新带的出现，在抑制酯酶的程度上，有机磷类高于氨基甲酸酯类。认为试虫中毒后不同时期体内酯酶同工酶的变化并无一定规律可循。     

芦笋雌雄性别间同工酶酶谱的比较分析

采用聚丙烯酰胺不连续垂直平板凝胶电泳(PAGE)技术,对芦笋雌雄株叶片中的过氧化物酶(POD)、酯酶(EST)、谷氨酸脱氢酶(GDH)和淀粉酶(AMY)同工酶进行了比较分析.结果表明,芦笋雌株与雄株之间的过氧化物酶及酯酶同工酶酶谱存在显著差异,过氧化物酶在雄株中比在雌株中多了Rf值为0.86的一条酶带;酯酶在雄株中多了Rf值为0.18和0.30的两条酶带.谷氨酸脱氢酶和淀粉酶在雌雄株间具有相同的酶谱带,没有表现出性别差异.     

武夷山和九龙山崇安髭蟾的同工酶分析

本文采用聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳的方法,对产于福建武夷山和浙江九龙山的崇安髭蟾(Vibrissaphora Liui Pope)作了四种器官组织(肝、心、脑、肾)乳酸脱氢酶(LDH)和酯酶(EST)同工酶的分析比较,结果表明,两个产地髭蟾的同工酶谱无差别,我们认为,武夷山和九龙山崇安髭蟾的形态差异只能是地理种群分化(geographical population differentiation),把这两个不同产地的髭蟾作为同一个种处理是恰当的。     

3种陆生贝类不同组织酯酶(EST)同工酶比较分析

采用聚丙烯酰胺电泳法分析了陆生贝类扁平毛蜗牛(Trichochloritis submissa),宽盘大脐蜗牛(Aegistaplatyomphala),褐色圈螺(Plectopylis fimbriosa)3个种成体内肝脏、外套膜、足组织的酯酶同工酶,共得到17条基本谱带,其中有2条为3个种共有。3种陆生贝类相应的酶带有明显种属差异,且都表现出组织特异性。以酶谱为性状,对其进行聚类分析,结果显示扁平毛蜗牛与宽盘大脐蜗牛的亲缘关系较近。     

黑冀地鳖和中华真地鳖三种同工酶的比较研究

用聚丙烯酰胺垂直平板凝胶电泳法分析比较了新疆黑冀地鳖polyphaga obscurachop和中华真地鳖Eupolyphaga sinensis Walker的酯酶(EST)、苹果酸脱氢酶(MDH)和乳酸脱氢酶(LDH)三种同工酶的电泳酶谱,研究结果表明:两种地鳖各自具有不同的特征性酶谱;不同组织具有不同的特征性酶谱;酯酶(EST)同工酶的两种地鳖中的活性均较高,而乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的活性则较低.     

不同种群泥蚶的三种同工酶变异

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对广西自然种群、乐清自然种群、山东自然种群、韩国自然种群和乐清养殖种群泥蚶(Tegillarcagranosa)的过氧化物酶、酯酶及淀粉酶等3种同工酶进行了研究。结果表明,POD同工酶除韩国自然种群外,其它种群的表达一致;AMY同工酶除乐清养殖种群外,其它种群的表达一致。EST酶谱中,广西自然种群与乐清自然种群的酶谱表达一致,而山东自然种群、乐清养殖种群和韩国自然种群的表达存在一定的差异。