不同转移潜能乳腺癌细胞中EGFR的表达及意义

目的 研究表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）在不同转移潜能乳腺癌细胞中的表达,并探讨其在乳腺癌侵袭转移过程中的作用. 方法 利用人工基质膜侵袭实验获得高、低转移潜能乳腺癌细胞亚系,四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测两系细胞生长曲线和倍增时间,流式细胞仪检测两系细胞周期,transwell侵袭小室模型比较两系的迁移能力.应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和免疫印迹（Western Blot）检测EGFR在两系细胞中的表达. 结果 利用transwell小室成功筛选出高、低转移潜能乳腺癌细胞亚系;它们的体外生长速度、倍增时间、细胞周期和侵袭力具有明显差异;RT-PCR和Western Blot均显示在高转移潜能乳腺癌细胞中EGFR在基因和蛋白水平的表达均显著高于低转移乳腺癌细胞. 结论 EGFR的过表达与乳腺癌细胞侵袭能力显著性相关,EGFR在乳腺癌侵袭过程中发挥了重要的作用.     

RNA干扰靶向沉默COX 2基因对MG 63骨肉瘤细胞生物学特性的研究

目的 通过构建小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)降低MG 63骨肉瘤细胞环氧合酶 2(COX 2)基因的表达,并进一步研究其对MG 63骨肉瘤细胞增值、侵袭、迁移能力的影响及分子机制。方法 设计靶向干扰COX 2基因的siRNA,通过脂质体转染MG 63骨肉瘤细胞,使其抑制MG 63骨肉瘤细胞COX 2基因的表达,后采用噻唑蓝(MTT)比色法、Transwell小室实验研究其对MG 63骨肉瘤细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响,采用RFQ PCR和Western blot分别从基因和蛋白的水平检测MG 63骨肉瘤细胞侵袭性相关因子基质金属酶(MMP 9)的表达及血管内皮生长因子(VEGF)的表达。结果 转染MG 63骨肉瘤细胞后,实验组与阴性对照组和空白对照组比较,通过RFQ PCR和Western blot检测COX 2基因表达降低约90%(P0.05),MTT检测MG 63骨肉瘤细胞增值能力明显受到抑制(P0.05),Transwell实验检测MG 63骨肉瘤细胞侵袭、迁移能力明显下降(P0.05),经RFQ PCR、Western blot检测侵袭性相关因子MMP 9和血管内皮生长因子VEGF的mRNA及蛋白表达降低(P0.05)。空白对照组和阴性对照组比较无明显变化,差异无统计学意义(P0.05)。结论 人MG 63骨肉瘤细胞COX 2基因被抑制后,MG 63骨肉瘤细胞增值、侵袭、迁移能力明显下降。     

Curcumin通过Wnt信号通路抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖的研究

目的 观察姜黄素(Curcumin)对乳腺癌细胞MCF-7增殖的影响,以及对细胞内Wnt信号通路的影响,探索Curcumin可能存在的抑制乳腺癌细胞增殖的分子机制.方法 体外培养人乳腺癌细胞MCF-7,并用不同浓度的Curcumin作用不同的时间.用MTT检测Curcumin对MCF-7细胞生长情况的影响;流式细胞仪观察经Curcumin作用后细胞周期的改变;RT-PCR和Westernblot分别检测细胞内β -catenin和下游靶基因CyclinD1的mRNA和蛋白水平的表达.结果 MTT结果显示Curcumin可以抑制MCF-7的增殖,并具有剂量-时间依赖性.在浓度为20 μmol·L-1时,对细胞生长的抑制作用最为明显.流式细胞仪观察细胞周期的结果提示,Curcumin能够阻止MCF-7细胞由G1期进入S期,提高Go/G1期细胞的百分比.RT-PCR和Western blot结果显示,Curcumin显著降低了细胞内β-catenin和CyclinD1的mRNA和蛋白水平的表达,且呈剂量-时间依赖性.结论 Curcumin能够抑制MCF-7细胞胞浆内β -catenin蛋白进入胞核,阻断Wnt信号转导通路.进而抑制下游靶基因CyclinD1的表达,阻止MCF-7由G1期进入S期,有效抑制了MCF-7细胞的增殖.     

靶向CD133的RNA干扰对人肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制作用

目的利用RNA干扰技术下调SMMC-7721肝癌细胞中CD133的表达,观察其在肝癌细胞增殖和侵袭方面的作用.方法构建CD133特异性的siRNA真核表达载体,转染SMMC-7721肝癌细胞并筛选出稳定表达siRNA的转染克隆;应用RT-PCR和Western blot检测CD133 mRNA和蛋白的表达;流式细胞仪检...     

Survivin过表达对MS1细胞Survivin基因及蛋白表达与凋亡的作用

目的 探讨Survivin过量表达对MS1细胞Survivin基因及蛋白表达与凋亡的影响.方法 构建Survivin真核表达载体,以脂质体转染MS1细胞,采用流式细胞仪的方法检测细胞凋亡;Real-time PCR和Western blot检测Survivin的mRNA及蛋白水平.结果 转染Survivin实验组与空载体对照组比较,Survivin mRNA和蛋白表达明显增高,实验组细胞凋亡率较对照组下降.结论 Survivin过表达可使MS1细胞的Survivin蛋白及mRNA高表达并能使细胞凋亡凋亡率下降,为后续的动物实验打下了理论依据.     

Lumican基因对人肺腺癌细胞株A549体外增殖和侵袭的影响

目的 观察基膜聚糖(Lumican)基因过度表达对人肺腺癌细胞株A549体外增殖和侵袭的影响.方法 以携带人Lumican基因的重组慢病毒感染A549细胞,用嘌呤霉素(puromycin)筛选法建立稳定细胞株.分别用Real-time PCR和Western blotting方法检测A549细胞组、空载体组及Lumican感染组目的基因mRNA和蛋白的表达.运用MTT法研究Lumican基因对A549细胞增殖的影响.运用Transwell法检测Lumican基因对A549细胞侵袭的影响.结果 ①各组Lumican mRNA表达差异显著(x2=21.60,P＜0.01),Lumican感染组明显高于其它两组(F=102.86,P＜0.000 1),Lumican感染组的蛋白表达水平高于其它两组.②Lumican感染组在不同时间(1、2、3、4、5 d)OD(吸光度)值与A549细胞组和空载体组差异不显著(P＞0.05).③各组穿膜细胞数差异显著(x2=23.49,P＜0.01),Lumican感染组明显高于其它两组(F=73.92,P＜0.001).结论 成功构建了Lumican高表达的人肺腺癌A549稳定细胞株,Lumican基因对人肺腺癌细胞的体外增殖能力无影响,但能增强人肺腺癌细胞的体外侵袭能力.     

稳定表达绿色荧光蛋白的B16细胞株的建立及其生物学特性研究

目的建立稳定表达绿色荧光蛋白的B16黑色素瘤细胞株，并研究其生物学特性。方法转染增强型绿色荧光蛋白基因入B16细胞，经G418联合单克隆培养，筛选阳性细胞。激光共聚焦荧光显微镜观察EGFP阳性细胞形态；流式细胞仪检测细胞内EGFP基因的蛋白表达；RT-PCR检测EGFP基因的mRNA表达；皮下接种及MTF法评价细胞在体内外的生长特性。结果流式细胞仪检测表达绿色荧光蛋白的细胞阳性率为99．81％，RT-PCR检测到EGFP基因的mRNA阳性表达。生长曲线显示其体外增殖趋势与B16相似，EGFP—B16体内成瘤速度较B16慢（P〈0．05）。结论稳定表达绿色荧光蛋白的EGFP—B16细胞株成功建立，可作为作为进一步研究恶性黑色素瘤的材料。     

转录因子TCF7L2在HePG2细胞IDE表达调控中的作用

目的 TCF7L2是一种重要的转录因子,与2型糖尿病(T2DM)发生发展密切相关.本研究探讨慢病毒介导的RNA干扰抑制TCF7L2基因表达对人肝癌细胞株HePG2胰岛素降解酶(IDE)基因的影响.方法 以人TCF7L2 mRNA编码序列作为干扰靶点,构建TCF7L2特异性短发卡RNA慢病毒表达载体(LV-TCF7 L2-shRNA)感染HePG2细胞.应用实时定量PCR及Western blot检测转染后TCF7L2与IDE表达的变化.结果 成功构建TCF7L2 shRNA慢病毒载体LV-TCF7L2-shRNA.qPCR及Westem blot结果显示干扰组HePG2细胞TCF7L2和IDE mRNA及蛋白的表达水平较空白组及阴性对照组显著降低(P＜0.05).结论 LV-TCF7L2-shRNA载体有效地抑制了IDE的表达,结果证明TCF7L2是IDE表达调控中重要的转录因子,为探讨TCF7L2与IDE在2型糖尿病发病机制中的作用奠定了基础.     

si—DNMT1对肝门部胆管癌细胞抑癌基因甲基化的作用

目的研究RNA干扰对肝门部胆管癌细胞株QRC939抑癌基因甲基化的影响，初步探谤其在胆管癌治疗中的价值。方法构建靶向hDNMT1的发夹式siRNA表达载体；运用脂质体介导法将其转染人胆管癌细胞QBC939；RT-PCR法检测不同时间点hDNMT1、CDH1、p15的表达水平；MSP方法检测转染前后抑癌基因CDH1、p15的甲基纯状态；MTT检测各组细胞的增殖能力。结果1）hDNMT1的基因沉默恢复了抑癌基因CDH1、p15的表达水平；2）CDH1、p15的表达沉默是由启动子高甲基亿导致的；3）转染靶向hDNMT1的发夹式siRNA表达载体能有效地抑制QBC939的增殖能力。结论靶向hDNMT1的发夹式siRNA表达载体能有效、持续、稳定发挥对hDNMT1的基因沉默作用，恢复抑癌基因CDH1、p15的表达水平，从而抑制QBC939肿瘤细胞增殖。     

pEGFPN1-dnEGFR对胃癌细胞的化疗增敏作用

目的研究人 EGFR显性负性突变体真核表达载体(pEGFPN1 dnEGFR)对人胃癌细胞株 SGC 7901和 NCI N87化疗敏感性的影响,并探讨其可能机制.方法 MTT法测定奥沙利铂对稳定转染 pEGFPN1 dnEGFR和 pEGFP N1载体的两种胃癌细胞的量效反应.奥沙利铂作用各组细胞24h后,RT PCR检测各组细胞中 Caspase 3和 CyclinD1的 mRNA表达情况;Westernblot检测各组细胞中 Caspase 3和 CyclinD1蛋白表达情况.结果转染 pEGFPN1 dnEGFR后,两种胃癌细胞对奥沙利铂的敏感性增加,奥沙利铂对 pEGFPN1 dnEGFR转染组细胞的增殖抑制率(VI)与对照组相比有显著提高(P<0.05).RT PCR显示 pEGFPN1 dnEGFR转染组细胞 CyclinD1mRNA表达较对照组下降,而 Caspase 3mRNA表达较对照组升高(P<0.05);Westernblot显示 pEGFPN1 dnEG FR转染组细胞 CyclinD1蛋白表达较对照组下降,而 Caspase 3蛋白表达较对照组升高(P<0.05).结论 EGFR显性负性突变体能提高胃癌细胞对化疗药物奥沙利铂的敏感性,其机制可能与 Caspase 3和 CyclinD1有关     

Hypotensive activity of histidine-containing analogues of C-terminal hexapeptide of Substance P

Summary Four new hexapeptide analogues of C-terminal Substance P fragment with increased solubility in aqueous solutions are described. The peptides contain histidine in positions 6, 8, 9 and 10, respectively. The effect of the structural changes on the hypotensive activity and antigenic properties of analogues was compared. It was found that substitution of amino acid residues in various positions in the C-terminal hexapeptide of Substance P resulted in different effects on the hypotensive and antigenic properties, respectively. Only the [His⁶] SP_6-11 analogue had an unchanged antigenic structure when compared with the C-terminal region of Substance P, but it showed an almost total loss of hypotensive activity. The [His⁹] SP_6-11 analogue retained 50% of the hypotensive activity of the C-terminal hexapeptide but showed a markedly reduced expression of the antigenic epitope localized in this region of Substance P.     

新西兰政府科技投资现状概述

近年来新西兰政府大力调整其科技政策，在建设知识社会的蓝图下，建构了科技投资的基本框架，凸显了知识、经济、环境、社会四大目标，另外通过对投资决策、运行和监督的改革，使政府科技投资的机制更为科学有效，本文还给出了新西兰政府近年来科技投资的分配比例状况，阐明了其投资的重点领域。     

Outline of a dynamical inferential conception of the application of mathematics

We outline a framework for analyzing episodes from the history of science in which the application of mathematics plays a constitutive role in the conceptual development of empirical sciences. Our starting point is the inferential conception of the application of mathematics, recently advanced by Bueno and Colyvan (2011). We identify and discuss some systematic problems of this approach. We propose refinements of the inferential conception based on theoretical considerations and on the basis of a historical case study. We demonstrate the usefulness of the refined, dynamical inferential conception using the well-researched example of the genesis of general relativity. Specifically, we look at the collaboration of the physicist Einstein and the mathematician Grossmann in the years 1912–1913, which resulted in the jointly published “Outline of a Generalized Theory of Relativity and a Theory of Gravitation,” a precursor theory of the final theory of general relativity. In this episode, independently developed mathematical theories, the theory of differential invariants and the absolute differential calculus, were applied in the process of finding a relativistic theory of gravitation. The dynamical inferential conception not only provides a natural framework to describe and analyze this episode, but it also generates new questions and insights. We comment on the mathematical tradition on which Grossmann drew, and on his own contributions to mathematical theorizing. The dynamical inferential conception allows us to identify both the role of heuristics and of mathematical resources as well as the systematic role of problems and mistakes in the reconstruction of episodes of conceptual innovation and theory change.     

羟甲基化对合成木质素改性酚醛胶粘剂性能的影响

采用羟甲基化技术对碱木质素进行活化,对比了羟甲基化前后未质素改性酚醛树脂胶的粘结强度、残留甲醛、贮存稳定性和热稳定性等性能,为木质素的高值应用探讨新的途径.试验结果表明在木质素对笨酚的替代率低于30%务件下,以分离提纯后的木质素可直接应用于酚醛树脂胶粘剂的改性;而当替代率大于50%后,木质素的羟甲基化展示对木质素改性酚醛树脂的胶结强度、热稳定性具有良好的促进作用.但木质素的羟甲基化作用同时也导致木质素改性酚醛树脂中残留甲醛含量增加,进而导致制备的胶粘荆的贮存稳定性降低,可以通过改变合成过程中甲醛和碱的用量来达到降低酚醛树脂中残留甲醛含量.     

日本学术振兴会(JSPS)科学基金资助机制与战略分析

简要概述了日本的科学基金情况，重点分析了日本学术振兴会（JSPS）及其管理的科学基金。日本学术振兴会（JSPS）相当于日本的国家科学基金会，其负责管理的科学研究费补助金是日本政府出资的科学研究基金中资助金额最大、资助范围最广、资助项目数量最多的竞争性科学基金。其对基础研究的资助政策、方向遴选、评审程序、经费分配、管理机制等对其它国家的基础研究政府资助机构具有借鉴和示范意义。介绍了科学研究费补助金资助的研究类型和申请程序，分析了近10年科学研究费补助金的预算及年增长率、近12年科学研究费补助金的项目资助率情况、近5年科学研究费补助金的领域分配与资助情况、2005年科学研究费补助金资助情况等。对科学研究费补助金的基金项目资助战略予以全面分析，对我国相关部门的管理工作有重要参考价值和借鉴意义。     

有限元法在电机温度场仿真中的运用

运行的超声电机会产生温升，过高的温升对超声电机的机械特性及使用寿命都有较大影响。本文首先通过实验证明压电陶瓷元件发热和摩擦层摩擦发热是超声电机温升的主要热源；然后，分别以压电陶瓷元件发热和摩擦层摩擦发热为热源，建立其相应的温度场热分布模型。并用有限元软件分别对压电陶瓷元件发热场和接触摩擦发热场进行仿真计算。计算结果表明，压电陶瓷片发热源部分，热量最大处为压电陶瓷片粘贴面的内圈；接触摩擦发热中，摩擦产生的热量集中在接触表面。     

The use of liposomes in the investigation of mechanisms of asbestos damage

Asbestos-induced cell damage is initiated by a reaction at the plasma membrane. The effect of chrysotile (which is more hemolytic and releases more silicic acid than other types of asbestos) on permeability changes of liposomes has been investigated. The destabilizing effect rises when the amount of chrysotile is increased. Silicon dioxide is one major constituent which could be a hemolytic agent, and a cause of damage. It also caused an increase of permeability of liposomes.     

巷道布置对围岩稳定性影响的数值模拟

采用理论分析不同应力场下巷道轴线与最大水平主应力方向夹角的最佳角度，利用数值模拟不同夹角情况下，巷道围岩应力分布、正前方应力分布及变形特征。得出：1）最大水平主应力σH〉最小水平主应力σh〉垂直主应力σr时，最佳角度为0°；σt〉σH〉σh时，最佳角度为90°；σH〉σa〉σA时，最佳夹角为α0.2）巷道开挖后，水平应力在两帮出现应力降低区，在顸、底板出现应力集中区；垂直应力在两帮出现应力集中区，在顶、底板出现应力降低区；随角度变化，应力变化区均有明显变化，正前方断面的最大主应力变化明显。3）巷道达到最佳角度时，围岩变形相对较小，最大主应力围绕在巷道周边，呈环状或类环状分布；其它角度时，围岩变形相对较大，最大主应力逐渐向顶、底板的四角或两帮发展。     

Evaluation of the anti-angiogenic effect of aloe-emodin

The present study identified aloe-emodin (AE, a hydroxyanthraquinone from Aloe vera and other plants) as a new anti-angiogenic compound with inhibitory effects in an in vivo angiogenesis assay and evaluates its effects on specific key steps of the angiogenic process. AE inhibits endothelial cell proliferation, but this effect is not cell specific, since AE also inhibits tumor cell proliferation. Cell migration and invasion are not remarkably affected by AE. On the other hand, AE has different effects on endothelial and tumor cell gelatinases. Two main targets of the pharmacological action of AE as an anti-angiogenic compound seem to be urokinase secretion and tubule formation of endothelial cells. Finally, AE produces a remarkable photocytotoxic effect on tumor cells. Taken together, our data indicate that AE can behave both as an anti-tumor and an anti-angiogenic compound and suggest that AE could be a candidate drug for photodynamic therapy. Received 7 September 2006; received after revision 17 October 2006; accepted 31 October 2006     

The re-emergence of hyphenated history-and-philosophy-of-science and the testing of theories of scientific change

A basic premise of hyphenated history-and-philosophy-of-science is that theories of scientific change have to be based on empirical evidence derived from carefully constructed historical case studies. This paper analyses one such systematic attempt to test philosophical claims, describing its historical context, rationale, execution, and limited impact.