解聚复肾宁对糖尿病大鼠肾脏HGF表达的影响

目的观察解聚复肾宁（JJFSN）对糖尿病大鼠肾HGF表达的影响及肾保护作用。方法SD大鼠腹腔注射链尿佐菌素法建立糖尿病模型，随机分为正常对照组、模型组、解聚复肾宁治疗组、依那普利治疗组、JJFSN＋依那普利治疗组。12周后，检测各组空腹血糖（FBG）、尿素（BU）、24h尿β2微球蛋白（β2-MG）、肌酐清除率（Ccr）；免疫组化法检测肾组织HGF表达，放射免疫法测定大鼠血清胰岛素（Ins）含量，透射电镜观察肾脏超微结构。结果与模型组比较，各治疗组大鼠FBG、BU、β2-MG明显降低，Ccr明显升高，血清Ins含量增加，肾组织HGF表达明显上调，肾组织病理变化减轻，其中以J＋Y组改善最显著（P〈0．05）。结论JJFSN对DM大鼠肾脏形态争功能有明显保护作用，其机制可能与其上调肾脏HGF表达、保护胰岛β细胞、延缓肾脏纤维化进程有关。     

单纯及丙泊酚联合电休克对抑郁大鼠海马TNF—α表达的影响

目的探讨单纯电休克及丙泊酚联合电休克对抑郁大鼠电休克治疗效果及海马内TNF-α表达的影响。方法50只成年Wistar大鼠随机分为5组（n=10）：正常对照组（C组）、抑郁组（D组）、单纯丙泊酚组（DP组）、单纯电休克组（E组）、丙泊酚联合电休克组（M组）。C组正常饲养，其余采用经典的慢性不可预见性应激法建立抑郁模型。建模成功后，E组直接行电休克治疗，M组腹腔注射丙泊酚90mg／kg，麻醉产生效应后行电休克治疗，每日进行以上处理1次，连续7日。以Open—field法和糖水消耗实验进行行为学评分。实验完成后处死大鼠，用免疫组化染色法检测TNF—α受体蛋白的表达；ELISA法海马TNF-α的含量，RT-PCR法测海马TNF—α mRNA表达。结果E组和M组大鼠的行为学评分高于D组和DP组，且M组高于E组（P〈0．05）；D组和DP组海马内TNF-α含量以及mRNA的表达高于其它各组（P〈0．05），M组海马内TNF—α含量以及mRNA的表达低于E组（P〈0．05），与C组差异无统计学意义（P〉0．05）；D组和DP组海马区TNF-α受体表达量低于C组（P〈0．05），M组的表达量接近于C组，但高于E组（P〈0．05）。结论慢性应激使大鼠海马内TNF—α含量升高及其受体表达下调，从而产生抑郁症。丙泊酚可以改善电休克抑郁症状可能与进一步下调抑郁大鼠海马内TNF—α的含量和上调其受体表达有关。     

犬高危穿透性角膜移植术后使用1％RAPA滴眼液对体内TNF-α含量的影响

目的通过观察肿瘤坏死因子-α（tumornecrosisfactor-α，TNF-α）变化情况，评价犬高危穿透性角膜移植后RAPA滴眼液抗免疫排斥反应效果。方法选择36只健康犬建立角膜高危病理模型后进行高危穿透性角膜移植手术，并分组用复方氯化钠或1％RAPA点眼，4次／d，18只未手术犬为空白对照组。同时进行外周血和角膜组织中TNF—α含量检测。结果术后7～42d复方氯化钠组和治疗组TNF-α浓度明显比对照组高（P〈0．01），在术后28d治疗组TNF-α浓度逐渐降低，复方氯化钠组仍维持较高含量。结论RAPA滴眼液能降低角膜移植手术后TNF-α含量，有效抗免疫排斥反应。     

外源性干细胞因子对糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦Cajal细胞的影响

目的探讨外源性干细胞因子（SCF）能否改善糖尿病胃轻瘫（DGP）大鼠胃窦Cajal细胞（ICC）的异常病变。方法sD大鼠随机分为实验组和对照组，实验组腹腔注射链脲佐菌素（STZ）50mg／kg并高糖高脂饲料不规律喂养构建DGP模型，对照组腹腔注射等量生理盐水并普通饲料规律喂养。成模后随机分为糖尿病组（DM组）、糖尿病＋外源性干细胞因子治疗组（DM＋SCF组）；DM＋SCF纽腹腔注射SCF0．4ug／（kg·d），共15天，对照组和DM纽每天腹腔注射等量的磷酸盐缓冲液（pH=7．4）。RT-PCR、Wester Dblot检测胃窦组织中SCF及c—kit的mRNA及蛋白表达；免疫组化、透射电镜观察胃窦组织中Cajal细胞的变化。结果DM组大鼠胃窦组织SCF及c—kit的mRNA及蛋白表达下降，Cajal细胞数量减少，细胞内线粒体肿胀、内质网扩张；予外源性SCF干预后，胃窦组织中SCF及C—kjf的mRNA及蛋白表达上调，caial细胞数量增多、超微结构明显改善。结论外源性SCF能在一定程度上改善或逆转糖尿病胃轻瘫大鼠胃窦Cajal细胞的异常病变：     

重症急性胰腺炎大鼠肠粘膜免疫屏障功能损伤及早期腹腔引流对其影响的实验研究

目的探讨早期腹腔引流对重症急性胰腺炎（severe acute pancreatitis，SAP）大鼠肠粘膜免疫屏障功能损伤的影响及作用机制。方法将72只Wistar大鼠随机分为3组：SAP组（A组）、SAP引流组（B组）、假手术对照组（C组）。观察术后12、24h大鼠死亡率，各时相点腹水量。分别予术后的第6、12、24h采集血液、腹水、肠液、肠组织、胰腺标本，冻存以备检测。采用全自动生化分析仪检测血清及腹水淀粉酶活性，ELISA法测定血清及腹水IL-6、TNF—a浓度，胰腺组织冰冻切片HE染色观察病理变化，ELISA法检测肠液sIgA水平，肠组织作CIM＋T淋巴细胞免疫组化染色。结果分别于术后6、12、24h，通过各项指标的检测，有以下发现：①术后同时相点A、B两组大鼠血清及腹水淀粉酶、IL-6．TNF-α水平均显著高于C组大鼠水平，且术后同时相点A、B两组大鼠胰腺组织水肿及出血坏死程度均较C组大鼠显著加重。②对肠液sIgA的检测发现，术后各时相点A、B两组大鼠均显著低于C组大鼠水平。且A、B两组大鼠肠组织中CIM＋T淋巴细胞浸润程度也均显著低于C组。③术后同时相点B组大鼠血清及腹水淀粉酶、IL-6、TNBa水平均显著低于A组大鼠水平；B组大鼠胰腺组织水肿及出血坏死程度较A组明显减轻。④术后同时相点B组肠液sIgA水平显著高于A组水平；且B组肠组织中CIM＋T淋巴细胞浸润程度较A组显著增加。结论SAP发病早期，通过腹腔置管引流将富含诸如IL-6、TNF-α等炎性因子的腹水引流出体外，对肠粘膜免疫屏障功能起到显著的保护作用。     

早期母子隔离应激对大鼠学习记忆能力的影响

目的探讨早期母子隔离应激对幼鼠学习记忆能力的影响。方法30只SD新生大鼠用于实验，实验随机分成3组，正常对照纽、母子隔离15分钟纽、母子隔离3小时纽。在生后40天，三组大鼠进行Morris水迷宫及记录海马脑片长时程增强电位（LTP）实验。结果Morris水迷宫测试，与正常组比较母子隔离3h组大鼠寻找平台需要的潜伏期延长（P〈0．05），而母子隔离15分钟组大鼠寻找平台需要的潜伏期与正常组比较则无明显变化（P〉0．05）；海马脑片长时程增强电位提示：正常对照组条件刺激（CS）前后fEPSP斜率变化率为：64．7±22．9％；母子隔离3h组为：35．3±14．2％，低于正常组（P〈0．01）；母子隔离15min组为：66．3±29．7％，与正常组比较无显著性意义（P〉0．05）。结论幼鼠生后早期过度的应激导致大鼠的学习记忆能力减弱。     

脂多糖致感染性脑水肿大鼠星形胶质细胞的活化和凋亡

目的通过观察脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）致大鼠感染性脑水肿后星形胶质细胞的凋亡、活化及iNOS表达情况，探讨在LPS致脑水肿中星形胶质细胞的作用。方法84只雄性SD大鼠，随机分为3组：空白对照纽（C组，n=12）；生理盐水对照纽（S组，n=12）；感染性水肿组（L组，n=60）。感染性脑水肿组又按颈内动脉注射脂多糖后6h、12h、24h、48h、72h分为5个亚组（n=12）。向颈内动脉注射脂多糖LPS150μg（0．15ml）建立大鼠感染性脑水肿模型。采用HE染色、流式细胞检测和免疫纽化染色分别观察脑组织病理改变、星形胶质细胞凋亡、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）和iNOS表达情况。结果与C组和S组比较，L组大鼠星形胶质细胞胞体变大、突起增多；细胞内GFAP和iNOS表达增强，12h达高峰，除72h组，其余亚组均有统计学差异（P〈0．05）；各亚组星形胶质细胞凋亡增多（P〈0．05），24h凋亡最显著。C组和S纽比较无统计学意义（P〉0．05）。结论感染性脑水肿后星形胶质细胞凋亡增加，异常活化，分泌iNOS，参与感染性脑水肿的形成，在脑水肿的发生发展中发挥重要作用。     

darbufelone对胃癌SGC-7901细胞裸鼠移植瘤血管生成的影响

目的观察环氧合酶-2／5-脂氧合酶双重抑制剂darbufelone对人胃癌皮下移植瘤血管生成的影响，并初步探讨其机制。方法建立裸鼠实体瘤模型，随机分为darbufelone组和对照组，darbufelone及生理盐水分别连续灌服4周。测量肿瘤质量、体积，计算抑瘤率；免疫组化检测CD34并计算微血管密度；RT—PCR法及Western blot法分析移植瘤组织中MMP-9、VEGF的表达。结果darbufelone可明显抑制裸鼠移植瘤的生长，质量抑瘤率为58．42％，体积抑瘤率为67．13％。darbufelone组的微血管密度（MVD）（15．36±0．30）明显低于对照组（29．47±0．63）（P〈0．05）；darbufelone组肿瘤组织中VEGF及MMP-9在基因水平及蛋白水平的表达（P〈0．05）。结论darbufelone能有效抑制裸鼠移植瘤的生长，减少移植瘤组织中VEGF及MMP-9的表达，抑制肿瘤的微血管生成，具有抗血管生成的作用。     

早期营养不良对SD大鼠海马AchE和ChAT表达的影响

目的探讨生命早期营养不良对21天雄性sD大鼠中枢AchE和ChAT的影响。方法从妊娠晚期到哺乳期末给予母鼠半量饲料，造成子鼠营养不良，取哺乳期末雄性子鼠脑海马组织进行测量。结果免疫组化结果示：实验组海马CA3区ChAT光密度低于对照组（P〈0．05），在CA!区无差异（P〉0．05）；而两纽间CAl和CA3区AchE光密度均无差异（P〉0．05）；RT—PCR示：实验组海马ChAT、AchEmRNA少于对照组（P〈0．05）。结论早期营养不良能导致子鼠海马及中枢胆碱能系统发育障碍，可能会影响成年后大鼠学习记忆能力。     

循环雌二醇及代谢物与绝经后乳腺癌的相关性

目的探讨循环雌二醇（E2）、4-羟雌二醇（4-OHE2）、2-甲氧雌二醇（2-MOE2）水平及4-羟雌二醇：2-甲氧雌二醇（4-OHE2：2-MOE2）比值与绝经后乳腺癌危险性的相关性。方法采用ELISA法检测绝经后34例乳腺癌、40例乳腺良性（乳腺纤维腺瘤与乳腺囊性增生病）疾病患者和20例正常对照循环雌二醇、4-羟雌二醇、2-甲氧雌二醇水平并计算4-羟雌二醇：2-甲氧雌二醇比值。结果乳腺癌组及乳腺良性疾病组循环2-甲氧雌二醇水平差异无统计学意义（P〉0．05），但均较正常对照组低（P〈0．05）；乳腺癌组及乳腺良性疾病组4-羟雌二醇：2、甲氧雌二醇比值差异无统计学意义（P〉0．05），但均较正常对照组升高（P〈0．05）。乳腺癌Ⅰ期～Ⅲ期各期循环雌二醇、4．羟雌二醇、2-甲氧雌二醇、4-羟雌二醇：2-甲氧雌二醇比值差异无统计学意义（P〉0．05）。4-羟雌二醇、2．甲氧雌二醇、4．羟雌二醇：2-甲氧雌二醇比值在乳腺癌ER（-）组与ER（＋）组间差异无统计学意义（P〉005），但ER（＋）组雌二醇水平较ER（-）组明显升高（P〈0．05）。结论2．甲氧雌二醇与绝经后乳腺疾病负相关；4-羟雌二醇：2-甲氧雌二醇比值可能预示绝经后乳腺疾病危险。     

链霉素诱导的2型糖尿病大鼠模型的肾脏功能变化

目的通过观察链霉素诱导的2型糖尿病大鼠模型肾脏功能的变化,以探讨此种模型是否适用于糖尿病肾损害的研究。方法采用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)辅以高脂饮食建立2型糖尿病大鼠模型,筛选造模成功的大鼠为糖尿病组,并与正常大鼠比较,造模后8周观察两组大鼠血糖、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血肌酐(creatinine,CR)、血糖基化终末产物(Advanced glycation end products,AGE)、尿微量白蛋白、肾重指数的变化以及AGE受体(Receptor of AGE,RAGE)、蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)、蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)在肾脏的表达变化。结果糖尿病组的血糖、血尿素氮、血肌酐、血AGE、尿微量白蛋白以及肾重指数均明显高于正常组(P0.05),RAGE、PKC的mRNA以及蛋白表达水平均较正常组高(P0.05),PKA的mRNA和蛋白表达水平则较正常组低(P0.05)。结论 STZ诱导的2型糖尿病大鼠模型在造模后第8周肾脏功能存在明显的损害,并且导致肾脏损害的上游重要介质RAGE、PKC、PKA在第8周都有着明显的变化。此种模型能够用于糖尿病肾损害的研究,并且是观察中早期糖尿病肾病的较好的模型。     

Roux-en-Y胃旁路术对2型糖尿病大鼠肾脏非对称性二甲基精氨酸代谢的影响

目的研究Roux-en-Y胃旁路术对2型糖尿病大鼠肾脏非对称性二甲基精氨酸(ADMA)代谢的影响。方法 40只SD大鼠,随机分为正常对照组(NC组,n=8)和糖尿病模型组(32只)。糖尿病模型组成模30只,随机分为糖尿病对照组(DC组,n=8)、糖尿病假手术组(DSO组,n=8)及糖尿病手术组(DO,n=14),DO组行胃旁路术,DSO组行胃窦十二指肠离断原位吻合。检测术前、术后1、2、4、8周血胰高血糖素样肽(GLP-1)水平,测定术前、术后8周空腹血糖(FBG),肾脏ADMA、血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、一氧化氮(NO)水平,一氧化氮合酶(NOS)活性;检测蛋白质精氨酸甲基转移酶1(PRMT1)mRNA及二甲基精氨酸二甲胺水解酶1(DDAH1)mRNA,PRMT1蛋白表达水平,PAS染色观察肾脏组织学变化。结果随着手术时间延长,D0组GLP-1水平增加,其余各组无明显变化(P0.05),术后8周,DC和DSO组较DO组和NC组FBG、BUN、Cr、ADMA水平,PRMT1mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P0.05),NO、NOS、水平、DDAH1的mRNA表达明显降低(P0.05);PAS染色示DC组和DSO组肾小球基质沉积,阳性染色物增多,余无明显变化。结论 2型糖尿病肾脏组织中的ADMA升高;胃旁路术促进ADMA代谢,改善了肾功能。     

参附动员内皮祖细胞改善肝移植大鼠缺血再灌注损伤

目的 观察参附注射液对发生肝移植缺血再灌注损伤(IRI)的大鼠外周血中内源性内皮祖细胞(EPCs)的作用以及此作用对其肝脏功能的影响.方法 100只雌性SD大鼠随机分为3组:原位肝移植(0LT)+参附(SF)组,OLT对照组,假手术组.3组均于术后第1、4、7天取血液标本流式细胞术检测外周血内皮祖细胞数量及生化分析仪检测肝功能,观察胆汁分泌量,并取肝组织标本进行HE染色形态学观察肝脏损伤.结果 OLT+ SF组外周血中的EPCs在术后1天开始增加,第4天达到高峰并持续至第7天;并且在3个时间点上,OLT+ SF组的外周血EPCs数量较其它两组明显增加,具有统计学意义(p ＜0.01);OLT+ SF组在用药后IRI有所改善,较对照组有统计学差异(p＜0.05).结论 参附注射液能显著动员大鼠骨髓中的内源性EPCs进入外周血,修复损伤的肝血窦,改善微循环,进而改善肝移植术后的缺血再灌注损伤.     

国产无机三氧化物聚合物的免疫相容性研究

目的 以细胞因子（肿瘤坏死因子α和白细胞介素1β）为研究对象,对国产无机三氧化物聚合物（MTA）介导的炎症反应进行相关的免疫学评价.方法 运用双抗夹心ELISA检测新材料国产MTA引起体外小鼠的单核巨噬细胞系RAW264.7细胞TNF-a和IL-1β的变化.结果 未经脂多糖诱导的RAW264.7细胞与阳性材料接触后,TNF-α和IL-1β的表达均高于阴性材料,差异均有显著性意义（P〈0.05）;国产MTA组和进口MTA组TNF-α和lL-1β的表达与阴性材料比较差异无显著性意义（P〉0.05）;经脂多糖诱导的RAW264.7细胞与阳性材料、国产MTA、进口MTA接触后,TNF-a和IL-1β的表达均高于阴性材料,差异均有显著性差异（P〈0.01）.结论 国产MTA具有良好的生物相容性.     

解聚复肾宁对大鼠肾小球系膜细胞增殖和细胞周期的影响

目的 观察中药复方解聚复肾宁（JJFSN）对高耱环境下大鼠肾小球系膜细胞（mesangial cell,MC）增殖和细胞周期的影响.方法 以高糖诱导MC增殖,采用血清药理学方法制备不同浓度JJFSN舍药血清,加入培养液中,用MTT法检测细胞增殖,流式细胞技术检测细胞周期.结果 MTT显示：JJFSN含药血清可抑制高糖诱导的MC过度增殖（P＜0.05）,并且这种作用具有药物剂量和时间依赖关系.流式细胞技术分析表明：JJFSN可逆转高糖对细胞周期的影响,使G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例下降（P＜0.05） 在高浓度时还能促进MC细胞凋亡.结论 JJFSN可以通过调节细胞周期,促进细胞凋亡,从而抑制高糖诱导的MC过度增殖,这可能是JJFSN防治DN早期的作用杌理.