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利用焦锑酸钾沉淀法研究了辣椒叶片导管分子程序化死亡(PCD)过程中Ca2+分布的变化.在导管分子形成初期,液泡和细胞核占据细胞的大部分体积,Ca2+主要分布在细胞间隙和细胞壁上;当壁次生加厚开始后,液泡、细胞核与其他细胞器解体,细胞内Ca2+明显增多;细胞质进一步解体,Ca2+在未进行次生加厚的细胞壁上明显增多,而次生加厚带上非常少;随着细胞质更进一步的消失,Ca2+主要分布于未次生加厚的细胞壁侧,次生加厚带上仍然非常少;在细胞内物质彻底消失后,Ca2+在次生加厚带部位上分布增加,而在未次生加厚的壁上减少.观察结果表明:在导管分子PCD的初期、细胞壁次生加厚期和成熟期,Ca2+的分布发生时空变化,可能表明它对细胞壁次生加厚具有调节和提高 Ca2+运输效率的作用. 相似文献
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部分抑制CDK4基因的表达导致V79-8细胞的G1期的延长 总被引:1,自引:0,他引:1
V79-8细胞是一个没有可测定G1和G2期的变异细胞株,其母系细胞V79有G1期但没有G2期,为了探讨V79-8的G1期缺乏是否与CDK4的调控有关,研究了CDK4对其细胞周期的影响,构建反义CDK4质粒转染V79-8细胞筛选得到V79-8-asCDK4细胞,通过研究V79-8-asCDK5与对照组细胞2的细胞2生长曲线,测定其细胞的GT(细胞倍增时间)用FCM测定细胞2周期中各个周期时相所占的比 相似文献
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PKCα反义RNA对乳腺癌细胞增殖及cyclinD1和CDK4表达的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
PKC,cyclin和CDK基因直接参于调控细胞的增殖与分化,因此它们在细胞癌变中的作用已成为重要的研究课题。利用反义RNA技术抑制PKCa基因的表达,然后观察分析了乳腺癌细胞增殖的变化以及对cyclinD1和CDK4基因表达的影响。 相似文献
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表达cryIA/gna双价抗虫基因烟草兼抗棉铃虫和蚜虫 总被引:16,自引:0,他引:16
利用人工合成的、密码子优化后的雪花莲凝集素(GNA)基因,与人工合成的CFM cryIA构建了双价抗虫基因植物高效表达载体。通过根癌农杆菌介导转化烟草,获得28株卡那酶素抗性植株,经PCR及Southern印迹检测,证实了双价抗虫基因在烟草基因组中的整合,转基因烟草杀棉铃虫试验表明,40%转基因烟草植株对棉铃虫具有高抗性;Bt杀虫蛋白ELISA检测获得与虫试较一致结果,抗虫性较强株K11号CryI 相似文献
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一种新的红细胞源性降压因子的作用机制 总被引:3,自引:2,他引:1
研究了一种来自红细胞的新的内源性降压因子(EDDF)的降压机制,重点探讨其对血管平滑肌细胞(VSMC)胞浆游离钙离子及核内钙离子转运的影响,以fluo-3/AM作为Ca^2+荧光探针,采用激光扫描共聚焦显微镜观察人脐静脉VSMC(HUV),钙超载模型大鼠肠系膜VSMC(CaOMV)和正常对照Wistar大鼠肠系膜培养的VSMC(WMV)「Ca&2+」i及(「Ca^2_」n)的变化;用流式细胞仪测定 相似文献
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烟草花叶病毒及番茄花叶病毒弱毒疫苗N14基因组重组体的构建与侵染性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
用基因交换的方法将烟草花叶病毒普通株(中国分离物,TMV-Cv和番茄花叶病毒弱毒疫苗N14基因组的运动蛋白(MP)、外壳蛋白(CP)基因编码区和3'非编码区嵌合于N14和TMV-CV 5'非编码区和复制酶基因的下游,构建重组病毒克隆pTN和pNT,并进行体外转录和烟草侵染试验结果 pTN和 pNT体外转录物对烟草均具侵染性:前者感染枯斑三生烟( Nicotiana tobacum cv.Samsun NN),等量感染的枯斑形成数比 PTMV-Cv少;感染普通烟( Nicotiana tobacum cv. Huangm-iaoyu,黄苗榆品种),出现典型系统症状,但叶片畸形率较低.后者感染枯斑三生烟,等量感染的枯斑形成数比pN14多;感染普通烟仍不出现系统症状.结果表明:重组病毒TN和NT仍能在试验用烟草中增殖,前者在普通烟上基本表现为TMV-Cv的强病毒性状,后者在普通烟上表现为N14的弱病毒性状; TMV-CV和 N14的复制酶与 MP, CP和 3'非编码区之间为非严紧型连接,两者在类似的各亚基因组之间可进行功能互补.初步推测,N14复制酶编码基因的突变区对N14的致弱起主要作用;其运动蛋白编码基因的突变区对被侵染烟草 相似文献
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膜结合型巨噬细胞集落刺激因子介导的内吞及其半衰期 总被引:2,自引:0,他引:2
膜结合型巨噬细胞集落刺激因子(m-M-CSF)是巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)的异型体,兼有粘附分子和反向传导信号的作用.以m-M-CSF高表达的J6-1细胞系为模型,研究了重组人 M-CSF可溶性受体(rh-M-CSF-sR)与 m-M-CSF的结合、内化和再循环.结果显示: m-M-CSF与 rh-M-CSF-sR的结合具高亲和性( Kd= 1.78×10-12 mol/L),且 m-M-CSF能介导能量和温度依赖的 rh-M-CSF-sR内化(t_1/2= 20min);内化的 rh-M-CSF-sR能以 m-M-CSF结合的形式回到细胞表面,表明: m-M-CSF有受体样介导内化和再循环作用.用间接免疫荧光法和流式细胞仪测定了4株白血病细胞系和正常人脐血单个核细胞的m-M-CSF、膜结合型M-CSF-R、胞质和胞核M-CSF及胞质和胞核M-CSF-R的半衰期,结果显示:4株白血病细胞系的各种M-CSF和M-CSF-R半衰期均长于正常人脐血单个核细胞相应M-CSF和M-CSF-R的半衰期,提示:白血病细胞降解M-CSF和M-CSF-R的速率明显降低;胞内M-CSF和M-CSF-R在瘤细胞中的作用值得研究. 相似文献
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人纺锤体素cDNA 的克隆定位和组织表达谱分析 总被引:2,自引:0,他引:2
纺锤体是细胞有丝分裂及配子成熟分裂过程中特有的亚细胞结构,它的结构和功能物正常与直接影响生物个体的发育、分化、生长和繁殖、最近的研究表明,小鼠Mos/MAPK途径对纺锤体的作用与纺锤体素蛋白的磷酸化过程密切相关,采用同源筛选方法从人睾丸CDNA分子克隆到一个与小鼠纺锤体素基因编码序列高度同源,长1929bp的cDNA片段,计算机软件分析发现,该cDNA的271-984nt是一个完整的开放阅读框(O 相似文献