青霉素发酵过程菌丝成球的工程特性研究

研究了产黄青霉菌(P.chrysogenum)876菌株发酵过程中菌丝成球现象。菌丝成球后,由于在菌球内外形成一个氧浓度分布梯度,菌丝临界氧由25%提高至40%,从而对反应器供氧提出了更高的要求。一旦反应器供氧不足,菌体碳、氮源代谢能力减弱,不利于青霉素合成。这种代谢与工程因素的交互影响,为发酵过程优化控制提出了一个值得探讨的,既有理论学术价值又有实际意义的研究课题。     

半连续青霉素发酵过程的计算机模拟

在青霉素发酵动力学的方程基础上，本文对半连续青霉素发酵过程的几种主要工艺 计算机模拟，并就模拟结果进行了性能评价，为工业发酵青霉素提供了玫份参考资料。     

巨大芽孢杆菌产青霉素酰化酶发酵条件的研究

该文对一株巨大芽孢杆菌产胞外青霉素酰化酶的发酵条件下进行了初步研究。不同的氮源及装液量和发酵时间产酶均有影响。该菌株在２７－２８℃１８０ｒ／ｍｉｎ，初始ＰＨ８．０，苯乙酸浓度０．６％的最佳发酵条件下发酵６０ｈ左右，青霉素酰化酶活力可达５００－７００Ｕ／１００ｍｌ。     

NCT、NAA、青霉素及氨苄青霉素对菊花水培扦插生根的影响

以不同浓度梯度的NCT，NAA，氨苄青霉素和青霉素水溶液对菊花插条基部进行浸泡处理，测定了不同处理后水培扦插2周和3周时的生根状况。结果表明，NCT，NAA，氨苄青霉素和青霉素均能促进菊花插生生根，所设浓度中以NCT20mg/L,NAA10mg/L，氨苄青霉素200mg/L和青霉素10万单位／L生根效率较好。其中NAA10mg/L为最佳。从实践角度看，氨苄青霉素200mg/L和青霉素10万单位／L为上选。     

青霉素在酒精发酵中应用研究

在酒精发酵过程中,发酵醒中往往因操作、灭菌工作、设备清洗等操作不当,而产生大量细菌（主要为乳酸菌、醋酸菌等）的生长繁殖,阻碍了发酵醪的正常的酒精发酵。在淀粉质原料或其他原料生产酒精时,要控制发酵醪的ｐＨ值,既要适合酵母菌的生长繁殖和代谢,又要适宜各种糖化酶的作用。传统工艺中,往往采用ＨＺＳＯ４来调节,以便降低发酵醪液中的ｐＨ值,防止杂菌的污染。本文通过对青霉素的应用研究试验,取得良好的防止杂菌污染,是一种可行的途径。１材料与方法１．１试验材料青霉素：４０万单位,华北制药厂生产;糖化酶：４～５万单…     

青霉素V亚砜酸的制备

以青霉素V钾为原料,采用过氧乙酸作催化剂合成青霉素V亚砜酸,收率可达96.1%。实验证实,将青霉素V钾干粉加入8%过氧乙酸溶液可得最佳收率。反应结束后,用稀硫酸调pH值至1.5时,青霉素V亚砜酸就从反应液中直接结晶析出。     

铜绿假单胞菌中新型的β内酰胺酶介导的羧苄青霉素抗性

为了探究铜绿假单胞菌抗羧苄青霉素的机制,通过基因敲除以及克拉维酸钾和羧苄青霉素协同实验对羧苄青霉素抗性菌株进行研究。在对羧苄青霉素具有抗性的转座突变体基础上敲除amp C后,其对羧苄青霉素抗性没有变化;8株羧苄青霉素抗性转座突变体菌株克拉维酸钾协同实验呈阳性。基因组中预测为β内酰胺酶的PA5514基因的敲除突变菌株及过表达菌株对氨苄青霉素以及羧苄青霉素的敏感性也没有变化。结果说明amp C及PA5514表达升高并不是羧苄青霉素抗性转座突变体抗性产生的原因,基因组中存在新的受克拉维酸钾抑制的β内酰胺酶可能是铜绿假单胞菌抗羧苄青霉素的一种新机制。同时,克拉维酸钾与羧苄青霉素联合使用能够提高羧苄青霉素对铜绿假单胞菌抗性菌株的治疗效果。     

青霉素钠与氯化钠对N-乙酰神经氨酸发酵的影响

重组枯草芽孢杆菌生产N-乙酰神经氨酸的过程中,通过加入表面活性剂和抗生素等方法来改善细胞通透性,以减少产物和副产物所带来的反馈抑制,从而促进细胞生长和产物的合成.对比研究了吐温20、吐温60、吐温80及青霉素钠对重组枯草芽孢杆菌摇瓶和5L发酵罐发酵的影响,确定青霉素钠具有明显增强该菌种发酵产N-乙酰神经氨酸的效果.通过对青霉素钠的添加时间和添加量进行了优化,确定在10h和34h均添加200mg·L-1青霉素钠最优,使N-乙酰神经氨酸的产量达到7.17g·L-1,相比对照提高了38.42%.在利用青霉素钠提高目标产物的基础上,又通过在发酵培养基成分中添加0.75%氯化钠来改变细胞渗透压,从而增强细胞通透性.实验证明,N-乙酰神经氨酸的产量进一步增加,最终达到7.96g·L-1.     

青霉素钠盐对丹参愈伤组织诱导的影响

本实验通过单因子变量分析法,研究不同浓度青霉素对丹参叶片愈伤组织诱导的影响,确定培养基中青霉素的最适浓度范围.实验结果表明:在MS+6-BA(0.9mg/L)的培养基中浓度为800单位/ml的青霉素钠盐对丹参叶片愈伤组织诱导率高达97%;10000单位/ml的青霉素钠盐对丹参叶片愈伤组织诱导率为0%(完全抑制).通过本次研究对提高丹参愈伤组织诱导率,为丹参组织培养技术的进一步发展成熟提供较优参数选择依据,也为丹参后续的遗传转化研究打下良好的基础.     

注射用青霉素钠引起尿频症状1例

1 临床资料 患者,女,6岁.发热,咽痛2d,于2006年2月20日来我院就诊.查体:咽部充血,扁桃体Ⅱ度肿大,并有散在脓性分泌物,体温38.4℃.血常规检查:WBC11.0×109/L,N0.72,L 0.28.诊断为化脓性扁桃体炎.青霉素皮试阴性后给予注射用青霉素钠(江西东风药业股份有限公司生产,批号051011)320万单位加入5%葡萄糖注射液180ml静滴,滴速40～50滴/min.静点结束,病人出现排尿次数增加的现象,每次排尿量不多,无尿痛.尿常规检查:正常.次日继续按上述剂量的注射用青霉素钠静滴,尿频现象加重,停用注射用青霉素钠,改为口服阿奇霉素颗粒治疗.2006年4月3日该患者因化脓性扁桃体炎复发再次来我院就诊,给予注射用青霉素钠400万单位静脉点滴,尿频症状再次发生.改用头孢唑啉钠1.5g加入5%葡萄糖注射液200ml静滴.尿频症状未再发生.     

L—乳酸产生菌的诱变选育

米根霉 R87经紫外线和氯化锂复合诱变处理,获得一株高产、稳产 L-乳酸的变异株R87-91.其在10%初糖和发醇72小时,产酸达8.18%.     

青霉素酰化酶工程菌的褐藻胶固定化

本文报告以褐藻胶(海藻酸钠)固定化青霉素酰化酶工程菌的方法。本方法对大肠杆菌的包埋量可达30～40％(W/W),酶活回收率为88％。本文对6-APA测定的PDAB法进行了改进;对固定化细胞酶活的测定提出一种新方法。     

PHB高产菌株的选育

选择甲基营养菌查氏生丝微菌成都亚种8502-3菌株作为出发菌株进行紫外光诱变处理,并得到PHB产量较高的菌株.比较原有的3株菌,确定用8502-3作为实验用种.利用紫外光的高诱变能力,对之进行多次的诱变工作,通过反复筛选,最终得到含量为64%的高产菌株.     

松苗根际生防菌的研究

采用平皿稀释分离法,通过对320株湿地松根际细菌分离物的筛选,获得1株拮抗性强的细菌菌株;运用16S rDNA序列分析方法,对菌株进行了分子鉴定,结果为洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)。以镰刀菌属(Fusarium)、丝核菌属(Rhizoctonia)、链格孢菌属(Alternaria)的真菌为病原菌,该菌株和生防菌株Pseudomonas fluorescens Q287、279、1M196、Pf5、HT51、Q3787、MVP14、FFL1R8共同对病原菌的平皿对峙试验,该菌株对立枯丝核菌、链格孢菌都有较强的拮抗作用,120 d盆栽测试得知,菌株P.fluorescens Q287最高保存率为77%,该菌株的最高保存率为62%,其拮抗效果和菌株Q287一样,均高于其他7个生防菌株,试验证明该菌株具有防治松苗猝倒病的潜力。     

用激光辐照棒状杆菌原生质体选育谷氨酸高产菌的研究

以钝齿棒杆菌T6-13为出发菌,采用甘氨酶-青霉素G-溶菌酶处理其细胞,酸处理10小时制备的原生质体用激光辐照5分钟,挑取再生后菌落进行筛选,选育出二株高产菌5-20和5-21,最高产酸率分别为9.79％和9.65％,最高转化率分别为69.95％和68.96％,比出发菌提高44.83％和42.70％;5-20菌株在3万升大罐中试生产9罐,平均产酸6.79％,平均转化率为52.06％.     

谷氨酸产生菌原生质体的制备和再生

6株谷氨酸产生菌以甘氨酸、青霉素和溶菌酶不同组合处理,对其原生质体形成进行了比较,在最佳条件下,原生质体形成率可达95～100％。B9-15 菌株细胞形态特殊,表面呈凹陷状,仅在含1.5～2.0％甘氨酸的高渗培养液中就能形成原生质体,在加有壁制剂的丁二酸钠高渗培养基上,所试菌株的原生质体再生率从10.5％～61.8％,差异性较大。     

玉米淀粉双酶水解糖米根霉L - 乳酸发酵的研究

以米根霉（Rhizopus oryzae)NRRL395HS99为菌种，玉米淀粉双酶水解糖为碳源，发酵培养基为基础在摇瓶上确立了最佳发酵条件.并以此为参照进行了50L罐的发酵试验，比较了摇瓶和50L罐发酵的异同。在50L罐中，玉米淀粉双酶水解糖130g/L左右、以重质碳酸钙为中和剂、硅油为消泡剂发酵58－59h可产酸110g/L以上，转化率达87％左右。重质碳酸钙应用于米根霉L－乳酸发酵对于降低生产成本具有重要意义。     

沼泽红假单胞菌高产辅酶Q10菌株的诱变选育研究

以沼泽红假单胞菌为出发菌株,通过紫外诱变和罗红霉素抗性筛选,以期获得辅酶Q10高产菌株.试验结果表明,紫外照射时间60-70s时可能达到最大正向突变概率.通过紫外诱变、罗红霉素初筛和发酵复筛,获得一株沼泽红假单胞菌突变株R-1,辅酶Q10产量达到0.021g/L,较出发菌株产量（0.018g/L）提高16％.经过6次传代培养,突变菌株产辅酶Q10产量稳定,可用于进一步研究.     

"神舟"五号飞船搭载茅台酒大曲中酵母菌的分离及特性的初步研究

对经“神舟”五号载人飞船搭载的茅台酒大曲中的酵母菌进行了分离，从中筛选出一株产酒精体积分数达6．2％和产酯达0．627g／L的菌株MT-14作为备用菌种资源，初步鉴定为酵母属的酿酒酵母（Saccharamyces Cerevisiae），其发酵特性优于厂家提供的茅台酒酵母JG3220。     

洗涤剂用碱性纤维素酶产生菌的菌种选育

以实验室提供的一株嗜碱性芽孢杆菌Ｖ１－１－３为出发菌株，经过甲基磺酸乙酯（ＥＭＳ）的二次诱变处理及青霉素、链霉素、万古霉素和头孢霉素等抗性平板的筛选，得到一株耐青霉素的高产变异新菌株，产纤维素酶的能力大大提高，酶活（发酵液）从１５．２０ｕ／ｍＬ提高到２９．３６ｕ／ｍＬ。